王晓燕 作品数:15 被引量:51 H指数:4 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 湖北省杰出青年人才基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
立体式教学模式在病理学实习教学中的建立和应用 被引量:4 2015年 目的:探讨立体式教学模式在病理学实习教学中的应用效果。方法:选择临床医学五年制本科二年级学生136人为研究对象,并随机分为实验组和对照组。实验组在实习课上采取立体式教学模式,对照组则采取传统教学模式,然后评价两组的教学效果。结果:实验组学生理论和实习考试成绩均明显优于对照组学生。结论:立体式教学模式将传统的教学方法与现代先进的教学手段有机地结合起来,提高了病理学实习的教学质量。 赵霞 王晓燕 况东 段亚琦 王国平关键词:立体式教学 病理学 实习教学 高同型半胱氨酸血症大鼠冠状动脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达 被引量:7 2008年 目的观察高同型半胱氨酸血症对大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1的影响,以明了冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病机制。方法24只大鼠随机分成正常饮食对照组、高蛋氨酸饮食组、高蛋氨酸+叶酸饮食组、高半胱氨酸饮食组。每组6只,分别给予普通饲料;普通饲料加1.7%蛋氨酸;普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%叶酸;普通饲料加1.2%半胱氨酸。饲养6周,采用高效液相色谱荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度,免疫组织化学染色法检测大鼠冠状动脉左主干和左前降支内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达。结果喂以高蛋氨酸饲料6周,可诱导大鼠高同型半胱氨酸血症。与正常饮食对照组比较,高蛋氨酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度显著升高(P<0.01),冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平明显增强;高蛋氨酸+叶酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸水平较高蛋氨酸饮食组显著降低(P<0.01),其冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平也降低;高半胱氨酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度,以及冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平与正常饮食对照组比较差异无显著性。结论高同型半胱氨酸血症促进了大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1,在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生和发展中起着重要的作用。 袁征 王晓燕 曾玉梅 董伟 陈多恩 王国平关键词:高同型半胱氨酸血症 冠状动脉内皮细胞 单核细胞趋化蛋白1 叶酸 乙型肝炎病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建与表达 被引量:10 2006年 目的研究乙型肝炎病毒(HBV)启动子(含增强子)调控下的增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 报告基因在肝癌细胞中的表达。方法用聚合酶链反应(PCR)技术分别扩增出HBV的4个启动子,载入 T载体,测序后插入到含EGFP报告基因的质粒pEGFP-1,构建出HBV不同启动子调控的EGFP基因表达载体,经酶切、测序鉴定各重组体。采用脂质体介导法将4种构建好的载体转染肝癌细胞株H e p G 2,用倒置荧光显微镜观察各重组体转染细胞中EGFP的表达。结果各目的片段测序正确并成功插入表达载体中, 转染了各质粒的阳性细胞克隆均可检测出E G F P的表达,不同启动子调控下的蛋白表达量有所不同。结论 H B V启动子调控下的E G F P报告基因能够在肝癌细胞中特异表达,不同启动子表达效率之间存在一定的差异性,从而为肝脏疾病的基因治疗提供了一个新的选择。 谢娜 王晓燕 张琼 林园园 林菊生关键词:启动区 增强型绿色荧光蛋白 新型抗HBV化合物:-βL-D4A对DNA聚合酶δ的作用及其机制 2008年 目的对DNA聚合酶δ进行纯化和鉴定,通过检测β-L-D4A对DNA聚合酶δ的作用,观察β-L-D4A的毒副作用。方法运用多次离子交换层析的方法提取、纯化人Hela细胞的DNA聚合酶δ;检测β-L-D4A对DNA聚合酶δ的酶动力学作用。结果提纯并鉴定了DNA聚合酶δ,收得率是15%,比活力是1 911 ukat/mg。β-L-D4A为抑制剂时,Km是2.45μmol/L,IC50是150.1μmol/L,K i是132.7μmol/L,均提示β-L-D4A对DNA聚合酶δ的抑制作用远小于拉米夫定。结论β-L-D4A是DNA聚合酶δ的竞争性抑制剂,它对该酶的毒副作用远小于拉米夫定,可望成为更高效低毒的抗HBV类药物。 李岩 林菊生 张颖慧 王晓燕 何星星关键词:核苷类 DNA聚合酶Δ 酶动力学 毒副作用 HBV RNA上La protein结合位点的缺失对自身稳定性的影响 目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)DNA上的突变所造成HBVRNA上Laprotein结合位点的缺失对HBVRNA在宿主细胞内稳定性的影响,评价HBVDNA上这个位点对HBV生命周期的重要性,从而寻找新的抗HBV靶点.方法... 林园园 林菊生 王晓燕 谢娜 周秀敏 宋宇虎关键词:肝炎病毒 突变 文献传递 人遗传印记基因PEG10重组真核表达质粒的构建及其在转染细胞株中的表达 被引量:5 2007年 目的构建人遗传印记基因PEG10的全长表达基因质粒,观察PEG10的过表达对人正常肝细胞及其非肝脏来源的对照细胞的作用。方法将PEG10基因全长cDNA直接连入真核细胞表达质粒pcDNA3.1hisC中,以脂质体介导的方法将该表达质粒pcDNA3.1hisC-PEG10转染入人正常肝细胞及其对照细胞,采用RT-PCR、Western blot、MTT、TUNEL等方法分析PEG10基因在正常人肝细胞及其对照细胞中的表达和功能。结果限制性酶切及DNA测序结果均说明所构建质粒为PEG 10全长表达质粒。该质粒经过稳定筛选后稳定表达于细胞内,促进人肝细胞的生长,抑制其凋亡,但对非肝脏来源的对照组细胞没有明显影响。结论PEG10全长表达质粒的构建为进一步研究PEG10基因的效应和机制提供了有利的工具,研究结果显示PEG10基因可以促进人正常胚肝细胞增殖并抑制其凋亡,但对非肝脏来源的对照组细胞人胚肾细胞株293细胞没有明显效应。 张琼 谢娜 王晓燕 常莹 林园园 林菊生关键词:转染 质粒 利用杆状病毒表达载体系统表达重组乙型肝炎病毒核心蛋白 被引量:3 2007年 目的利用杆状病毒表达载体系统制备重组乙型肝炎病毒核心蛋白。方法构建含有HBV C基因的杆状病毒转移载体pFastBac Dual-HBV core,转化大肠埃希菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid DNA转染昆虫细胞Sf9,获得含有HBV C基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染Sf9细胞进行乙型肝炎病毒核心蛋白表达,然后通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析表达情况。结果成功构建了含HBV C基因的重组杆状病毒,而且在昆虫细胞Sf9中表达了乙型肝炎病毒核心蛋白。结论利用Bac to Bac杆状病毒表达系统,成功地表达了乙型肝炎病毒核心蛋白,为进一步研究奠定了基础。 高琳琳 王晓燕 张颖慧 李岩 邓菲 张艳芳 林菊生关键词:昆虫细胞 PEG10基因在不同转移潜能肝癌细胞中表达的定量分析 被引量:12 2006年 目的通过对不同转移潜能的肝癌细胞株中PEG10基因(parternal express gene 10)表达水平的定量分析,探讨其作为肝癌转移基因的可能性。方法提取肝癌细胞株HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H的RNA,反转录合成第一链cDNA,对反转录产物进行荧光定量PCR。用管家基因-βactin的cDNA起始浓度作为参照标化PEG10的cDNA起始浓度,对标化结果进行方差分析。结果HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H标化后的PEG10 cDNA相对起始浓度分别为(3.15±0.05)×10-3(、5.06±0.03)×10-3(、6.14±0.09)×10-3,各肝癌细胞系之间PEG10表达量差异也存在极显著性意义(P<0.01)。结论PEG10基因表达水平与肝癌细胞的转移潜能呈正相关,可以推测PEG10基因可能是促使肝癌转移的癌基因。 张琼 叶达伟 常莹 宋宇虎 谢娜 王晓燕 林菊生关键词:肝癌 肿瘤转移 荧光定量PCR 乙型肝炎病毒多聚酶基因在重组杆状病毒系统中的表达 被引量:1 2007年 目的利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统制备乙型肝炎病毒多聚酶重组蛋白。方法构建含有乙型肝炎病毒多聚酶基因的杆状病毒转移载体pFastbac Dual-polymerase,转化大肠杆菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid转染昆虫细胞获得含有HBVpol基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染昆虫细胞进行蛋白表达,用SDS-PAGE电泳分析表达情况。结果将所得Bacmid行PCR鉴定,结果表明成功构建了的含乙型肝炎病毒多聚酶基因的重组杆状病毒,SDS-PAGE分析表明该病毒能在昆虫细胞中高效表达重组的多聚酶蛋白。结论利用杆状病毒表达系统,构建的重组杆状病毒在昆虫细胞中高效表达乙型肝炎病毒多聚酶,为进一步的乙型肝炎病毒多聚酶的体外功能研究奠定了基础。 王晓燕 高琳琳 邓菲 张艳芳 林菊生关键词:乙型肝炎病毒 多聚酶 杆状病毒 昆虫细胞 高同型半胱氨酸血症对心肌梗死后心肌组织中SCF表达的影响 被引量:3 2007年 目的通过观察高同型半胱氨酸血症(HHCY)对心肌梗死后大鼠心肌组织中干细胞因子(SCF)表达的影响,探讨HHCY在心肌梗死(MI)后干细胞归巢并修复梗死心肌过程中的作用。方法饮食诱导大鼠HHCY的动物模型;随后建立大鼠MI模型;利用免疫组织化学染色及RT-PCR技术分别检测HHCY对MI后大鼠MI区域及MI灶周围心肌组织内SCF表达的影响。结果MI后大鼠MI灶周围心肌组织中SCF的表达增强(与假结扎组相比);高蛋氨酸饮食组大鼠MI灶周围心肌组织内SCF的表达显著减少(与对照组相比);补充叶酸降低了大鼠血清中同型半胱氨酸浓度,增强了MI灶周围心肌组织内SCF的表达。结论MI上调了MI灶周围心肌组织中SCF的表达,有利于干细胞的归巢并修复梗死的心肌;HHCY抑制了MI灶周围心肌组织内SCF的表达,从而减少由SCF所诱导的干细胞归巢到MI区域,进而抑制了梗死后心肌的修复。 肖桂香 王晓燕 况东 袁征 倪娟 唐长生 朱大和 王国平关键词:高同型半胱氨酸血症 心肌梗死 干细胞因子 干细胞