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虞凌雪

作品数：93 被引量：110H指数：6
供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>
相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 43篇期刊文章
  • 34篇会议论文
  • 16篇专利

领域

  • 80篇农业科学
  • 5篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 71篇病毒
  • 40篇繁殖
  • 38篇呼吸综合征
  • 37篇猪繁殖
  • 37篇繁殖与呼吸综...
  • 34篇猪繁殖与呼吸...
  • 27篇呼吸综合征病...
  • 26篇繁殖与呼吸综...
  • 24篇猪繁殖与呼吸...
  • 18篇PRRSV
  • 17篇蛋白
  • 16篇疫苗
  • 14篇猪瘟
  • 14篇猪瘟病
  • 14篇猪瘟病毒
  • 14篇瘟病毒
  • 12篇弱毒
  • 12篇抗体
  • 11篇荧光
  • 11篇免疫

机构

  • 92篇中国农业科学...
  • 6篇上海交通大学
  • 6篇扬州大学
  • 2篇华中农业大学
  • 2篇内蒙古农业大...
  • 1篇安徽农业大学
  • 1篇河南科技大学
  • 1篇中国农业科学...

作者

  • 93篇虞凌雪
  • 93篇童光志
  • 88篇周艳君
  • 80篇姜一峰
  • 72篇高飞
  • 55篇李丽薇
  • 40篇童武
  • 28篇于海
  • 27篇杨莘
  • 26篇李国新
  • 22篇郑浩
  • 16篇陈鹏飞
  • 14篇单同领
  • 12篇张文超
  • 11篇刘长龙
  • 11篇李慧春
  • 10篇刘欢
  • 10篇李先斌
  • 9篇杨德强
  • 8篇曲泽慧

传媒

  • 31篇中国动物传染...
  • 9篇中国预防兽医...
  • 5篇中国畜牧兽医...
  • 4篇中国畜牧兽医...
  • 3篇中国畜牧兽医...
  • 2篇2013国际...
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇上海市畜牧兽...
  • 1篇第五届中国兽...
  • 1篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 12篇2023
  • 8篇2022
  • 3篇2021
  • 2篇2020
  • 5篇2019
  • 6篇2018
  • 14篇2017
  • 16篇2016
  • 9篇2015
  • 7篇2014
  • 5篇2013
  • 5篇2012
  • 1篇2011
共 93 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
表达海肾或萤火虫荧光素酶基因的PRRSV重组质粒的构建方法以及应用
本发明提供了一种表达海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶基因的蓝耳病病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，及其应用。基于反向遗传操作平台，将海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶基因插入到pHuN4‑F112基因组中，成功构建了pA‑Rl...
高飞童光志周艳君姜一峰曲泽惠李丽薇虞凌雪郑浩
文献传递
表达猪瘟病毒E2蛋白重组PRRS病毒基因工程疫苗的构建方法和应用
本发明提供了一种表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗。基于反向遗传操作平台，根据猪瘟石门株和猪瘟兔化弱毒株C株的E2基因，以及高致病...
童光志高飞姜一峰曲泽慧周艳君李国新虞凌雪李丽薇杨莘郑浩童武夏天奇
猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达被引量：4
2021年
为获得具有良好抗原性的猪圆环病毒3型(PCV3)Cap重组蛋白,根据本实验室已测序获得的1株全基因组序列设计特异性引物,以阳性病料中提取的病毒DNA基因组为模板,通过PCR方法扩增得到PCV3的去核定位信号的Cap蛋白基因,将目的片段插入到pCold TF载体中构建pCold TF-dPCV3-Cap重组质粒,然后将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,通过优化表达和纯化条件,最终获得纯度较高的Cap重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,该蛋白能够在上清液中大量表达,并且在IPTG终浓度为1 mmol/mL、16℃诱导20 h的条件下表达量最高;Western blot结果证实通过磁珠纯化后的目的蛋白与PCV3阳性血清能够发生特异性反应。因此,重组Cap蛋白具有良好的反应原性和特异性,可以作为研制PCV3多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选靶抗原。
王帅勇汪琪朱世强姚云虞凌雪刘晓敏单同领郑浩周艳君童武李国新高飞童光志于海
关键词：原核表达CAP蛋白
2017-2020年我国部分地区PRRSV流行毒株变异情况分析被引量：11
2021年
为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,本研究对采集自上海市、浙江省、江苏省等地区的566份临床样品进行RT-PCR检测,结果显示,其中246份样品呈现PRRSV阳性。对31株Nsp2基因、21株ORF5基因和12株Nsp9基因进行序列测定和比对分析,发现不同地区流行的PRRSV其Nsp2基因片段大小存在明显差异,大部分毒株保持了HP-PRRSV类毒株Nsp2基因“1+29 aa”缺失模式,同时,检测到“111+5+1+19 aa”和“1+29+14 aa”两种新的氨基酸缺失模式。ORF5基因主要分布在谱系L8、L3和L1中,氨基酸突变主要位于GP5的信号肽区域和高变区,部分毒株在中和性抗原表位区域存在L39/I39的氨基酸突变,有1株存在H38L39/Y38S39的氨基酸突,另外,部分毒株在毒力相关位点出现了R13/Q13和R151/K151的氨基酸突变,而Nsp9与毒力相关的氨基酸位点则相对保守。本研究表明上述发病猪场中流行的PRRS毒株复杂多样,其中HP-PRRSV类毒株和NADC30类毒株仍然是主要流行毒株,养猪场有必要持续监测PRRSV流行毒株的变异动态,为PRRS的科学防控提供参考依据。
吴瑕劳梦琴谭祥梅陈鹏飞于家荣朱钧锐张玉娇虞凌雪高飞姜一峰童光志周艳君
关键词：PRRSVNSP2ORF5
猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白磷酸化位点鉴定及其作用研究被引量：1
2017年
为了探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白磷酸化对于病毒复制和转录的影响,本研究利用Phos-tag和点突变技术实现了N蛋白磷酸化形式的分离并鉴定出磷酸化位点为第120位丝氨酸(Ser120)。通过反向遗传操作系统将N蛋白的磷酸化位点突变并拯救出病毒。空斑实验、IFA检测、病毒生长曲线结果显示,磷酸化位点突变对于病毒的感染性和N蛋白的核定位没有影响,但是病毒的复制能力减弱。进一步利用荧光定量RT-PCR方法检测突变病毒与亲本病毒在不同感染时间的基因组RNA和亚基因组RNA的转录水平,结果表明突变病毒的g RNA和长链sg RNAs转录水平明显低于亲本病毒,表明N蛋白Ser120磷酸化可能参与了病毒的转录调控过程。
刘欢姜一峰黄勤锋杨莘张文超虞凌雪高飞周艳君童光志
关键词：PRRSVN蛋白磷酸化转录调控
表达猪瘟病毒E2蛋白重组猪繁殖与呼吸道综合征病毒的研究被引量：3
2012年
为构建表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白重组猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV),本研究首先利用高致病性PRRSV弱毒疫苗HuN4-F112株的感染性分子克隆作为平台,构建了一个在nsp2区有缺失的感染性分子克隆,命名为pHuN4-F112-△480-620。以pHuN4-F112-△480-620作为载体,采用突变PCR的方法将CSFV的主要保护性抗原E2基因1 bp～9 99 bp,1 bp～600 bp,1 bp～330 bp及256 bp～330 bp基因片段分别插到nsp2中aa 480～aa 620位氨基酸缺失编码区域。结果显示,插入完整E2基因或较大E2基因片段的重组PRRSV cDNA质粒均未能拯救出病毒,只有插入较小的E2基因片段(256 bp～330 bp)的重组病毒cDNA质粒成功地拯救出了重组病毒rPRRSV-F112-E2(256-330),拯救的病毒能够在MARC-145细胞上引起明显的细胞病变,而且生长速度明显高于其亲本病毒,间接荧光检测表明该重组病毒能够表达外源基因。
童武周艳君徐彦召姜一峰王亚欣张善瑞朱建平虞凌雪孙晶陈焕春童光志
关键词：猪繁殖与呼吸道综合征病毒猪瘟病毒感染性分子克隆重组病毒
猪源MHC Ⅱ类分子反式激活因子CIITA SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
2022年
Class Ⅱ Transactivator(CIITA)作为重要的MHCⅡ类分子反式激活因子在抗原递呈细胞的成熟和功能实现过程中发挥关键作用,为建立一种快速检测猪源CIITA基因的方法,本研究根据GenBank中猪源CIITA基因序列设计引物,从猪肺泡巨噬细胞的总cDNA中扩增CIITA基因,并克隆到pCold-TF载体中获得重组质粒pCold-TF-CIITA。利用重组质粒pCold-TF-CIITA作为标准品建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。试验结果显示:该方法在1.68×10^(1)~1.68×10^(7) copies/μL范围内呈现出良好的线性关系,检测灵敏度可达16.8 copies/μL,组内和组间变异系数均小于1%。利用该方法对不同细胞中的CIITA基因进行检测,结果显示该方法仅能够检测到猪源细胞中的CIITA基因。本试验结果表明,利用pCold-TF-CIITA作为标准品建立的CIITA基因SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于CIITA基因的定量检测。
朱豪杰高飞李丽薇虞凌雪张玉娇张宽童光志姜一峰李国新
猪流行性腹泻病毒Nsp12与宿主RNF7蛋白相互作用的研究
2021年
猪流行性腹泻病毒(PEDV)编码的Nsp12蛋白具有RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)活性,在PEDV复制过程中发挥重要作用。为了研究与Nsp12蛋白相互作用的宿主细胞蛋白对PEDV复制的影响,本研究利用酵母双杂交技术将诱饵质粒pGBKT7-Nsp12与猪小肠绒毛上皮细胞(IECs)cDNA酵母表达文库进行杂交筛选,获得的阳性克隆经过测序鉴定证实为环指蛋白7(RNF7),将pGBKT7-Nsp12与p GADT7-RNF7进行酵母回复验证,结果显示二者共转化后能分解SD/-4/X/A中的X-α-Gal形成蓝色菌落,表明Nsp12与RNF7蛋白在酵母中存在相互作用。同时,构建p CAGGS-Nsp12-HA和p CAGGS-Flag-RNF7真核表达载体,利用针对不同标签的抗体进行正向和反向免疫共沉淀鉴定,进一步证实PEDV Nsp12蛋白与RNF7蛋白之间存在直接相互作用;激光共聚焦显微镜观察发现Nsp12蛋白和RNF7蛋白在细胞质中存在共定位现象。为了分析宿主细胞中RNF7蛋白异常表达对PEDV增殖的影响,将构建的RNF7真核表达质粒pcDNA3.1-RNF7转染LLC-PK1细胞后,再用PEDV感染过表达RNF7的LLC-PK1细胞,通过western blot检测LLC-PK1细胞中PEDV N蛋白表达量,荧光定量PCR检测PEDV N基因转录水平,采用TCID50方法检测病毒滴度,结果显示,过表达RNF7后LLCPK1细胞内PEDV N蛋白表达量和N基因拷贝数均下降,其子代病毒滴度也明显低于正常对照组,表明过表达RNF7蛋白可以抑制PEDV的增殖。而利用si RNA-178敲低宿主细胞内源性RNF7蛋白的表达,再以MOI 0.01的PEDV感染后,对感染后不同时间的细胞样品进行western blot检测和病毒滴度检测,结果显示在PEDV感染后24 h,细胞内PEDV N蛋白表达量明显增加,PEDV的滴度在感染后18 h和24 h时分别是对照组的1.10倍和1.17倍。本研究结果首次证实了宿主细胞中RNF7蛋白表达对PEDV的复制发挥负调控作用,为深入探究PEDV复制调控的分子机制奠定了基础。
赵雄伟李慧春陈鹏飞周书亭吴瑕劳梦琴童武高飞虞凌雪刘长龙孔宁单同领于海姜一峰童光志童光志
关键词：猪流行性腹泻病毒蛋白相互作用
表达猪源GM-CSF重组PRRS病毒的体内免疫保护效力及免疫调节机制分析
<正>引言猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染能够延迟宿主产生中和抗体和细胞免疫应答,造成免疫抑制。树突状细胞(DC)作为专业抗原递呈细胞,能够被粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)募集、活化并成熟,进而引发获...
虞凌雪周艳君姜一峰童武高飞李丽薇赵款童光志
文献传递
猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白与天然免疫限制因子SAMHD1相互作用的分析与鉴定
<正>猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)仍然是世界范围内养猪业的防控重点,并且其仍在持续的进化。特别是高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV),对我国的养猪业构成了巨大的威胁。PRRSV难以控制的原因之一在于...
杨莘姜一峰虞凌雪高飞李丽薇刘欢黄勤峰周艳君童光志
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白复合体
文献传递
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