陈观今
- 作品数：87 被引量：364H指数：13
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- 恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs25和Pfs48/45基因编码序列的体外扩增被引量：34
- 1998年
- 目的：体外扩增编码恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs和Pfs48／45的基因序列，为进一步对其进行克隆和体外高效表达创造条件。方法：特定寡核苷酸引物的设计、合成与纯化；恶性疟原虫FCC1／HN株体外培养；利用碱裂解法从培养的恶性疟原虫FCC1／HN株提取染色体DNA；PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析。结果：从恶性疟原虫FCC1／HN株基因组DNA中特异扩增出编码Pfs25和Pfs48／45基因序列，其片段大小分别为657bp和1，359bp。而用间日疟原虫基因组DNA为模板作对照，无扩增条带出现。结论：体外扩增编码恶性疟原虫传播阻断抗原Pfs25和Pfs48／45基因序列与预期长度相符合，从而，为该基因的克隆、测序和表达奠定基础。
- 罗树红余新炳李学荣陈观今
- 关键词：恶性疟原虫
- 地高辛素标记弓形虫DNA探针的制备及在产前诊断的应用被引量：19
- 1995年
- 本文建立了地高辛素标记的弓形虫ＤＮＡ探针并在２３例产前咨询孕妇中作产前诊断。通过聚合酶链反应扩增弓形虫ＲＨ株ＴＧＲ４核酸片段，扩增产物７７８ｂｐ片段经寡核苷酸层析柱纯化后，用地高辛素标记作为探针，与待检材料斑点杂交。结果显示该探针与待杂交的弓形虫ＲＨ、ＺＳ１、ＺＳ２、ＳＨ１株ＤＮＡ杂交；而与恶性疟原虫、卡氏肺孢子虫、杜氏利什曼原虫、大肠杆菌、巨细胞病毒ＤＮＡ无杂交。并能在待杂交液中检测出相当于１ｐｇ水平ＤＮＡ，表明该探针具有高度的特异性及敏感性。检测２３例孕期１０—１４周孕妇中，阳性３例，其中一孕妇外周血、绒毛组织及羊水均呈阳性。另一例的外周血及绒毛组织呈阳性。该探针稳定、敏感、操作简单，具有推广意义。
- 陈观今韦相才朱家铭罗超权郑焕钦
- 关键词：弓形体病产前诊断DNA探针
- HIV-1感染引起的细胞凋亡机制及相关的病毒基因被引量：3
- 2002年
- 陈海峰陈观今
- 关键词：艾滋病HIV-1感染细胞凋亡病毒基因
- P43基因在造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断中的应用
- 2003年
- 目的建立快速、特异、敏感诊断造血干细胞移植(HSCT)患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并讨论其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对56例造血干细胞移植受者及20例正常供者同时进行检测。结果检测造血干细胞移植受者56例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为10及7例;其阳性率分别为17.86％和14.3％。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。
- 周永安余新炳徐劲郑焕钦吴忠道陈观今乔振华
- 关键词：造血干细胞移植弓形虫感染
- 紫外线减毒弓形虫ZS1株滋养体免疫小鼠的体液免疫反应被引量：3
- 1999年
- 探讨紫外线减毒弓形虫活疫苗在小鼠体内的免疫保护性和体液免疫反应。采用波长为２ ５３７Ａ 的紫外灯照射弓形虫ＺＳ１ 株滋养体，照射距离５ｃｍ ，照射时间分别为３０ 、６０ 、９０ｍｉｎ 和１２０ｍｉｎ 。小鼠分为４ 组，组１ 为免疫组，组２ 为免疫攻击组，组３ 为感染组，组４ 为正常对照组。接种照射３０ｍｉｎ 虫体的小鼠在接种后７ ～８ｄ 全部死亡，其他免疫接种小鼠均正常存活，各组织未查见滋养体、假包囊或包囊。用同株滋养体攻击感染，免疫攻击组小鼠较单感染组小鼠存活时间延长。经ＥＬＩＳＡ及ＩＨＡ检测，免疫组及免疫攻击组血清ＩｇＧ抗体滴度增高，提示紫外线减毒弓形虫ＺＳ１ 株疫苗免疫小鼠后能够刺激机体产生一定的免疫保护力，其中体液免疫可能发挥着一定作用。
- 吕芳丽郑焕钦陈观今
- 关键词：弓形虫IGG体液免疫反应
- 弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定被引量：1
- 2001年
- 目的 :体外扩增弓形体主要表面抗原 SAG1基因 ,构建 pc DNA3- SAG1真核表达质粒 ,为研制弓形体疫苗奠定基础。方法 :采用 PCR技术 ,自行设计一对寡核酸引物 (P1,P2 ) ,从弓形体 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码SAG1抗原的基因片段。扩增的目的片段经纯化后用 Eco R1和 Hind 双酶切后 ,克隆到真核表达质粒 pc DNA3中 ,转化入大肠杆菌 TG1,用氨苄青霉素和 PCR初筛 ,将 PCR扩增阳性的重组子分别用 Sac1单酶切、Eco R1和 Hind 双酶切鉴定。结果成功地构建真核型表达质粒 pc DNA 3- SAG1,从而为进一步 SAG1重组抗原的体外表达创造有利条件。结果 :从 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码 SAG1的全基因序列 ,扩增目的基因片段大小与预期长度(10 2 5 bp) ,相符 ;将分离、纯化的目的基因片段 SAG1插入 pc DNA3质粒 Hind 和 Eco R1位点 ,构建重组质粒pc DNA3- SAG1。结论 :成功构建重组质粒 pc DNA3-
- 周永安陈观今刘彦文罗树红
- 关键词：弓形体基因扩增基因克隆
- 机会致病寄生原虫的系列研究
- 1998年
- 本课题包括：①对机会致病寄生虫，包括弓形虫、卡氏肺孢子虫及隐孢子虫动物模型的建立，虫体的分离及提纯；②弓形虫感染的循环抗原（ＣＡ）和抗体（ＩｇＧ、ＩｇＭ），用竞争抑制酶联免疫吸附试验（ＩＥＬＩＳＡ）、金葡菌Ａ蛋白酶联免疫吸附试验（ＳＰＡＥＬＩＳＡ）、直接捕获法酶联免疫吸附试验（ＤＥＬＩＳＡ）进行检测；③用地高辛标记探针及聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测核酸，自由引物ＰＣＲ鉴别弓形虫株以及生物特性；④用流式细胞仪对卡氏肺孢子虫及弓形虫的ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质含量的动力学进行了分析；⑤用激光微束系统对含８个子孢子成熟包囊施行手术，切除４个或２个子孢子后，包囊仍具有感染力。
- 陈观今郭小华韦相才刘达宏连德润郑焕钦
- 关键词：免疫学疾病模型孢子虫纲弓形体
- 弓形虫病的现代治疗被引量：14
- 2000年
- 万红娇郭虹陈观今
- 关键词：弓形虫病药物疗法中医药疗法免疫疗法
- 弓形虫ZS_2和RH株基因差异表达的研究被引量：3
- 2003年
- 从RH和ZS2株弓形虫抽提纯化mRNA,经反转录后获得的双链cDNA分别作为driver和tester,采用抑制消减杂交技术(suppressionsubstractionhybridization,SSH)技术扩增ZS2株中差异表达的基因.电泳图谱显示消减的cDNA与未消减的cDNAPCR扩增产物存在明显的差异,说明ZS2和RH株弓形虫转录水平存在着差异.
- 汪琦陈观今郑焕钦
- 关键词：弓形虫基因抑制消减杂交技术
- 弓形虫SAG1、ROP1基因及其复合抗原基因(SAG1/ROP1)的核酸免疫研究
- 陈观今郑焕钦郭虹陈海峰周永安李华文
- 该项研究创新地率先筛选出弓形虫SAG1和ROP1靶基因，成功构建了SAG1、ROP1、SAG1/ ROP1 复合抗原基因的原核及真核表达质粒，并在体外原核和真核细胞系统中成功表达。重组真核表达质粒在小鼠骨骼肌细胞中能有效...
- 关键词：
- 关键词：弓形虫抗原基因核酸免疫
