卞继峰
- 作品数：85 被引量：239H指数：8
- 供职机构：山东大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 中国妇女宫颈癌中HPV16E6基因序列分析及分子克隆被引量：2
- 1999年
- 人乳头瘤病毒16型（Humanpapillomavirustype16，HPV16）感染与宫颈癌的发生有密切关系。研究发现，HPVI6早期蛋白E6是肿瘤相关抗原，可在HI，V相关肿瘤中持续表达，为肿瘤治疗性疫苗的研制及免疫治疗提供了靶位。但也有文献报道，宫颈癌中HPVI6E6基因可有一定的变异性，...
- 赵蔚明许雪梅周亚滨陈华波栾怡齐眉卞继峰于修平
- 关键词：宫颈癌HPV16E6基因序列分析分子克隆
- 人乳头瘤病毒16型完整E6开放读码框的基因克隆和鉴定被引量：3
- 1997年
- 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）基因组中扩增得到５５５ｂｐ的Ｅ６ＤＮＡ片段，并重组到载体ｐＧＥＭＥＸＴＭ－１中，构建克隆扩增质粒ｐ１６Ｅ６－Ｇ，将此重组质粒转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经菌落原位杂交鉴定和限制性酶切图谱分析，证实该产物为Ｅ６基因完整开放读码框（ＯＲＦ），从而为获得Ｅ６ＯＲＦ基因片段提供了一个高效。
- 栾怡于修平赵蔚明董杰德周亚滨卞继峰
- 关键词：乳头瘤病毒质粒基因克隆
- 含变形链球菌PAcA基因的真核表达质粒pcDNA3.1-PAcA的构建与鉴定被引量：2
- 2002年
- 目的 :构建含有免疫刺激序列、可防止变形链球菌在牙面粘附的DNA疫苗。方法 :利用PCR技术由质粒pPAcA CTA2 B扩增编码PAcA的DNA片段 ;通过T A克隆技术将目的DNA片段克隆于载体pMD1 8 T ,鉴定插入方向后 ,将目的DNA从载体上释放 ,再克隆于含有CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3 .1 ,构建出用作防龋疫苗的真核表达质粒pcDNA3 .1 PAcA。结果 :通过对重组质粒pcDNA3 .1 PAcA进行酶切图谱和DNA序列测定分析 ,证明真核表达重组质粒pcDNA3 .1 PAcA构建成功、阅读框架正确。结论 :利用T A克隆等技术可成功将编码PAcA的DNA片段克隆到含有免疫刺激序列CpG的真核表达载体pcDNA3 .1 ,构建出真核表达重组质粒pcDNA3 .1 PAcA。
- 杨小青姜广水张兆莲王晶杨丕山刘贤锡卞继峰胡海燕耿昭卢翌
- 关键词：疫苗构建CPG基元变形链球菌
- 乳头瘤病毒重组减毒沙门菌疫苗的构建及诱导黏膜免疫的研究被引量：4
- 2004年
- 卞继峰于修平胡海燕耿昭卢翌刘浩
- 关键词：乳头瘤病毒黏膜免疫
- 子宫颈鳞癌 Rb 基因与 HPV16 E7 基因的相关性研究被引量：1
- 1997年
- 用多聚酶链反应—单链构象多态性分析（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）以及地高辛标记探针斑点杂交技术对３０例子宫颈鳞癌组织中Ｒｂ抑癌基因及ＨＰＶ１６Ｅ７癌基因进行分析。结果３０例子宫颈鳞癌组织中未检出Ｒｂ基因突变或缺失；２０例癌组织中检出ＨＰＶ１６Ｅ７ＤＮＡ，阳性率为６７％。提示ＨＰＶ１６Ｅ７癌基因与子宫颈鳞癌密切相关。子宫颈鳞癌中Ｒｂ基因结构异常并不常见，而且与ＨＰＶ１６Ｅ７基因的存在状况无明显相关性。
- 赵蔚明于修平周亚滨周亚滨董杰德司静懿董杰德阎世坤
- 关键词：子宫颈肿瘤致癌基因
- 汉坦病毒基因分型方法的建立及应用
- 目的:现今国内对汉坦病毒(HV)的分型主要依据血清学方法,但都存在一些问题:空斑减少中和实验(PRNT)、血凝抑制实验(HI),较费时且费用较高,结果判定和解释有困难,因此,难以推广;比较可靠、经济的方法是以单克隆抗体(...
- 贾继辉于修平王勇卞继峰赵蔚明周亚滨栾怡齐眉杨海宁张茂修
- 文献传递
- 新型双启动子表达质粒pCMVnir的构建及其促进基因免疫效果的研究被引量：1
- 2005年
- 目的构建一种新型双启动子表达载体pCMVnir,研究其与胞内寄生菌联合应用促进基因免疫效果的作用。方法细菌硝酸盐还原酶基因B启动子nirB为厌氧诱导启动子,根据nirB启动子的结构,设计合成改良的nirB,置换三启动子载体pTriEx4中的T7Lac和P10启动子,而保留其CMVie启动子,获得携带CMVie和nirB双种启动子的新型载体pCMVnir,或称为pCN。构建pCNEGFP和pCNDsRed两种报告质粒,分别转化S.SL3261、E.coliDH5α和CHO等细胞,检测报告基因的表达情况以确定两种启动子的活性。pCNEGFP转化S.SL3261,接种BALBc小鼠,定期解剖小鼠收集黏膜相关淋巴组织,观察重组细菌和载体DNA在细胞中的定植及稳定性。免疫接种小鼠,并定期收集小鼠血清和阴道分泌物,以重组rEGFP为抗原,用ELISA方法研究其增强免疫应答的能力。并构建人乳头瘤病毒L1E7双启动子pCN16L1E7及对照单启动子载体pCMV16L1E7和pNir16L1E7,对比三者诱导黏膜免疫的差别。结果双启动子表达载体pCMVnir可在细菌和真核细胞中有效表达报告基因,在细菌中可形成肉眼可见的荧光菌落和沉淀,转染CHO等真核细胞能够表达荧光蛋白,表明pCMVnir载体的两种启动子都有活性,其中nirB活性是受兼性厌氧调控的。pCMVnir与细菌有较好的相容性,重组细菌可在动物体内有限复制和定植达6周,质粒可在细菌中稳定存在。以rEGFP为抗原检测发现pCNEGFP诱导的免疫反应高于常用的单启动子载体pCMVEGFP。人乳头瘤病毒双启动子载体pCN16L1E7诱导的免疫反应也高于其他单启动子载体。结论双启动子表达载体pCMVnir与减毒胞内寄生菌匹配应用,能够提高抗原表达量及增强基因免疫反应的强度。并可作为一般基因克隆和表达载体,特别是作为原核表达载体,不用添加诱导物,即可获得大量表达。
- 卞继峰于修平耿昭卢翌穆玉兰胡海燕刘浩
- 关键词：基因免疫启动子表达质粒免疫效果BALB/C小鼠原核表达载体
- HPV58 E6体外降解p53蛋白作用的研究
- 2002年
- 通过PCR方法从人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)全基因克隆中扩增出HPV5 8E6基因片段 ,克隆至真核表达质粒pcDNA3的T7启动子下游 ,并在体外转录成mRNA后 ,在源自网织红细胞的翻译缓冲液中成功表达了含有生物素标记的HPV5 8E6蛋白 ,并在体外成功发现HPV5 8E6能够降解p5 3蛋白 ,从而推断结合并降解p5 3蛋白是其致癌作用的关键环节 。
- 杨海宁于修平卞继峰JasonJChen赵蔚明贾继辉周亚滨刘颖栾怡齐眉
- 关键词：体外降解P53蛋白乳头状瘤病毒抑癌蛋白
- 弓形虫表面抗原P22、P30复合基因在原核细胞中表达的研究被引量：12
- 2002年
- 目的 :对含有P2 2、P30复合基因的重组菌进行IPTG诱导表达 ,进而检测复合基因的融合表达产物的免疫活性。方法 :用IPTG对工程菌进行诱导表达 ,表达产物行SDS PAGE蛋白凝胶电泳及Western Blot免疫印记检测。结果 :蛋白电泳结果显示 ,阳性重组菌比阴性菌在 6 6 .5KDa位置上明显多一条带 ,此条带可与P30抗体结合并使免疫印记显示阳性结果。结论 :含有P2 2、P30基因片段的质粒重组体经诱导表达出融合蛋白 ,其内的组分蛋白P30具有与其相应抗体结合的能力。
- 古钦民王伟卞继峰丛华胡海燕何深一李瑛
- 关键词：弓形虫基因P30基因P22
- 病毒衣壳装配和核酸包装机制的研究进展被引量：3
- 1999年
- 卞继峰于修平
