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吕恒: 作品数：38 被引量：106H指数：7; 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>; 发文基金：江苏省科技支撑计划项目国家科技重大专项南京军区面上课题更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学环境科学与工程更多>>

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“三防”医学救援体系能力建设的思考被引量：14: 2015年; 结合历次重大活动核、生、化(Nuclear,Biological and Chemical,NBC,简称"三防")医学救援安保任务中所积累的实战经验,重点分析了军队"三防"医学救援力量建设职能任务定位(包括职能任务定位,建设目标定位,功能编组定位)、体系建设任务(包括组织建设,预案制度建设,专业技术建设)和存在的突出问题(包括预案操作性不强,现场处置技能薄弱,装备药材品量不适用)。同时就如何提升我军"三防"医学救援体系能力进行了深入思考:(1)围绕高效精准,着力强化组织指挥(包括编设精干的指挥机构,配强一线骨干,强化指挥能力训练);(2)围绕科学精湛,着力提升专业救援能力(包括完善配套方案预案,加强专业人才培养,加强训练演练);(3)围绕精良配套,着力构筑核心装备体系(包括坚持顶层设计、强化核心装备的自动化和信息化,坚持任务牵引、强化资源的战略管理和调控作用,坚持夯实创新发展基础、形成核心技术装备的自主可控);(4)围绕独立可持续,着力提高自我保障能力(包括提升运输保障能力,提升通信保障能力。提升生活保障能力)。; 吕恒刘鹏曹勇平王长军; 关键词：三防医学救援

二十国集团峰会安保“三防”医学救援队训练的实施与思考被引量：1: 2016年; 目的:总结二十国集团(G20)峰会安保"三防"医学救援队训练的做法和经验,为今后重大活动保障提供借鉴。方法:回顾总结2016年6月21日—9月3日"三防"医学救援队的训练方法制定和实施的做法和经验。结果:增强了人才培养力度,提高了"三防"医学救援队的应急保障能力。结论:指挥能力训练是前提,专业能力训练是核心,紧贴实战是保证。; 李文豪吕恒王长军曹勇平毛应华斯友良杨龙

用于以RT-LAMP法检测H7N9禽流感病毒的引物、试剂盒、检测方法: 本发明涉及一种用于以RT-LAMP法检测H7N9禽流感病毒的引物、试剂盒、检测方法。该引物包括H7引物组和N9引物组，可有效检测H7N9禽流感病毒。该试剂盒包括前述引物，可用于检测H7N9禽流感病毒。该检测方法采用前述试...; 王长军张锦海李丙军胡丹吕恒; 文献传递

H7N9禽流感病毒重组质粒构建及应用被引量：1: 2013年; 目的构建一种含H7N9禽流感病毒全长血凝素/神经氨酸酶/基质蛋白(HA/NA/M)基因的重组质粒,为核酸检测方法提供一种通用的阳性定量标准品。方法设计H7N9禽流感病毒HA、NA及M抗原基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H7N9禽流感病毒总RNA后用实时荧光定量PCR获得相应片段,用3次酶切连接方法,依次插入到pGEM-T easy质粒,进行测序确认;线性化后的重组质粒用T7 RNA聚合酶进行体外转录,RNA转录产物纯化后测定浓度,用实时荧光定量PCR构建标准曲线进行验证。结果 HA、NA和M基因扩增片段大小分别约为1.7、1.3、1.1 kb,与预期相符;构建的重组质粒pGEM-HA-NA-M插入片段的测序结果与GenBank公布序列一致;由重组质粒体外转录获得同时含有H7N9禽流感病毒HA、NA、M全长开放阅读框序列的RNA片段质量浓度为399.5 ng/μL,梯度稀释后用3种实时荧光定量PCR方法均获得了良好的标准曲线。结论成功构建重组质粒pGEM-HA-NA-M,由此质粒体外转录获得的RNA片段可作为H7N9禽流感病毒核酸快速检测方法通用的阳性定量标准品。; 张锦海陈文琦胡丹王平吕恒刘玉陈凤娟任浩王长军; 关键词：血凝素神经氨酸酶基质蛋白标准品

2型猪链球菌89K毒力岛Ⅳ型分泌系统LAMP检测方法的建立被引量：11: 2014年; 目的建立针对高致病性2型猪链球菌（Streptococcus suis 2，SS2）89K毒力岛Ⅳ型分泌系统的环介导等温扩增（100p-mediated isothermal amplification，LAMP）方法。方法根据国内流行株特有89K毒力岛编码的Ⅳ型分泌系统（T4SS-89K）的virB4-89K基因保守区域设计并合成LAMP引物，通过优化反应体系和扩增条件建立T4SS-89K快速检测方法，对方法的特异性、敏感性进行评估。结果优化的LAMP反应体系具有良好的扩增效率，检测灵敏度为1．53×10^-1拷贝／反应，全部扩增检测可在60rain内完成；建立的LAMP法具有良好的特异性，与不含T4SS-89K的猪链球菌（包括1／2型、1型、3-33型），以及其他常见9种对照菌均不发生特异性扩增，而与1998和2005年疫情现场分离的高致病性SS2均可发生特异性扩增。结论建立的LAMP方法具有特异、灵敏，设备要求简单等特点，可用于高致病性SS2快速检测。; 张凤玉胡丹吕恒张锦海郝丽娜龚秀芳操敏郑峰耿美玲朱进李丙军潘秀珍王长军

用于以RT-LAMP法检测肾综合征出血热病毒的引物、试剂盒、检测方法: 本发明涉及一种用于以RT-LAMP法检测肾综合征出血热病毒的引物、试剂盒、检测方法。该引物包括HTNV引物组和SEOV引物组，两引物组分别包括外引物对，内引物对，以及环引物对，其序列如SEQ？ID？NO:3-14所示。该...; 王长军胡丹张锦海郝丽娜吕恒谭维国; 文献传递

H5N1禽流感病毒基因重组质粒PGEM-HA-NA-M的构建及应用: 目的：构建一种含H5N1禽流感病毒全长HA/NA/M基因的重组质粒,并为病原学检测提供阳性定量标准品。方法：设计H5N1禽流感病毒HA、NA及M抗原基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H5N1禽流感病毒总RNA后用RT-P...; 张锦海吕恒王长军鲁娟东顾海涛王平; 关键词：禽流感病毒血凝素神经氨酸酶基质蛋白; 文献传递

新型布尼亚病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立被引量：5: 2016年; 目的应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立新型布尼亚病毒(SFTSV)可视化快速检测方法。方法针对新型布尼亚病毒的S片段基因设计LAMP引物建立LAMP方法。反应体系内加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为反应扩增指示剂,根据LAMP浊度仪扩增结果优化反应条件,根据HNB颜色变化进行结果判定,评估LAMP方法的特异性和灵敏性。结果建立的LAMP方法最低检出限为10拷贝/反应管;方法的特异性高,仅SFTSV反应管颜色由紫罗兰变为天蓝色,而汉坦病毒、新疆出血热、Q热、马尔堡、埃博拉病毒及阴性对照反应管均未发生变色反应;LAMP反应的最佳温度为63℃,其扩增效率高于常规PCR,试验过程仅需30min。结论建立的可视化SFTSV LAMP检测方法具有特异性强,灵敏性高,实验设备要求简单等优点,可用于SFTSV的快速检测。; 吕恒钟璟浩张锦海王平王长军

克里米亚-刚果出血热病毒可视化逆转录环介导等温扩增快速检测法的建立被引量：1: 2016年; 目的建立克里米亚刚果出血热病毒（Crimean-Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV）的可视化逆转录环介导等温扩增（reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RTLAMP）快速检测法.方法体外合成CCHFV的S基因,构建重组质粒,体外转录为模板RNA,在线设计3组LAMP引物,使用实时浊度仪筛选出最佳引物,以羟基萘酚蓝（Hydroxynaphthol blue,HNB）作为指示剂,建立可视化RT-LAMP反应体系.结果实时浊度检测结果显示合成的3组LAMP引物中第1组引物的扩增效率最高,峰值出现于20 min.添加环引物后,扩增效率进一步提高,13 min即可达到峰值.利用最佳引物建立的CCHFV可视化RT-LAMP检测法最低检测限浓度为10拷贝/μl,检出时间为30 min,较巢式RT-PCR法和实时定量RT-PCR法分别高1-3个数量级.该方法稳定性好,不会与症状相近的病原体如肾综合征出血热汉坦病毒（汉滩型和汉城型）、马尔堡病毒、新型布尼亚病毒、埃博拉病毒（GP蛋白和VP蛋白）产生交叉反应.结论建立的CCHFV可视化RT-LAMP检测法,灵敏度好、特异度高、快速廉价、操作简单,无需开盖即可直接观察结果,适用于条件有限的基层单位和偏远地区.但仍需临床样本进行进一步验证.; 韩一芳钟璟皓张晨张琪吕恒胡丹张锦海王长军; 关键词：克里米亚-刚果出血热

贝氏柯克斯体可视化等温扩增法建立被引量：1: 2017年; 目的建立针对贝氏柯克斯体的快速可视化环介导等温扩增(LAMP)方法。方法体外合成贝氏柯克斯体的IS1111a基因,构建重组质粒。利用在线引物设计软件设计3组LAMP引物,用实时浊度仪筛选出最佳引物,同时对羟基萘酚蓝浓度进行优化,建立可视化LAMP反应体系,并评价其敏感性和特异性。结果建立的可视化LAMP反应可准确检测出贝氏柯克斯体的重组质粒和新桥株,不与其他立克次体产生交叉反应,最低可检测到3.6×10~2拷贝/反应,较普通聚合酶链反应(PCR)法的灵敏度提高了一个数量级,等同于实时浊度法和实时荧光定量PCR方法的检测灵敏度。结论建立的可视化LAMP方法可敏感、特异地检测出贝氏柯克斯体感染,操作简单快捷,适用于基层卫生防疫和疫情现场的病原筛查。; 张琪徐睿瑶胡梦佳李俊韩一芳吕恒秦瑶操敏张锦海王长军; 关键词：贝氏柯克斯体环介导等温扩增可视化

吕恒

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