孙书华
- 作品数：16 被引量：42H指数：4
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- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 用PCR技术快速检测非洲猪瘟病毒被引量：7
- 1996年
- 选择编码非洲猪瘟病毒结构蛋白ＶＰ７３的部分基因片段为模板，用ＰＣＲ技术检测非洲猪瘟病毒ＤＮＡ，电泳分离可见１条长约１ｋｂ的ＤＮＡ扩增带。本方法具有安全、快速。
- 孙书华孙淑芳蒋正军吴时友
- 关键词：非洲猪瘟结构蛋白PCR猪瘟病毒
- IgG受体蛋白技术简介
- 1994年
- ＩｇＧ受体蛋白技术简介孙书华（农业部动物检疫所青岛２６６０３２）许多细菌可以分泌与ＩｇＧＦｃ片段反应的蛋白质，称之为ＩｇＧ受体蛋白。虽然对仗种反应的生物学意义还没有十分圆满的解释，但这并未妨碍它们在免疫化学领域的应用。基于反应性能上的差异，分泌ＩｇＧ...
- 孙书华
- 关键词：免疫球蛋白G受体免疫学抗体
- IgG受体蛋白技术的进展被引量：3
- 1994年
- ＩｇＧ受体蛋白技术的进展孙书华（青岛农业部动物检疫所２６６０３２）许多细菌可以分泌与ＩｇＧＦｃ片段反应的蛋白质，称之为ＩｇＧ受体蛋白￣［１］。虽然这种反应的生物学意义没有十分圆满的解释，但这并不妨碍它们在免疫化学领域的广泛应用。基于反应性能上的差异，...
- 孙书华
- 关键词：细菌免疫球蛋白受体蛋白
- 光生物素标记核酸探针检测水貂肠炎病毒的研究被引量：6
- 1991年
- 水貂肠炎病毒(MEV)的检测,目前主要采用病毒分离和血清学方法。为了能直接从样品中检测病毒,我们于1988年秋冬,首次采用了光生物素标记核酸探针打点杂交的方法,结果证明这种方法效果良好,能特异地检出MEV,且灵敏度高,可检测出10pg水平的病毒DNA。
- 沈正达胡永浩吴时友宫云浩孙书华李增光
- 关键词：水貂肠炎核酸探针
- 应用聚合酶链反应检测山羊关节炎-脑炎前病毒
- 1997年
- 以CAE病毒同源的MVV1514毒株LTR核酸序列片段作引物，用PCR对不同来源的4株CAE毒株GSM细胞培养物进行扩增，均为阳性。采人工感染CAE病毒的山羊外周血淋巴细胞进行检测，攻毒7天后即出现阳性反应。
- 王治才李建军马文戈龚成润孙书华
- 关键词：聚合酶链反应山羊关节炎脑炎病毒
- 用光生物素核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒被引量：3
- 1990年
- 用光生物素标记牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitisvirus,IBRV)9.6kb DNA片段做探针,可检测出10pg的IBRV DNA、1个TCID50的病毒和1～10个TCID50的实验感染牛精液。用核酸探针检测IBRV与分离病毒的符合率为84.4％。若将采集的样品在牛肾细胞上增毒一次,再抽提培养物的核酸,用核酸探针检测,则敏感性和符合率大为提高。
- 吴时友封启民蒋正军孙书华宫云浩李昌琳张瑞珍
- 关键词：鼻气管炎病毒
- 用光生物素标记核酸探针的研究被引量：5
- 1989年
- 我们用澳大利亚Bresatic公司生产的光生物素与国内两家(称甲所和乙所)研制的光生物素进行标记核酸探针作了比较试验。 探针标记 在3个硅化玻璃管中,分别加入5μ1λDNA(0.5μg/μl),于暗室中再分别加入5.5μl光生物素(国产与进口的浓度均为1mg/ml),放在冰浴上,200w汞灯照射25分钟。然后加入100μl 0.1mol TE(0.1mol Tris/HCl pH9.0,1mmol EDTA),用仲丁醇抽提两次,下层水相的体积约剩45μl,再加入22.5μl 7.5molNH_4AC,20.1μl冷无水乙醇,-20℃过夜,15000r/min离心,抽干,分别溶于27.5μl TE中。
- 宫云浩孙书华吴时友杨承渝J.Cowley
- 关键词：核酸探针核酸
- SPA/SPG融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达
- 1994年
- 葡萄球菌A蛋白（SPA）和链球菌G蛋白（SPG）的IgG结合区编码基因融合后，克隆到大肠杆菌表达载体PGEX，SPA／SPG融合蛋白（SPAG）得到高效表达。可溶性SPAG～GST产物可被谷胱甘肽亲和柱一次性纯化。用琼扩和ELISA试验测定了表达产物与不同种属动物血清反应的性能。SPAG—GST与所有SPA、SPG各自反应的动物IgG结合，对小鼠IgG的反应优于SPA或SPG。在所测试的23种动物血清中，融合蛋白与大部分哺乳动物Ig反应。
- 孙书华
- 关键词：融合蛋白大肠杆菌免疫
- 用聚合酶链反应检测山羊关节炎—脑炎及梅迪—维斯纳病毒被引量：3
- 1996年
- 以CAEV的POL及MVV的GAG基因为模板，用聚合酶链反应（PCR）检测国内外不同毒株的细胞感染物。以POL为模板的PCR可检出所有CAE及MV病毒。以GAG为靶基因的PCR便检出一株MV病毒，但所有CAEV均呈阳性反应。同属侵病毒科的马传染性贫血病毒（EIAV）对两级引物的PCR均呈阴性反应。
- 孙书华蒋正军王治才马文戈李建军
- 关键词：聚合酶链反应山羊脑炎病毒
- 几种回收核酸酶切片段的方法的比较
- 1989年
- 在基因工程中,需有纯度较高的核酸。如果杂质较多,T_4DNA连接酶就无法进行目的基因和载体的连接;限制性内切酶就无法进行切割。在核酸的纯化过程中,一般采用先制成粗制品,然后制备成精品。要制备出纯度较高的核酸,目前大多采用电泳、层析、离心等方法。DNA分子或者经过酶切的DNA片段,在凝胶电泳上分离后。
- 宫云浩孙书华吴时友
- 关键词：基因工程核酸
