宫慧之
- 作品数：6 被引量：54H指数：3
- 供职机构：中国医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学农业科学更多>>
- 抗伏马菌素B_1单克隆抗体的制备和特性被引量：3
- 2004年
- 目的 :建立敏感、特异和快速的针对伏马菌素B1(fumonisinB1,FB1)的酶联免疫吸附试验 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)检测方法 ,形成具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒。方法 :利用B细胞杂交瘤技术 ,建立能分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果 :用伏马菌素B1 牛血清白蛋白 (FB1 BSA)偶联物免疫 8～ 10周龄雌性BALB/c小鼠后 ,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2 / 0融合 ,经过 3～ 4次亚克隆建立了 1个稳定分泌抗伏马菌素B1毒素抗体的杂交瘤细胞株 ,命名为 5A9。将杂交瘤细胞打入BALB/c小鼠腹腔 ,获得含抗伏马菌素B1毒素单克隆抗体的腹水 ,并将腹水用饱和硫酸铵法进行纯化 ,得到单克隆抗体。该单克隆抗体的Ig亚类为IgG1,腹水中抗体的滴度分别为 2 .5 6× 10 6,参考工作浓度为 3.2× 10 5。纯化后抗体的IgG含量为 10 .4g/L ,亲和常数为 8.3× 10 -8mol/L。该抗体与其他结构类似物无交叉反应 ,具有较高的特异性。结论 :制备了具有高特异性和亲和力的抗伏马菌素B1单克隆抗体 ,初步形成了针对伏马菌素B1的ELISA检测试剂盒。
- 江涛王玉平韩春卉宫慧之计融
- 关键词：伏马菌素B1杂交瘤ELISA试剂盒
- 抗玉米赤霉烯酮单克隆杂交瘤细胞系的建立及单抗生产被引量：2
- 2005年
- 为快速检测食品中的玉米赤霉烯酮 (Zearalenone以下简称ZEN) ,建立了抗ZEN的单克隆杂交瘤细胞株。用ZEN BSA偶联物免疫 8～ 10周龄雌性BalB c小鼠后 ,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2 0融合 ,经过 4～ 5次亚克隆建立了稳定分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株 ,分别命名为Z2A4、Z8D6。将上述 2种杂交瘤细胞分别注入BalB c小鼠腹腔 ,获得含抗ZEN单克隆抗体的腹水。将腹水用饱和硫酸铵盐析法纯化 ,得到Z2A4、Z8D6单克隆抗体。经鉴定 ,其亚类为IgG1,抗体腹水效价Z2A4和Z8D6分别为 1∶1 6× 10 6和 1∶3 2× 10 6;分子量均为 15 0 0 4 0 (15 0kD) ;参考工作浓度分别为1∶4 0 0 0 0和 1∶10 0 0 0 0 ;纯化后抗体IgG含量分别为 34和 39mg ml ;抗体与其它霉菌毒素无交叉反应(交叉反应率 <1% ) ,具有较高特异性 ;抗体亲和力常数Z2A4和Z8D6分别为 5 5 2× 10 8和 4 6 8×10 9mol L。
- 王玉平计融江涛韩春卉宫慧之高秀芬
- 关键词：玉米赤霉烯酮杂交瘤细胞系
- 沈阳市社区医院患者情况的调查
- 1999年
- 社区医院提供的卫生服务,不仅要在质量上满足社会需求,在费用上也要适应当地的经济发展水平和社区居民的消费水平。因此,了解社区居民的社会人文背景,尤其是经济状况,掌握社区居民对基本社区卫生服务费用的承受能力至关重要。 本次调查通过对沈阳市沈河区5个社区医院门诊就诊患者的社会人文背景的了解,为社区医院的市场定位、市场细化提供参考性建议。1
- 刘海波宫慧之徐季影王述森宋文舸刘桂珍许杰梁家昶
- 细胞外信号调节激酶及蛋白激酶C_γ亚型在慢性染铅小鼠脑海马中的异常表达被引量：1
- 2007年
- 目的:观察和探讨铅对小鼠脑海马蛋白激酶Cγ(PKC-γ)及细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达的影响。方法:小鼠出生1d,染铅组母鼠开始通过饮水饲以不同浓度醋酸铅2.4,4.8,9.6mmol/L。幼鼠出生后,先通过哺乳接触铅,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。分别在14,21,28,35d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区PKC-γ蛋白表达状况;分别在7,14,21,28d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区ERK蛋白表达状况。结果:慢性铅暴露对小鼠脑海马PKC-γ蛋白表达总体上呈现下降趋势,各染铅组中,PKC-γ蛋白表达与相应期对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。低浓度铅2.4mmol/L使ERK表达升高,但此后随铅浓度升高ERK表达量逐渐降低,铅浓度升高至9.6mmol/L时随着铅浓度升高ERK表达量不再降低相反有所回升。结论:铅扰乱小鼠脑海马中PKC-γ及ERK蛋白正常表达。
- 高双孙黎光宫慧之姜泓
- 关键词：细胞外信号调节激酶海马
- 赭曲霉毒素A免疫学检测方法的研究被引量：30
- 2004年
- 目的 建立敏感、特异和快速针对赭曲霉毒素A的酶联免疫吸附试验检测方法 ,研制具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒。方法 利用B细胞杂交瘤技术 ,建立能够分泌抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并获得抗赭曲霉毒素A单克隆抗体。结果 建立赭曲霉毒素A的间接竞争抑制性酶联免疫吸附试验测定方法(ELISA)。该方法的最低检出浓度为 0 5ng/ml,线性范围 2～ 5 0 0ng/ml,线性方程Y =0 2 72X +1 0 7(r =0 9978)。方法的加标回收率为 79 0 %～ 119 7%。利用该方法对北京市售的大米、小麦样品进行检测。结果表明 ,小麦样品的污染率为 6 0 71% ,最大值为 8 2 6 μg/kg ;大米样品的污染率为 17 86 % ,最大值为 3 4 4 μg/kg。结论 该方法简单、快速、灵敏 。
- 江涛李凤琴王环宇田静高秀芬宫慧之王玉平计融
- 关键词：赭曲霉毒素A酶联免疫吸附试验单克隆抗体
- 抗伏马菌素B_1单克隆抗体的制备及试剂盒的研制被引量：20
- 2006年
- 目的为了能够快速检测粮谷类食品中伏马菌素B1的污染水平,研制具有我国自主知识产权的针对伏马菌素B1快速检测试剂盒.方法制备了能分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了敏感、特异、快速的酶联免疫吸附试验检测方法,最终形成具有中国自主知识产权的伏马菌素B1快速检测试剂盒.结果该试剂盒所用单克隆抗体的Ig亚类为IgG1,亲和常数为8.3×10^-8mol/L.该抗体与其他结构类似物无明显交叉反应,具有较高的特异性.试剂盒对伏马菌素B1最低检出限5ng/ml,标准曲线的线性范围（50～500ng/m1）,回归方程Y=-0.582X＋1.793（r=0.99,P＜0.05）;对玉米作50ng/ml,200ng/ml和500ng/ml 3个加标浓度的回收率在71.89%～112.95%之间;试剂盒在常温状态下有效期至少10个月;实验室内的变异系数和实验室间的变异系数均小于20%.
- 江涛宫慧之李凤琴计融
- 关键词：伏马菌素B1单克隆抗体ELISA试剂盒
