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张昀
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院药物研究所
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发文基金:
长江学者和创新团队发展计划
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李芳
中国医学科学院北京协和医学院药...
苑玉和
中国医学科学院北京协和医学院药...
胡金凤
中国医学科学院北京协和医学院药...
陈乃宏
中国医学科学院北京协和医学院药...
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李芳
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中华神经医学...
年份
1篇
2008
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大鼠JNK3超表达细胞模型的建立及特性研究
被引量:1
2008年
目的构建大鼠c-JunN末端激酶3(JNK3)在SH-SY5Y细胞的超表达模型,从而研究帕金森病(PD)和阿尔茨海默病(AD)等神经退行性疾病的发生机制与JNK3的相互关系以及建立新的PD和AD治疗药物筛选平台。方法RT-PCR获得大鼠JNK3(rJNK3)基因片段.连人真核表达载体pcDNA3.1/hisC构建真核表达质粒pcDNA3.1/hisC-rJNK3。脂染法把质粒转染到SHSY5Y细胞内,经过G418筛选出稳定表达rJNK3的单克隆细胞系。Western blot检测其蛋白表达量。通过观察细胞形态、测定细胞生长率、MPP诱导的细胞凋亡以及细胞免疫荧光定位等实验对细胞系SHSY5Y-rJNK3进行细胞株特性研究。结果重组质粒pcDNA3.1/hisC-rJNK3转染SHSY5Y细胞构建成稳定表达rJNK3蛋白的细胞系SHSY5Y-rJNK3。SHSY5Y-rJNK3和SHSY5Y细胞形态上差异显著,MTT结果显示生长率也不相同,SHSY5Y-rJNK3比SHSY5Y细胞对MPP的刺激更敏感。结论JNK3蛋白在细胞内的过量表达会导致细胞形态发生一定程度的改变,同时导致细胞对外界因素诱导的凋亡更加敏感,因此在细胞内过表达rJNK3的SHSY5Y-rJNK3更能客观准确的反映JNK3作用下的神经细胞凋亡现象和本质。
李芳
张昀
苑玉和
胡金凤
陈乃宏
关键词:
C-JUN
转染
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