李雪
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：广西研究生教育创新计划项目国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 绿色糖单孢菌高产麦芽糖α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质被引量：2
- 2013年
- 为开发新型淀粉酶,鉴定了来自绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)在Genbank中注释为糖苷酶(Glycosidase)的一个ORF,研究表明该ORF编码一种α-淀粉酶.重组酶酶学性质的研究表明以可溶性淀粉为底物反应的最适pH为6.6,在pH 5.6-8.6有80%以上的相对活力,最适温度为60℃,比活力为319.49 U/mg.它与可溶性淀粉、六糖、五糖、四糖、三糖反应,经HPLC检测产物均为麦芽三糖、麦芽糖和葡萄糖的混合物.重组酶与20%的可溶性淀粉反应,产物含有高达67.15%的麦芽糖,还原糖的转化率约为75%,加入普鲁兰酶后,麦芽糖含量增加到69.7%,还原糖转化率约为91%,不能与麦芽糖、α-环糊精、β-环糊精和普鲁兰糖反应.
- 汪小波李美蓉李雪黄坚丽黄英杜丽琴黄日波韦宇拓
- 关键词：Α-淀粉酶克隆表达麦芽糖酶学性质
- 玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因克隆、表达及功能鉴定被引量：7
- 2013年
- 目的:克隆玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因(Srt)使其在大肠杆菌XL10-Gold中高效表达,并对重组酶的酶学特性进行研究。方法:利用PCR技术从玫瑰链霉菌中克隆到一段长1 704bp的海藻糖合成酶基因(Srt),构建重组表达质粒pSE380-Srt-treS,将其转化大肠杆菌XL10-Gold中诱导表达,对重组纯酶进行SDS-PAGE分析及酶学特性测定。结果:SDS-PAGE显示在65kDa处有明显单一蛋白条带。该酶可催化麦芽糖和海藻糖之间的可逆反应,海藻糖得率达82%,且含有很低的副产物葡萄糖(5%左右)。最适反应温度和pH分别为30℃、7.5,Cu2+、Zn2+和Tris能明显抑制酶活力。该酶还可催化蔗糖生成一种无龋齿,适合糖尿病患者食用的糖类-海藻酮糖。结论:成功克隆表达了一个海藻糖合成酶基因,该酶转化率高,副产物较少,为工业酶法生产海藻糖奠定基础。
- 黄英林芳雷攀先梁甲元李雪杜丽琴黄日波韦宇拓
- 关键词：海藻糖合成酶克隆表达酶学性质
