熊符
- 作品数：74 被引量：245H指数：9
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 中国南方单纯性先天性心脏病患者NKX2.5基因突变的研究被引量：1
- 2017年
- 目的对中国南方地区单纯性先天性心脏病患者进行NKX2.5基因胚系突变的筛查,探讨其在单纯性先天性心脏病发生中的作用及基因型与表型的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)结合DNA测序技术,对我国南方地区224例单纯性先心病患者和121例健康个体进行NKX2.5基因(包括基因的编码区,5′和3′非翻译区以及外显子与内含子的连接区域)进行突变分析。结果 NKX2.5基因中未检测到致病突变,仅发现三种已报道的SNPs:rs2277963(c.63A>G,GAA>GAG,p.Glu21Glu),rs3729753(c.606G>C,CTG>CTC p.Leu202Leu)和rs703752(c.975-61 G>T),基因型频率及等位基因频率与NCBI数据库中已报道的中国人群携带率无显著性差异。结论中国南方地区单纯性先心病患者中NKX2.5基因致病突变极少发生,其致病突变的发现可能限于某些家系或者有特殊表型的先心病患者中。NKX2.5基因在我国南方地区单纯性先天性心脏病中的致病作用有待进一步研究。
- 李倩熊符李承彬
- 关键词：单纯性先天性心脏病NKX2.5基因DNA测序基因突变
- 实时荧光定量聚合酶链反应诊断面肩肱型肌营养不良被引量：4
- 2009年
- 目的建立面肩肱型肌营养不良（FSHD）的实时荧光定量PCR（FQ—PCR）检测方法。方法常规酚-氯仿法抽提基因组DNA，通过EcoRI酶切及琼脂糖凝胶电泳，回收38kb以下DNA作为模板，根据4号染色体上D424序列设计特异的引物和探针，对115例研究对象进行FQ—PCR检测，根据荧光曲线与阳性对照的比较判断结果。结果16例已知EcoRI片段大小的FSHD患者FQ—PCR检测结果为13例阳性，78名健康人检测结果除3例阳性外其余均为阴性，16例经临床诊断的新FSHD患者和5名高危者中分别有15例和3例检测结果为阳性。统计学分析FQ—PCR方法与传统印迹杂交方法（K=0．765，P=0．002）及临床诊断（k=0．844，P=0．000）之间的一致性，结果有统计学意义。结论我们创建了以FQ—PCR技术对FSHD进行基因诊断的新方法。该方法能克服印迹杂交方法费时费力、有放射性污染的缺点，且能较好解决由于4q-10q易位及p13E-11探针结合部位缺失造成传统杂交基因诊断方法欠准确的问题，具有较好的临床应用价值。
- 苏全喜李婉仪张成熊符申本昌洪铭范卢锡林
- 关键词：肌营养不良面肩肱型聚合酶链反应易位
- 绿色荧光蛋白和成肌调节因子在骨髓基质干细胞中的共表达被引量：3
- 2006年
- 目的:研究重组腺病毒(Ad)对骨髓基质干细胞(MSCs)的转染,以及绿色荧光蛋白(GFP)和成肌调节因子MyoD和Myogenin在MSCs中的表达.方法:用差速贴壁法体外培养大鼠MSCs,并用流式细胞仪(FCM)检测其表面标志;对构建有绿色荧光蛋白的重组腺病毒(AdGFP)进行扩增和鉴定,并转染MSCs;用RTPCR检测MyoD和Myogenin在转染后MSCs中的表达;将MSCs与C2C12成肌细胞共培养,诱导前者的分化,并用免疫荧光检测MyoD的表达.结果:FCM检测证实,在MSCs的表面标志中CD11b和CD45阴性,而CD29和CD44阳性;随着AdGFP感染复数(MOI)的增加,转染效率也相应提高,但在MOI大于100后,MSCs开始出现病变;RTPCR结果提示MyoD和Myogenin在转染后的MSCs中有表达;免疫荧光检测证实诱导后的MSCs可以表达MyoD蛋白.结论:MSCs可以被AdGFP有效转染而表达GFP;同时内源性成肌调节因子的激活,可以促进MSCs的成肌分化.
- 李美山张成陈松林于美娟张雅妮王淑辉熊符
- 关键词：基质干细胞C2C12MYODMYOGENIN绿色荧光蛋白成肌调节因子
- 一种检测α2珠蛋白基因点突变的巢式非对称PCR试剂盒
- 本发明公开了一种检测α2珠蛋白基因点突变的试剂盒，该试剂盒由巢式非对称PCR扩增引物、荧光探针、淬灭探针、LA DNA聚合酶等组成。通过巢式非对称PCR特异性扩增人类α2珠蛋白基因WS、QS、CS、CD30、CD31五个...
- 周万军熊符徐湘民
- 文献传递
- 一个掌跖角化牙周破坏综合征家系CTSC基因的突变鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的对一个掌跖角化牙周破坏综合征家系进行临床表型分析和CTSC基因突变检测，揭示其分子机制，为遗传咨询提供依据。方法通过临床表型、口腔检查等进行临床诊断。用PCR扩增CTSC基因的外显子，之后采用Sanger测序法进行突变筛查，随后用PolyPhen-2和SIFT软件进行突变有害性预测，同时用Swiss—Port软件预测CTSC蛋白的三级结构，并采用荧光定量PCR对患者及其父母的CTSC基因的mRNA进行定量分析，用Western印迹杂交检测野生型和突变型CTsc蛋白的表达差异。结果患者CTSC基因第7外显子存在c．901G〉A（p．G301S）纯合错义突变，其父母均为突变携带者。该突变位于酶的高度保守区，有害性预测结果显示为有害，导致蛋白三级结构发生改变，可能影响组织蛋白酶C的活性。CTSC基因突变型mRNA和蛋白的表达量与野生型的差异无统计学意义。结论首次在中国人群中发现CTSC基因c．901G〉A突变可导致掌跖角化牙周破坏综合征，扩展了CTSC基因的突变谱。
- 刘翠娴田智慧阳奇马倩倩徐湘民熊符
- 关键词：突变分析
- 染色体微阵列分析在产前诊断中的应用被引量：1
- 2016年
- 染色体微缺失、微重复等基因组结构的畸变是导致胎儿发育迟缓、畸形、流产、死胎和儿童先天性缺陷的内在因素,也是导致围产儿出生缺陷的主要原因。应用染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)进行产前、产后遗传病诊断是提高染色体疾病检出率、查明病因并指导家庭下一胎生育的一个有效措施。CMA以外周血、羊水、绒毛或流产物等组织中提取的DNA作为样本,检查全基因组染色体的变化,可以有效检测到常规染色体核型分析难以查出的染色体微缺失、微重复、单亲二倍体和杂合性缺失等基因组失衡现象,是目前国际上最先进的细胞分子遗传学诊断手段。2010年美国细胞遗传学会推荐将染色体芯片代替核型分析作为不明原因智力低下、多发畸形和孤独症疾病的首选诊断手段。
- 刘翠娴熊符
- 关键词：微阵列比较基因组杂交产前诊断
- 华南特色遗传病生物样本库的建设和应用示范
- 赵存友徐湘民熊符商璇张健李淑芬何菲周万军李亮叶宇华魏小凤
- 华南特色遗传病生物样本库所收纳样本以地中海贫血和精神分裂症的遗传资源为代表，还收纳了牙釉质发育不全、脊髓性肌萎缩、甲状腺素结合球蛋白基因突变家系以及器管移植者等疾病患者及相应正常对照人群的遗传资源，其中包括双生子、家系、...
- 关键词：
- HSV-1 VP22及microdystrophin基因融合表达重组质粒的构建及其生物学特性的初步研究
- 2009年
- 目的构建人单纯疱疹病毒1型（HSV-1）病毒蛋白22（VP22）及microdystrophin基因融合表达重组质粒，体外研究其表达及HSV-1 VP22介导的蛋白转导特性，为进一步利用此重组质粒治疗Duchenne型肌营养不良症（DMD）奠定基础。方法从质粒pSINrep5-VP22中PCR扩增HSV-1 VP22全长基因，然后克隆至真核表达载体pAVX1中，构建重组质粒pAVP22；再用NotⅠ酶切含microdystrophin基因的pBSK-MICRO质粒，获得microdystrophin基因，片段回收后定向插入质粒pAVP22中，获得重组质粒pAVP22-MICDYS；然后将重组质粒pAVP2-MICDYS转染至小鼠成纤维细胞3T3细胞，通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光检测microdystrophin基因的转录及蛋白表达；最后收集转染后3T3细胞上清。感染人间充质干细胞（MSCs），检测重组蛋白在人MSCs中的表达情况来分析HSV-1 VP22是否可以介导VP22-microdystrophin融合蛋白的转导。结果成功构建了含有HSV-1 VP22和microdystrophin基因的重组质粒，并在体外得到了很好表达；同时也证实HSV-1 VP22提高了microdystrophin基因在3T3细胞中的表达效率。并可介导VP22-microdystrophin蛋白从3T3细胞到人MSCs间的转导。结论该重组质粒的构建及体外成功表达和蛋白转导特性的确定为下一步用该重组质粒进行DMD疾病治疗研究奠定了基础。
- 熊符张成陈松林郑卉肖少波潘永飞于美娟冯善伟卢锡林
- 关键词：蛋白转导
- 1998-2010年珠海市地中海贫血大规模人群的遗传筛查和产前诊断结果分析被引量：30
- 2012年
- 目的 分析1998-2010年间在广东省珠海市开展的地中海贫血（地贫）大规模人群预防控制计划的实施效果.方法 以珠海市妇幼保健院为主体构建地贫遗传筛查网络,以婚前医学检查对象（1998-2003年）和常规产前检查人群及其配偶（2004-2010年）作为筛查对象,采用地贫杂合子筛查策略,进行α和β地贫特征的筛查.对所有可疑地贫基因携带者进行随访和遗传咨询,并采用基于PCR的基因诊断技术对高风险夫妇进行确诊.在知情同意选择的情况下,对严重类型地贫高风险胎儿实施产前基因诊断并终止妊娠.结果 从1998年1月1日至2010年12月31日期间,共筛查了85 522例拟婚育龄青年和41 503例孕妇及其配偶14 141例,婚前医学检查和产前检查地贫筛查覆盖率分别为92.698％（1998-2003年）和27.667％（2004-2010年）.在10 726例地贫筛查阳性的病例中,α和β地贫分别为7393例（5.237％,7 393/141 166）和3333例（2.361％,3 333/141 166）.总计发现257对有生育严重类型地贫儿可能的高风险夫妇（α地贫190对和β地贫67对）,对其中的251对（97.7％,251/257）进行了产前诊断.本预防控制计划实施后共减少了72例严重类型地贫患儿的出生,其中α地贫患儿49例,使珠海市严重类型α地贫患儿出生率年平均下降了32.9％（49/149）.结论 本研究通过13年地贫的大规模人群遗传筛查和产前诊断,有效降低了珠海市严重类型地贫围产儿的出生率,所总结出来的地贫预防控制技术方案,可为我国其他地贫高发地区开展类似预防控制计划提供借鉴.
- 周玉球商璇尹保民熊符肖奇志周万军张永良徐湘民
- 关键词：地中海贫血遗传筛查产前诊断
- 广西壮族自治区人群血红蛋白病的分子流行病学调查
- 目的 血红蛋白病尤其是地中海贫血(thalassemia,简称地贫)是一组严重影响人类健康的常染色体隐性遗传溶血性贫血病,包括我国南方在内的全球热带和亚热带均为该病的高发区,广西壮族自治区是我国南方该病发生率最高的地区。...
- 熊符孙曼娜娄季武张新华周玉球蔡稔魏小凤商璇徐湘民
- 关键词：等位基因携带率分子流行病学调查
