王运伟
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ezrin在胃癌细胞的表达及与胃癌细胞侵袭能力的关系被引量：3
- 2007年
- 目的检测胃癌细胞株中Ezrin的表达情况与胃癌细胞株的侵袭能力,探讨Ezrin的表达与胃癌细胞侵袭能力的关系。方法分别采用Western blot和Real-Time PCR的方法,检测Ezrin在胃癌细胞株的表达情况,运用以胶原为基础的细胞侵袭试验检测胃癌细胞株的侵袭能力。结果Ezrin在胃癌细胞株中的表表达存在差异,其中MKN-45表达水平最高,N-87表达水平最低;侵袭试验显示MKN-45的侵袭能力最强,N-87侵袭能力最弱。结论Ezrin在胃癌细胞中的表达存在差异,Ezrin的表达水平与胃癌细胞的侵袭能力成正相关。
- 史荣亮李建芳王运伟瞿颖陈雪华朱正纲刘炳亚
- 关键词：EZRIN胃癌
- 胃癌抗原相关基因MPS-1的融合表达及兔抗GST-MPS-1抗体的制备
- 2007年
- 目的在大肠杆菌中表达GST-MPS-1融合蛋白并制备兔抗GST-MPS-1抗体。方法将MPS-1全长cDNA克隆笔pGEX-5X载体内,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导GST-MPS-1融合蛋白的表达。以分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备抗GST-MPS-1抗体。用Western blotting和细胞免疫荧光染色法,检测兔抗GST-MPS-1抗体的特异性。结果经测序和酶切鉴定确认,MPS-1基因以正确的方式插入到载体中。此重组表达载体经IPTG诱导后,可高效表达相对分子质量(Mr)为36000的GST-MPS-1融合蛋白。以融合蛋白免疫兔获得的抗血清,经ELISA检测效价达到1×105。Western blotting和细胞免疫荧光染色证实,该多克隆抗体能与MPS-1蛋白特异性结合。结论兔抗MPS-1特异性抗体的获得,为进一步检测MPS-1蛋白的表达和功能分析奠定了基础。
- 王运伟朱正纲顾琴龙
- 关键词：胃癌肿瘤相关抗原融合蛋白多克隆抗体
- SEREX方法鉴定胃癌肿瘤相关抗原基因被引量：8
- 2005年
- 目的采用重组CDNA表达文库血清学分析法(SEREX法)寻找胃癌相关肿瘤抗原的编码基因。方法抽提胃癌细胞株SGC7901和1例胃癌组织标本PolyA+RNA,分别构建2个胃癌cDNA表达文库,用含有抗体的胃癌患者血清对2个文库进行筛选,并对筛选所得到的阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果经测定2个原始文库滴度分别为1.6×106pfu和2.5×106pfu,重组率为95%和98%。2个文库经3轮筛选共获得14个胃癌肿瘤相关抗原编码基因,其中一个为未知基因。13个已知基因编码产物包括代谢酶、RNA转录和翻译调控蛋白、蛋白代谢相关分子、自身免疫疾病相关抗原及未知功能蛋白分子。结论 胃癌相关肿瘤抗原编码基因的筛选和鉴定,为胃癌的临床诊断和特异性免疫治疗提供了靶点,有助于对胃癌发生机制的深入理解。
- 王运伟朱正纲顾琴龙李建芳陈雪华刘炳亚林言箴
- 关键词：胃癌相关抗原SEREX癌肿瘤CDNA表达文库重组率
- FRZB基因在胃癌组织中的表达和胃癌细胞内定位及其意义
- 2008年
- 目的研究FRZB基因在胃癌中的表达和在细胞内的定位及其意义。方法通过免疫组织化学（免疫组化）链霉菌抗生物素蛋白．过氧化酶连接法（SP法）对90例胃癌组织及正常胃黏膜组织FRZB基因的表达进行分析。通过定量PCR和Western印迹检测胃癌细胞株和胃上皮细胞株GES-1的FRZB表达，并用免疫荧光技术对FRZB的细胞内定位进行研究。结果FRZB在胃癌中的表达高于正常胃黏膜，在胃癌组织中，FRZB表达阳性率为92．2％，而正常胃黏膜中除了1例（10．0％）为弱阳性表达外，其余均为阴性。FRZB在胃癌组织中的表达与分化程度（P=0．220）和Lauren分型（P〈0．01）相关，与其他的临床病理参数不相关。免疫荧光和Western印迹结果显示，FRZB在细胞核和细胞质中均有表达。定量PER结果显示，在胃癌细胞株中FRZB表达高于GES-1。结论FRZB与胃癌的分化和肠型及弥漫型的发生相关，FRZB在细胞核的定位可能与其在胃癌中的作用相关。
- 瞿颖蔡劬李建芳王运伟刘炳亚朱正纲
- 关键词：基因FRZB胃肿瘤基因表达
- 肿瘤抗原NY-ESO-1研究进展
- 2005年
- 肿瘤抗原NY-ESO-1是肿瘤-睾丸(cancer-testis,CT)抗原,其编码基因是一基因家族,目前发现的主要包括NY-ESO-1、LAGE-1和ESO3三个成员。NY-ESO-1是迄今发现的最具免疫原性的肿瘤抗原之一,可以在NY-ESO-1表达阳性的肿瘤患者体内引起自发性体液免疫反应和T细胞免疫反应,因此在抗原特异性肿瘤免疫治疗中具有广泛的应用前景。
- 王运伟顾琴龙朱正纲
- 关键词：肿瘤抗原NY-ESO-1肿瘤免疫治疗
- Hec1基因表达沉默对胃癌细胞凋亡及分裂周期的影响被引量：3
- 2006年
- 目的研究癌症高表达(Hec1)基因表达沉默对胃癌细胞AGS分裂周期及细胞凋亡的影响。方法应用siRNA使Hec1基因表达下调,通过实时定量PCR检测Hec1mRNA表达抑制率;流式细胞仪检测细胞周期变化,经AnnexinV/PI双染色检测细胞凋亡率。结果胃癌细胞AGS转染Hec1siRNA48h后,Hec1基因表达抑制率达到90%;流式细胞仪检测发现,细胞G2/M期比例显著高于各对照组(P<0.05),细胞分裂被阻滞,出现明显凋亡;形态学检测发现,Hec1siRNA转染48h后处于分裂中期细胞高于各对照组,转染72h后细胞呈明显凋亡形态学改变。AnnexinV/PI双染色法显示Hec1基因沉默后细胞凋亡率高于对照(P<0.05)。结论抑制Hec1基因表达,可以明显阻滞细胞分裂并停留在有丝分裂中期,同时诱导细胞凋亡。
- 瞿颖蔡劬陈雪华李建芳王运伟朱正纲刘炳亚
- 关键词：凋亡细胞周期SIRNA胃癌
- Metallopanstimulin-1基因的识别及其在胃癌中的表达与功能研究
- 研究背景：肿瘤的发生是一个多阶段，多因素参与的复杂过程。其中，涉及一系列肿瘤相关基因的表达和结构异常，肿瘤抗原就是这些异常基因表达的产物。重组cDNA表达文库血清学筛选法(Serological analysis of ...
- 王运伟
- 关键词：肿瘤抗原胃癌
- 文献传递
- 抑制癌症高表达蛋白（Hec1）基因表达对胃癌细胞周期的影响
- 目的:细胞周期检查点（mitotic checkpoint）是保证细胞周期中DNA复制和染色体分配质量的检查机制,是一类负反馈调节机制。癌症高表达蛋白（high expression in cancer,Hec1）作为一...
- 瞿颖蔡劬陈雪华李建芳王运伟朱正纲刘炳亚
- 关键词：凋亡细胞周期SIRNA胃癌
- 文献传递
- 肿瘤-睾丸抗原在胃癌组织中的表达被引量：3
- 2004年
- 王运伟朱正纲顾琴龙李建芳刘炳亚林严箴
- 关键词：肿瘤-睾丸抗原胃癌肿瘤组织基因表达特异性免疫
- 胃癌抗原相关基因MPS-1的融合表达及兔抗GST-MPS-1抗体的制备被引量：1
- 2006年
- 目的在大肠杆菌中表达GST-MPS-1融合蛋白并制备兔抗GST-MPS-1抗体。方法将MPS-1全长cDNA克隆至pGEX-5X载体内,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导GST-MPS-1融合蛋白的表达。以分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备抗GST-MPS-1抗体。用Western blot和细胞免疫荧光染色法,检测兔抗GST-MPS-1抗体的特异性。结果经测序和酶切鉴定确认,MPS-1基因以正确的方式插入到载体中。此重组表达载体经IPTG诱导后,可高效表达相对分子质量(Mr)为36000的GST-MPS-1融合蛋白。以融合蛋白免疫兔获得的抗血清,经ELISA检测效价达到1×105。Western blot和细胞免疫荧光染色证实,该多克隆抗体能与MPS-1蛋白特异性结合。结论兔抗MPS-1特异性抗体的获得,为进一步检测MPS-1蛋白的表达和功能分析奠定了基础。
- 王运伟朱正纲顾琴龙李建芳瞿颖刘炳亚林言箴
- 关键词：胃癌肿瘤相关抗原融合蛋白多克隆抗体
