程洋
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 供职机构:四川农业大学更多>>
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- 鸡马立克氏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:5
- 2013年
- 【目的】建立一种能够快速、灵敏地检测鸡马立克氏病病毒(MDV)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法。【方法】针对马立克氏病毒特异的Meq基因序列设计引物,利用SYBR GreenⅠ染料建立检测马立克氏病毒的实时荧光定量PCR方法,进行敏感性、特异性、重复性试验,并应用该方法检测了罗曼蛋鸡、AA肉鸡、二郎山山地鸡SD02和SD03品系4种鸡只感染组和对照组样本的脾、法氏囊、胸腺等组织中的病毒拷贝数。【结果】该方法建立的定量标准曲线荧光阈值循环数(Threshold cycle,Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r=0.996),扩增效率(E)为96%,熔解曲线分析显示其PCR扩增具有良好的特异性,敏感性和重复性试验证明该方法具有较高的灵敏度和稳定性,最低检测浓度为102拷贝/μL。同时运用该方法对试验样本进行检测,结果显示在4个感染组鸡只的肝,脾,肾,胸腺,法氏囊组织中均检测出Meq的拷贝,并计算出了待测样品的病毒拷贝数,相反在未感染组却没有检测出任何Meq的拷贝。试验结果还发现二郎山山地鸡两品系各组织中MDV的拷贝数显著低于AA肉鸡和罗曼蛋鸡各组织。【结论】建立的检测方法能够快速检测马立克氏病毒,结果准确,成本低廉,可以将其作为生产上监控马立克氏病的一个重要手段。
- 程洋冯泽清杨辉林刘益平朱庆
- 关键词:马立克氏病毒MEQ基因SYBR
- 利用MEQ基因检测鸡马立克氏病毒的试剂盒及其检测方法
- 程洋冯泽清刘益平朱庆金洁
- 该发明涉及鸡马立克氏病毒的检测方法,具体说是利用MEQ基因检测鸡马立克氏病毒的试剂盒,同时还包括该试剂盒的检测方法。试剂盒包含病毒基因组dNa提取试剂、MaStEr?MIx、SYbR?GrEEN|预混液试剂、阴、阳性对照...
- 关键词:
- 关键词:马立克氏病毒试剂盒
- 利用MEQ基因检测鸡马立克氏病毒的试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及鸡马立克氏病毒的检测方法,具体说是利用MEQ基因检测鸡马立克氏病毒的试剂盒,同时还包括该试剂盒的检测方法。试剂盒包含病毒基因组DNA提取试剂、Master Mix、SYBR Green|预混液试剂、阴、阳性对照...
- 程洋冯泽清刘益平朱庆金洁
- 文献传递
- 感染不同毒力新城疫病毒后鸡免疫器官Toll样受体及炎症相关基因的表达差异
- 新城疫是一种严重危害养禽业的急性传染病。尽管疫苗的广泛使用令新城疫得到了一定的控制,但近年来伴随毒力的不断增强,导致疫苗免疫的失败,其仍然严重制约着养禽业的健康发展。因此,从分子水平解析鸡对病毒感染的应答机制,寻找机体抗...
- 程洋
- 关键词:鸡新城疫病毒免疫器官TOLL样受体
- 文献传递
- 四川省蛋鸡养殖规模化发展现状调研
- 2014年
- 四川省蛋鸡饲养集中在乐山、峨眉和绵阳、德阳等区域。从上世纪80年代开始,乐山市蛋鸡养殖业就初见规模,逐步形成了嘉源种鸡场、嘉庆养鸡场等大型种鸡和商品鸡养殖场。尤其嘉源种鸡场在养殖高峰时期父母代存栏量有20万套,对乐山乃至西南地区的商品蛋鸡养殖有较大的影响。犍为县和井研县是传统的畜牧大县,但商品蛋鸡总体比市中区少,尤其最近两年蛋鸡养殖不景气,井研的养殖户大量减少。因此,本次调研选择乐山市市中区、犍为县、井研县作为大、中、小规模的样本调研区域。
- 朱庆赵小玲刘凌斌王强黛丽程洋曾胜强陈斌龙彭继云李天杰
- 关键词:蛋鸡养殖业规模化发展种鸡场蛋鸡饲养