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树突状细胞吞噬PLA-AFP_(218-226)微球后诱导细胞毒性T淋巴细胞反应被引量：1: 2006年; 目的研究树突状细胞(DC)吞噬包被有甲胎蛋白HLA-A2限制性表位肽(AFP218-226,LLNQHACAV)的聚乳酸微球(PLA-AFP218-226)后诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株HepG2和负载有AFP218-226的T2细胞株的毒性作用。方法用GM-CSF和IL-4诱导HLA-A2+的健康志愿者外周血单核细胞,LPS诱导成熟,使其分化为高纯度DC,在诱导过程中加入PLA-AFP218-226微球,用吞噬了PLA-AFP218-226微球的DC诱导自身T淋巴细胞,使其成为肝细胞癌(HCC)特异性CTL。用流氏细胞仪检测DC膜分子标志,T2细胞与AFP218-226结合实验检测HLA-A2分子与AFP218-226之间的亲合力,MTT法检测特异性CTL杀伤HepG2和T2细胞株的能力。结果AFP218-226与HLA-A2分子具有较高的亲合力,吞噬微球后的成熟DC高表达CD83、CD86、CD40等膜分子,其诱导的特异性CTL对HepG2和负载有AFP218-226的T2细胞株具有强的细胞毒作用。结论PLA-AFP218-226被DC细胞吞噬后,能够诱导HCC特异性CTL的产生,可能成为一种新型的抗肿瘤表位肽疫苗,在肝癌的防治中得到应用。; 张兵陈玮董薇蔡美英; 关键词：PLA CTL

从树突状细胞Toll信号传导通路探讨肝癌发生的分子机制: /[目的/] 联合应用GM-CSF+IL-4从健康人外周血单核细胞中诱导DC，经LPS进一步诱导其成熟。通过不同途径鉴定两种Dc的成熟程度，为LPS促进DC的进一步成熟提供了实验依据。半定量RT-PCR检测TLRs mR...; 董薇; 关键词：树突状细胞 TOLL TLRS 半定量RT-PCR 激光共聚焦扫描显微镜; 文献传递

急性白血病端粒酶逆转录酶基因表达的初步分析被引量：2: 2003年; 目的　初步探讨白血病端粒酶逆转录酶 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)基因表达与白血病临床特征的关系。方法应用逆转录 - PCR扩增法 ,检测白血病患者和正常人外周血样中h TERT m RNA的表达 ,并进行半定量分析。结果　 4 2例初治白血病血样中 ,h TERT m RNA表达阳性率73.81% ,表达水平 0 .6 4± 0 .2 1。 2 1例完全缓解组中 ,h TERT m RNA表达阳性率 19.0 5 % ,表达水平 0 .31± 0 .16。 4例复发病例均呈 h TERT m RNA阳性表达 ,表达水平 0 .84± 0 .0 9。 5名正常人血样中 ,有 1人呈现 h TERT m RNA低水平表达 ,表达水平 0 .10。结论　 h TERT表达异常与白血病的发生发展密切相关 ,可作为白血病细胞的标志物用于白血病临床分析、病情监测。; 张艳刘菽秋屈艺李熙鸿汪凤兰董薇刘柏林; 关键词：急性白血病端粒酶逆转录酶基因表达

脑脊液置换疗法治疗蛛网膜下腔出血疗效的系统评价: 目的：评价脑脊液置换疗法治疗蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）的疗效及安全性。方法：运用Cochrane系统评价的方法，检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库（20...; 董薇; 关键词：脑脊液置换蛛网膜下腔出血 META分析脑血管痉挛; 文献传递

树突状细胞负载人工合成甲胎蛋白表位肽后诱导的细胞毒作用被引量：2: 2007年; 目的观察HLA-A2树突状细胞(dendritic cells,DCs)负载人甲胎蛋白(humanα-fetoprotein,hAFP)HLA-A2限制性九肽(FMNKFIYEI,AFP158-166)后,激活特异的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs),杀伤肝癌细胞株的能力。方法用贴壁法分离HLA-A2成人外周血单核细胞,分次加入IL-4与GM-CSF共同诱导培养6d,给予单核细胞调控培养液(monocyte conditioned medium,MCM)诱导成熟2d,然后负载AFP158-166,激活特异性CTLs,用MTT法检测CTL杀伤肝细胞癌(hepa-tocellular carcinoma,HCC)细胞株HepG2和T2细胞株的能力。结果采用贴壁法、多次加入细胞因子和MCM为成熟诱导剂的培养方法可以获得足量的成熟DCs,并且在去除细胞因子后,仍能保持成熟的DCs形态;负载AFP158-166的DCs激活的CTLs对HepG2和负载AFP158-166的T2具有较强的杀伤作用。结论负载HLA-A2限制性表位肽AFP158-166的DCs对表达AFP的HLA-A2HCC有潜在的治疗作用,具有一定的临床运用前景。; 张兵董薇朱月明蔡美英; 关键词：树突状细胞甲胎蛋白肝细胞癌

脂多糖刺激树突状细胞前后TLR2、3、4基因表达的检测被引量：3: 2005年; 目的检测脂多糖作用于树突状细胞前后TLR2、3、4基因的表达情况。方法从外周血分离单核细胞,加入rhGMCSF及rhIL4,培养的第6天,实验组加入脂多糖刺激24h,对照组不加。分别提取细胞总RNA,行半定量RTPCR,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果单核细胞经GMCSF及IL-4诱导7d后的DC表达较高水平TLR2、3、4。脂多糖刺激24h后,TLR2、3、4表达下降,TLR4几乎测不到。结论树突状细胞在受脂多糖刺激前后TLRs的表达有显著变化,推测和它的功能成熟有关。; 董薇张兵蔡美英魏大鹏; 关键词：基因表达脂多糖树突状细胞 TLRS 半定量RT-PCR

抗AIB1-N单克隆抗体的制备及鉴定被引量：6: 2006年; 目的获得有生物活性的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端(amplifiedinbrestcancer1-Nterminal,AIB1-N)单克隆抗体。方法以谷胱甘肽转硫酶耦联的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端蛋白(GST-AIB1-N)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗AIB1-N单克隆抗体,用间接ELISA和Western-blot鉴定其亚类和抗原结合特异性。结果成功筛选出一株稳定分泌抗AIB1-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类为IgG1,经Western-blot鉴定该McAb特异性高,亲和力强。结论成功制备了抗AIB1-N单克隆抗体,为深入研究AIB1的表达及临床应用提供了有力的工具。; 庞秋霞彭晓东郄明容朱月明彭旭红董薇张林屈艺; 关键词：单克隆抗体

脂多糖通过TLRs信号途径诱导树突状细胞成熟机理初探: 2005年; 目的探讨脂多糖(LPS)通过TLRs信号途径进一步促进人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)成熟的机理。方法从外周血分离单核细胞,加入rhGM-CSF及rhIL-4,在培养的第6d,实验组加入LPS刺激24h,对照组不加。分别提取细胞总RNA,行半定量RT-PCR,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。激光扫描共聚焦显微镜检测DC内NF-κB表达情况。结果单核细胞经GM-CSF及IL-4诱导7d后的DC表达较高水平TLR2、3、4。LPS刺激24h后,TLR2、3、4表达下降,TLR4几乎测不到。激光扫描共聚焦显微镜检测到,未刺激组DC胞浆染色阳性,胞核为阴性。LPS刺激组的细胞核染色为强阳性,胞浆染色为阳性。结论DC在受LPS刺激前后TLRs的表达有显著变化,NF-κB也从胞浆移位至核内。这标志着经LPS刺激后DC在功能上进一步成熟。为下一步研究DC的功能奠定了基础。; 董薇张兵朱月明蔡美英魏大鹏; 关键词：半定量RT-PCR 核转录因子

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董薇