俞建萍
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 以ASP-1为佐剂研制H5N1病毒新型疫苗的试验研究
- 目的：本研究旨在以ASP-1重组蛋白作为一种新型生物佐剂,利用其佐剂活性进行H5N1病毒新型疫苗研究,发展具有良好免疫原性和免疫保护效果的H5N1病毒新型疫苗。 方法：本研究首先在生物信息学分析的基础上,设计ASP...
- 俞建萍
- 关键词：佐剂H5N1病毒新型疫苗
- 文献传递
- 重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的佐剂活性被引量：1
- 2011年
- 目的探讨重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的免疫佐剂作用。方法在大肠杆菌原核表达系统中获得融合了pET32(+)表达载体蛋白trxA和M2e三联体的重组蛋白TrxA-M2e3作为高致病性禽流感M2e疫苗分子;在大肠杆菌中截短表达盘尾丝虫活化相关蛋白ASP,获得截短片段ASP-1作为佐剂蛋白。将纯化后的重组蛋白TrxA-M2e3和ASP-1混合或者单独使用,免疫BALB/c小鼠后检测血清中M2e抗体水平。使用不同进化分支H5N1病毒对免疫小鼠进行致死性攻击,检测交叉免疫保护效果。结果获得了纯化的重组蛋白TrxA-M2e3和ASP-1;与TrxA-M2e3单独免疫组相比,应用佐剂蛋白ASP-1可显著提高免疫小鼠血清中M2e特异性IgG抗体滴度(P<0.05)。在不同进化分支H5N1病毒的致死性攻击后,应用ASP-1与TrxA-M2e3联合免疫小鼠的肺组织病毒复制得到有效抑制,免疫小鼠全部存活。而其它免疫组小鼠全部死亡。结论 M2e是发展新型禽流感疫苗应对病毒变异的理想靶抗原分子,而重组蛋白ASP-1可以为一种新型佐剂在M2e疫苗分子诱导交叉免疫保护中发挥关键作用。
- 俞建萍赵光宇肖文珺郭彦孙世惠寇志华于虹温晶何后军周育森
- 关键词：高致病性禽流感疫苗佐剂
- 以ASP-1重组蛋白为佐剂发展H5N1病毒HA重组疫苗的实验研究
- <正>目的:本研究旨在以来源于盘尾丝虫的活化相关蛋白(ASP-1)作为一种新型生物佐剂,利用其佐剂活性进行H5N1病毒HA重组疫苗研究,发展出具有良好免疫原性和免疫保护效果的H5N1病毒新型疫苗。方法:本研究首先通过生物...
- 赵光宇俞建萍肖文珺郭彦于虹寇志华孙世惠周育森
- 文献传递
- 甲型流感病毒H1N1 HA蛋白在果蝇S2细胞中的表达及免疫原性研究被引量：3
- 2012年
- 目的在果蝇S2细胞表达甲型流感H1N1HA并分析其免疫原性。方法根据GenBank发表的甲型流感病毒(H1N1)HA基因序列,经过密码子优化,全基因合成编码HA的基因,并于其N端引入特定的空间折叠序列,定向连接至表达载体pMT/Bip/V5-His A,构建重组表达载体pMT-HA。酶切鉴定正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoHygro共转染果蝇S2细胞,潮霉素加压筛选稳定细胞系,在无血清培养基中以硫酸铜溶液诱导表达,SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定,经镍柱纯化后免疫小鼠,ELISA检测其诱导的特异性抗体水平。结果获得了稳定表达HA的S2细胞株,目的蛋白以分泌形式表达于上清,并形成三聚体,可以被H1N1HA抗体识别;免疫小鼠后可诱导机体产生抗HA特异性抗体。结论获得了纯化的三聚体形式表达的HA蛋白,并具有较好的免疫原性,具有很好的疫苗应用前景。
- 于虹温晶杨裔俞建萍佟双郭彦赵光宇寇志华周育森
- 关键词：甲型H1N1流感病毒细胞HA
- 人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的制备被引量：4
- 2011年
- 目的探讨利用噬菌体PhiX174 E基因制备人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的可行性以及适当制备条件。方法将PhiX174 E基因克隆至温控表达系统,筛选获得裂解效率较高的质粒pMBE,通过优化转化方法将pMBE导入Ty21a,利用温控表达系统进行Ty21a菌蜕制备。菌落计数计算菌蜕裂解效率,并通过扫描电镜和透射电镜观察其形态结构。结果裂解质粒pMBE介导大肠杆菌DH5α的裂解效率达99.99%;通过电击转化方法获得重组Ty21a(pMBE),利用温控表达系统成功制备Ty21a菌蜕,裂解效率达96.77%。电镜观察菌蜕结构完整并呈空泡状结构,并能看到溶菌孔道。结论 PhiX174 E基因表达可实现人伤寒沙门菌Ty21a裂解形成Ty21a菌蜕,为其作为疫苗和药物递送载体的研究奠定了基础。
- 温晶寇志华于虹吕兴茹王欣郭彦俞建萍赵光宇周育森
- 关键词：电击转化E基因
