刘炳辉
- 作品数：5 被引量：39H指数：3
- 供职机构：沈阳农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 6种链霉菌基因组DNA提取方法比较被引量：15
- 2008年
- 采用优化SDS、SDS、优化CTAB、CTAB、液氮研磨、微波法分别提取委内瑞拉链霉菌基因组DNA,比较6种方法的差异,选出最佳提取方法分别提取S.fradiae,S.venezuelae,S.ambofa-ciens,S.glaucescens,S.coelicolor基因组DNA,并利用16S rDNA的通用引物扩增相应的目的基因。结果表明:6种方法制备的基因组DNA以优化SDS法和微波法为上选,后者的纯度高但量很少。优化SDS法是6种提取方法中最可靠的DNA提取方法,DNA量大,纯度高,可靠,可作为PCR反应的模板进行16S rDNA基因有效扩增。
- 刘炳辉曹远银闫建芳齐小辉程浩刘秋
- 关键词：放线菌基因组DNA提取PCRRDNA
- 放线菌菌株MY02的鉴定及发酵液中抗真菌活性组分的分离被引量：10
- 2007年
- 从东北地区蔬菜保护地土壤中筛选分离到一株放线菌菌株MY02,通过对其形态学特征及16S rDNA序列分析,初步鉴定其为龟裂链霉菌龟裂亚种Streptomyces rimosussub sp.rimosus。该菌株的发酵液具有抗真菌活性。发酵液经离心、过滤、萃取、硅胶柱层析等步骤分离纯化其活性物质,并进行高效液相色谱(HPLC)分析,表明其活性物质中含有两种抗真菌活性组分。对活性组分的正丁醇溶液进行紫外光谱扫描,结果表明该活性组分具有四烯类抗生素的典型特征吸收峰。
- 孙强闫建芳刘秋齐小辉刘炳辉
- 关键词：龟裂链霉菌抗真菌活性RDNA
- 聚酮类化合物生物合成基因簇与药物筛选被引量：12
- 2008年
- 由微生物和植物产生的聚酮类化合物的数量极其庞大,是一大类结构多样化和生物活性多样性的天然产物,已经成为新药的重要来源。介绍了3种类型聚酮类化合物生物合成基因簇的特点,即以模块形式存在的Ⅰ型聚酮合酶,包含一套可重复使用结构域的Ⅱ型聚酮合酶以及不需要ACP参与,以植物中的查耳酮合酶为代表的Ⅲ型聚酮合酶。同时,还介绍了基于3种类型聚酮类化合物生物合成基因的特点,利用分子生物学方法构建筛选探针,进行当前药物基因筛选的进展。
- 刘炳辉曹远银闫建芳齐小辉程浩黄盼盼刘秋
- 关键词：聚酮合酶基因簇药物筛选
- 利用降落PCR扩增KS基因
- 2008年
- 通过优化SDS法提取链霉菌(Streptomyces spiramyceticus)和2株由生物技术与资源利用国家民委——教育部重点实验室分离获得的放线菌D8和D18基因组DNA,同时应用降落PCR和普通PCR扩增酮基合酶基因(ketosynthase,KS)。结果表明,扩增出的特异性条带与目的基因片段长度一致,降落PCR法较普通PCR法扩增KS基因特异性更高。使用普通Taq酶,降落PCR程序能明显提高PCR的特异性,它可用于扩增普通PCR难以扩增的基因片段,或在假阳性难以去除的情况下提高PCR的特异性。
- 刘炳辉曹远银程浩闫建芳齐小辉刘秋
- 关键词：降落PCR退火温度
- 拮抗放线菌B-20的种类鉴定及其16S rDNA序列分析被引量：3
- 2008年
- 对分离自东北蔬菜保护地土壤的1株拮抗放线菌菌株B-20进行了形态特征、培养特征、生理生化、细胞壁组分分析及16S rDNA序列分析。基内菌丝无横隔、不断裂,气生菌丝多分枝;孢子丝波曲至螺旋形,孢子椭圆形,表面光滑。细胞壁化学组分Ⅰ型。以16s rDNA序列为基础构建了包括13株相关种属细菌在内的系统发育树。根据多相分类鉴定结果表明,放线菌B-20的上述特征与淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)的高度一致。二者的16S rDNA序列的相似性达到了99%。因此,可将链霉菌B-20定名为淡紫灰链霉菌B-20 (S.lavendulae B-20)。
- 闫建芳齐小辉高晓梅刘秋刘炳辉程浩
- 关键词：RDNA
