叶建新
- 作品数：12 被引量：22H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组人糖基化尿激酶原的制备方法
- 本发明是利用生物工程的方法，通过基因工程技术构建了一种有双重放大功能的表达载体，并获得一株高效表达的CHO工程细胞。经微载体和低血清培基高密度灌流培养和纯化，制备一种治疗冠状动脉梗塞，脑血栓，中央视网膜动静脉血栓和其他血...
- 方继明肖成祖余炜源张正光李风知黄子才陈昭烈叶建新
- 文献传递
- 聚乙二醇修饰对尿激酶原性质的影响被引量：6
- 1996年
- 为了延长尿激酶原的半衰期，采用聚乙二醇５０００（ＰＥＧ５０００）对该酶进行了修饰。结果表明，尿激酶原经ＰＥＧ修饰后，在兔体内的半衰期延长了９～１３倍，同时酶活性也有损失，溶酰胺活性保持６２％，溶纤活性保持３．８％～１０％。
- 叶建新肖成祖张正光高丽华于芳
- 关键词：聚乙二醇修饰尿激酶原半衰期药代动力学
- 用国产微孔玻璃珠初步纯化人u-PA
- 1999年
- 用国产微孔玻璃珠从ＣＤ－１工程细胞株培养上清中纯化ｕ－ＰＡ，摸索了微孔玻璃珠结合ｕ－ＰＡ的条件和洗脱方法，比较了硫酸铵线性梯度洗脱或２５％乙二醇洗脱ｕ－ＰＡ活性的结果，最后确定洗脱的条件为０．２５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ、１～２ｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４、ｐＨ９．３。经此一步纯化，ｕ－ＰＡ比活性达到１５３２９ＩＵ／ｍｇ，回收率７８％，还原条件下ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分子量为５２×１０３的单链ｕ－ＰＡ占７４％。
- 郭志霞叶建新张正光高丽华黄子才肖成祖
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活剂纯化
- 尿激酶型纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备、鉴定及其在抗原纯化中的应用研究被引量：4
- 1995年
- 以从ＣＨＯ工程细胞培液上清初步纯化的尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过杂交瘤技术制备出１１株抗ｕＰＡ单克隆抗体，经特异性实验表明，这些抗体特异性地识别高分子量ｕＰＡ（５．４×１０￣４ｕ），与低分子量ｕＰＡ（３．３×１０￣４ｕ）有不同程度结合，但都不识别１．８×１０￣４ｕ的ｕＰＡ片段。它们与牛血清白蛋白、ＣＨＯ细胞上清液及组织型纤溶酶原激活剂都无交叉反应。１１株抗体分别针对５个不同的抗原决定簇。以单克隆抗体偶联的ｓｃｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱直接从培液上清纯化ｕＰＡ，并经ｓｅｐｈａｃｒｖ１Ｓ－２００分子筛进一步纯化，纯度达９５％以上，回收率为８５％，纯化倍数为１５７倍左右。
- 艾析叶建新肖成祖张正光
- 关键词：尿激酶类单克隆抗体杂交瘤
- 重组尿激酶原的纯化和性质研究被引量：4
- 1996年
- ＣＨＯ工程细胞１１Ｇ持续表达的ｐｒｏ－ＵＫ分泌在细胞培养液的上清中，培养液上清经过微孔玻璃（ＭＰＧ）吸附色谱，羧甲基阳离子交换色谱，高压液相凝胶色谱三步纯化，纯化倍数可达７００倍以上，总回收率为４６％．再经过Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和层析去掉少量的双链尿激酶，得到纯化尿激酶原．终产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染分析，纯度达９０％以上，分子量为５２ｋｕ，其比活性为５１２２０Ｕ／ｍｇ．抗体中和、二异丙基氟磷酸（ＤＦＰ）抑制等实验证明重组ｐｒｏ－ＵＫ的性质和天然ｐｒｏ－ＵＫ的性质相一致．
- 叶建新肖成祖张正光
- 关键词：尿激酶原提纯
- 重组组织型纤溶酶原激活剂的纯化和鉴定被引量：7
- 1997年
- 介绍一种简便高效的两步纯化重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的方法 ,产rt PA的CHO工程细胞SGG培养上清 ,经微孔玻璃珠 (MPG)吸附和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化 ,纯化倍数平均达到 380倍 ,比活性为 390 0 0 0U/mg蛋白 ,rt PA活性回收率达到 1 4 0 % ,经SDS PAGE还原电泳分析主要为t PA蛋白 ,其中高分子t PA占 80 %左右 .用纤维蛋白自显影法检测均有溶纤活性 ,蛋白质印迹证实具有t
- 吴本传陈昭烈刘红叶建新
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂纯化
- 重组尿激酶原的纯化、特性及化学修饰
- 叶建新
- 重组人糖基化尿激酶原的制备方法
- 本发明是利用生物工程的方法,通过基因工程技 术构建了一种有双重放大功能的表达载体,并获得一株高效表 达的CHO工程细胞。经微载体和低血清培基高密度灌流培养 和纯化,制备一种治疗冠状动脉梗塞,脑血栓,中央视网膜动静脉 血栓...
- 方继明肖成祖余炜源张正光李风知黄子才陈昭烈叶建新
- 文献传递
- 蛋白质的化学修饰被引量：2
- 1995年
- 蛋白质种类繁多,结构各异,各有不同的功能,是生命活动不可缺少的重要角色,在疾病的治疗上有着广泛的应用。天然蛋白质在有其重要功能的同时,也有一些人们不希望有的缺点,如有抗原性,功能单一,半衰期太短等。为寻找理想的药用蛋白,人们试图对现有的蛋白质进行改造,这种改造主要有两种方式:一是通过基因工程的手段,改变蛋白质的编码基因,使蛋白质的氨基酸序列乃至空间结构发生改变,从而达到改变蛋白质性质和功能的目的;另一种方法是通过化学修饰来改变蛋白质的性质和生物学特性。
- 叶建新
- 关键词：蛋白质分子抗原性尿激酶原表面特性PEG修饰病灶部位
- 纤溶酶原激活剂的糖基侧链对体内清除率和溶栓活性的影响
- 1995年
- tPA和uPA这两类溶栓药物都是糖蛋白,其上的糖基侧链对其半减期和生物活性有一定的影响。它们在体内的清除主要通过肝脏,而肝细胞对它们的识别一部分是通过识别糖基侧链完成的;位于活性中心附近的糖基侧链则会对它们和底物的结合造成一定的空间障碍,从而影响酶的生物活性。
- 叶建新
- 关键词：纤溶酶原激活剂药代动力学
