姜楠
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：同济大学附属同济医院更多>>
- 发文基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划国家自然科学基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 适于膜片钳技术的大鼠肝Kupffer细胞急性分离和鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的:建立一种适于膜片钳技术(PCT)的大鼠肝Kupffer细胞的急性分离方法.方法:经门静脉插管,用无Ca2+,Mg2+K-H原位灌注液冲洗后,IV型胶原酶原位循环灌注消化,Percoll不连续密度梯度离心,分离制备大鼠肝Kupffer细胞,选择性贴壁纯化.用体内、体外吞噬功能(炭素墨水或聚苯乙烯乳珠)实验鉴定制备的肝Kupffer细胞.用全细胞膜片钳记录技术测定Kupffer细胞电流.结果:分离获得的大鼠肝Kupffer细胞形态多样,典型的为多角形或星形,细胞分离产量为2.5-3.5×106/g,细胞纯度90%,贴壁率为39.4%.用台盼蓝染色鉴定,细胞活性大于90%,多数细胞明显吞噬颗粒.易用于PCT,且记录到钙池操纵的Ca2+通道电流(store-operatedCa2+channelcurrents,Isoc).结论:用胶原酶原位循环灌注消化,结合Percoll不连续密度梯度离心和选择性贴壁纯化,成功分离制备出高产、纯度高的适于PCT的肝Kupffer细胞.
- 刘亮张宗明张驰姜楠
- 关键词：膜片钳技术KUPFFER细胞
- SK&F96365对大鼠肝缺血再灌注损伤后Kupffer细胞钙池操纵的钙通道电流的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:研究缺血再灌注损伤对大鼠肝Kupffer细胞钙池操纵的钙通道电流(ISOC)的影响,并筛选有效的钙通道阻滞剂进行拮抗．方法:建立SD大鼠肝缺血再灌注模型,利用低浓度胶原酶循环灌注、差速离心、选择性贴壁的方法急性分离肝Kupffer细胞,应用全细胞膜片钳记录技术,研究肝缺血再灌注损伤对大鼠肝Kupffer细胞ISOC的影响及钙通道阻滞剂SK&F96365的拮抗作用．结果:大鼠Kupffer细胞的ISOC为:假手术组-78．7±25．2 pA,缺血再灌注组-159．3±27．3 pA,两组有显著统计学差异(n=15,P<0．01)．5-50μmol／L的SK&F96365对Kupffer细胞ISOC的抑制呈浓度依赖性增强,ISOC由-152．7±42．5 pA依次降至-81．4±24．2 pA,-56．1±26．4 pA,-45．2±21．6 PA,-34．8±17．1 pA,-25．6±13．4 pA,SK&F96365对Kupffer细胞ISOC的抑制率逐渐增加,分别为43．9％±18．1％,59．2％±24．0％,66．3％±23．0％,73．8％±17．8％,80．9％±12．6％,其IC50值为6．53μmol／L．结论:缺血再灌注损伤可以促进SD大鼠Kupffer细胞上SOC的进一步开放,导致ISOC的增大,Kupffer细胞活化,进一步加重缺血再灌注损伤．SK&F96365对Kupffer细胞ISOC的抑制呈浓度依赖性增强,对肝细胞损伤具有保护作用．
- 姜楠张宗明郭金星刘亮张驰张嫣璐张子超
- 关键词：KUPFFER细胞肝缺血再灌注损伤钙通道阻滞剂
