江克清
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 重组甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白的纯化及其多克隆抗体制备被引量：4
- 2009年
- 目的:制备可用于甘蔗花叶病毒(ScMV)E株系(ScMV-E)检测用多克隆抗体。方法:将ScMV-E外壳蛋白(CP)基因连接到pET29a(+)上,经PCR检测、酶切及测序鉴定获得重组质粒pET29a-CP,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达重组ScMV-E外壳蛋白;采用His Trap Kit纯化目的蛋白,作为抗原免疫新西兰大白兔,制备特异性抗体;通过间接ELISA、Western blot和组织印迹法检测所制备抗体的特异性。结果:SDS-PAGE分析表明,重组融合蛋白含6个组氨酸标记,相对分子质量约43000;Western blot检测显示所获得的抗体特异性良好,间接ELISA法测得血清的效价为1:81 920;甘蔗叶片的组织印迹检测结果显示杂交效果良好。结论:制备的多克隆抗体可直接用于ScMV-E检测,并有望用于制备ScMV-E检测试剂盒。
- 阙友雄江克清许莉萍郭莺林剑伟陈如凯
- 关键词：甘蔗花叶病毒外壳蛋白原核表达多克隆抗体
- 甘蔗花叶病毒E株系CP基因原核表达与抗体制备
- 在国家“十五”863项目(2002AA241031)和农业部948项目(2003-Q06)项目的资助下，农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室开展了甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白基因(ScMV-E CP)转化甘蔗研究，并...
- 江克清
- 关键词：甘蔗花叶病毒外壳蛋白基因原核表达抗体制备
- 文献传递
- 甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白纯化与多克隆抗体制备
- 甘蔗花叶病是由甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,ScMV)引起的一种多基因遗传病害,也是一种重要的世界性甘蔗病害.本文目的是制备可用于甘蔗花叶病毒E株系(ScMV-E)检测用抗体.首先将ScMV...
- 阙友雄江克清郭莺林剑伟许莉萍陈如凯
- 关键词：甘蔗花叶病花叶病毒外壳蛋白基因多克隆抗体
- 文献传递
- 植物抗病育种中的标记辅助选择与甘蔗被引量：5
- 2005年
- 抗病基因的分子标记具有稳定、准确、高效的特点,通过对基因型而不是表型的直接选择,抗病基因分子标记应用于辅助选择可大大加快常规育种进程,提高育种效率。本文评述了植物抗病育种中标记辅助选择的发展概况,介绍了各种DNA分子标记技术及植物抗病基因连锁标记的筛选方法,重点介绍了甘蔗抗病基因分子标记研究的现状,展望了分子标记辅助选择在甘蔗抗病育种中的前景。
- 阙友雄江克清许莉萍
- 关键词：甘蔗DNA分子标记标记辅助选择
- 甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白基因原核表达载体的构建与表达(英文)被引量：3
- 2006年
- 目的:用原核表达的方法获取大量带6个His标记的甘蔗花叶病毒E株系(ScMV-E)外壳蛋白(CP)。方法:用带有BamHⅠ和SalⅠ酶切位点的特异引物,以带有多个基因的重组质粒pNUSCP为模板,扩增出片段长度为942bp的ScMV-E外壳蛋白基因,亚克隆到pMD18-T载体上,转化E.coliDH5α,经双酶切检测获得阳性克隆。BamHⅠ和SalⅠ双酶切阳性克隆质粒,回收目的片段ScMV-E的CP基因。把目的片段插入表达载体pET29a(+),转化E.coliBL21(DE3),测序。结果:阳性质粒pET29a-CP在E.coliBL21(DE3)中得到大量特异表达。SDS-PAGE分析表明,该蛋白的相对分子质量约36000,与预测一致。结论:以上方法可以得到带6个His标记的目的蛋白,有利于纯化并获取高纯度的ScMV-E的外壳蛋白。
- 江克清阙友雄许莉萍张凌燕
- 关键词：甘蔗花叶病毒外壳蛋白基因原核表达
