王晨晨
- 作品数：9 被引量：52H指数：6
- 供职机构：国家林业局更多>>
- 发文基金：云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目云南省应用基础研究基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 根癌农杆菌介导的地衣型真菌Cladonia metacorallifera的转化被引量：3
- 2015年
- 以潮霉素抗性和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为筛选标记,利用地衣型真菌Cladonia metacorallifera的菌丝,成功实现了根癌农杆菌介导的遗传转化,PCR检测证明转化子中存在潮霉素抗性基因,共聚焦显微镜检测到转化子菌丝能够产生绿色荧光,证明EGFP能够在trp C启动子控制下在地衣型真菌中表达。
- 王毅王晨晨周旭许宰铣王娟
- 关键词：CLADONIA增强型绿色荧光蛋白潮霉素抗性
- 七彩红竹中类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及功能分析被引量：12
- 2015年
- 类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶(Flavonoid-3-O-glucosyltransferase,3GT)是花青苷(Anthocyanins)生物合成途径中的关键酶,它主要负责将不稳定的花色素转变为稳定的花色素苷,虽然目前已经从其他植物中克隆获得类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶,但是对竹子中的类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶并不清楚。该文以产生花青素的七彩红竹(Indosasa hispida Mc Clure cv.Rainbow)为材料,首先通过3GT的同源比对后设计3GT基因特异引物,获得3GT基因片段;然后运用RT-PCR及RACE技术从七彩红竹茎中克隆得到完整的3GT基因(Ih3GT)。结果表明:Ih3GT基因的c DNA全长序列为1 730 bp,含有1个1 425 bp的开放阅读框(ORF),编码474个氨基酸;系统进化分析显示,七彩红竹3GT与其他禾本科植物的3GT聚类到同一个分支;该基因推断的蛋白与水稻(Oryza sativa)3GT蛋白的相似性为69%,与二穗短柄草(Brachypodium distachyon)3GT的相似性为67%;经氨基酸序列比对,推断七彩红竹3GT含有糖基转移酶基因家族特有的结构域PSPG-box;半定量PCR的结果显示,七彩红竹3GT基因在微红的幼茎中大量表达,而在其他组织中并不表达,说明Ih3GT具有组织表达特异性。该结果为今后深入研究七彩红竹花色苷的形成机理、鉴定Ih3GT酶活性以及利用Ih3GT基因培育竹子新品种奠定了基础。
- 王毅王晨晨周旭毕玮杨宇明王娟
- 关键词：CDNA克隆基因表达分析
- 七彩红竹查尔酮异构酶基因IhCHI1的克隆与表达分析被引量：9
- 2014年
- 查尔酮异构酶(CHI)是花青素生物合成过程中重要的结构基因。本项实验根据转录组数据设计的特异引物,利用RT-PCR方法成功从七彩红竹红色幼茎中克隆到七彩红竹的查尔酮异构酶基因IhCHI1(GenBank登录号为KJ477333)。序列分析结果表明,IhCHI1包含完整的cDNA开放阅读框(ORF),由690 bp组成,编码229个氨基酸。Blast比对结果显示,该蛋白属于CHI家族蛋白;系统进化分析结果显示,七彩红竹与禾本科植物水稻、玉米等亲缘关系较近;利用RT-PCR方法对IhCHI1基因在不同组织中表达情况进行分析,结果表明,IhCHI1在七彩红竹的红色幼秆中表达量最高。
- 王晨晨毕玮王娟王娟周旭杨宇明
- 关键词：基因克隆查尔酮异构酶
- 七彩红竹查尔酮合成酶IhCHS1基因的克隆与分析被引量：6
- 2014年
- 通过已报道查尔酮合成酶基因的保守序列设计特异引物,扩增得到七彩红竹(Indosasa hispida cv.rainbow)查尔酮合成酶(Chalcone Synthase,CHS)基因片段,再以RACE法获得CHS基因全长cDNA序列。该cDNA全长1953 bp,含1542 bp的开放阅读框,编码含513个氨基酸残基的蛋白质。多序列比对结果表明IhCHS1推断的蛋白与节节麦(Aegilops tauschii)等禾本科植物的CHS相似性在87%以上,临位法构建系统发生树显示IhCHS1与禾本科植物CHS亲缘关系较近。RT-PCR结果显示IhCHS1在幼嫩红秆中大量表达。
- 周旭王晨晨毕玮王娟杨宇明王毅
- 关键词：查尔酮合成酶基因克隆
- 七彩红竹MYB转录因子基因的克隆与分析被引量：2
- 2015年
- MYB基因是最大的植物转录因子家族成员之一,在植物次生代谢、生长及发育过程中发挥着重要作用。利用RACE方法,从七彩红竹中克隆得到1个与MYB同源的基因,命名为Ih MYB4,并利用RTPCR检测Ih MYB4在不同组织部分表达情况。序列分析表明:Ih MYB4序列全长1044 bp,编码347个氨基酸,该蛋白含有2个MYB功能结构域,属于R2R3-MYB家族。系统进化分析表明:Ih MYB4蛋白可能是一类参与花青素生物合成调控相关的蛋白。RT-PCR检测表明Ih MYB4只有在微红的幼嫩竹秆中才表达,说明Ih MYB4参与七彩红竹中花青素生物合成的调控。
- 王晨晨毕玮王娟王娟周旭杨宇明
- 关键词：MYB基因克隆花青素
- 七彩红竹二氢黄酮醇4-还原酶基因IhDFR1的克隆及表达分析被引量：9
- 2014年
- 二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)是植物花色素苷合成途径中的关键酶,在植物花色的形成过程中起重要作用。依据七彩红竹转录组数据设计特异引物,采用RT-PCR技术从七彩红竹中克隆获得了一个新的DFR基因cDNA全长,命名为IhDFR1(登录号为KF728205)。序列分析结果表明,IhDFR1基因cDNA全长945 bp,编码314个氨基酸。生物信息学预测显示,该基因编码的蛋白具有典型的DFR蛋白功能结构域,存在2个特异结合位点,属于非Asn/Asp型DFR酶,与禾本科植物中的DFR具有较高的相似性。对不同发育时期七彩红竹的IhDFR1基因进行时空表达的结果显示,只有在竹秆颜色呈现红紫色时,IhDFR1基因才有表达。以上结果初步显示IhDFR1蛋白可能作为一个重要的酶参与竹秆花色素苷的代谢调控,同时为进一步研究七彩红竹花色素苷产生的分子机理和综合开发利用奠定了基础。
- 缪福俊陈剑孙浩王毅王晨晨原晓龙杨宇明王娟
- 关键词：花色素苷基因表达
- 七彩红竹MYB转录因子基因的克隆与分析
- MYB基因是最大的植物转录因子家族成员之一,在植物次生代谢、生长及发育过程中发挥着重要作用.本文利用RACE方法,从七彩红竹中克隆得到1个与MYB同源的基因,命名为IhMYB4,并利用RT-PCR检测IhMYB4在不同组...
- 王晨晨毕玮王娟周旭杨宇明王毅
- 关键词：MYB转录因子基因克隆
- 文献传递
- 发芽环境、微波辐射和激素浸泡对云南松种子发芽的影响被引量：17
- 2012年
- 采用L9(34)正交试验设计,了解发芽环境、微波辐射和激素浸种对云南松种子发芽的影响,结果表明,3种因素共同影响云南松种子的发芽。其中,发芽环境是影响发芽率和发芽势的主要因子,夜间无光照的温度相对较低环境适宜云南松种子的发芽,但与全天光照且温度相对较高环境的差异并不显著。微波辐射对云南松种子发芽的影响比激素浸种小,2个因素均显著地影响云南松种子的发芽率,但都对发芽势的影响不显著。发芽率和发芽势最佳的组合分别为A3B1C1和A3B2C1,即无微波辐射、清水浸种置于夜间无光照环境下的种子,和微波辐射15 s、清水浸种置于夜间无光照环境的种子,其2个指标分别达83.0%和48.8%。
- 周安佩李连芳刘东玉白青松王晨晨孙昂魏博
- 关键词：云南松正交试验发芽率发芽势
- 不同处理对云南松种子胚根和胚轴伸长的影响实验被引量：9
- 2012年
- 采用L9(34)正交实验,通过置皿环境、微波辐射和激素浸种3个因素3种水平对云南松种子发芽的胚根和胚轴伸长的影响研究。结果表明,胚根长度和胚轴长度的最优处理为全天光照、无微波辐射、0.2 g/L的IBA溶液浸种。置皿环境显著地影响云南松种子胚根和胚轴的长度,全天光照有利于促进胚根和胚轴的伸长(19.88 mm和45.69 mm),激素浸种主要影响胚根的伸长,2 g/L的IBA溶液浸种显著促进胚根伸长。微波辐射对以上2个指标无显著的差异影响。
- 周安佩李莲芳刘东玉白青松王晨晨孙昂魏博
- 关键词：微波辐射云南松种子胚根胚轴正交实验
