陈清清
- 作品数：8 被引量：33H指数：2
- 供职机构：河南农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家粮食丰产科技工程中国科学院知识创新工程重要方向项目中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 小麦根腐病菌索氏平脐蠕孢SYBR Green I实时荧光定量PCR检测技术研究被引量：16
- 2014年
- 由索氏平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana引起的小麦根腐病,常和其他土传真菌病害混合发生,传统的症状鉴别方法很难区分,导致病害防控难度增加。为建立病菌实时荧光定量检测体系,根据ITS序列设计引物,筛选出1对特异性引物BS‐F/R,扩增片段大小为280bp。以菌丝DNA为标准品构建实时荧光定量标准曲线,并对其灵敏度、特异性、可重复性进行评价。结果表明,建立的实时荧光定量PCR检测方法速度快,灵敏度高,特异性强,重复性好。构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,扩增效率良好。利用该定量检测体系,可以检测出田间小麦样品中52.8fg/μL的病菌DNA。
- 陈清清孙炳剑袁虹霞施艳李洪连
- 关键词：土传病害ITS序列小麦根腐病菌
- 几种小麦土传真菌病原物的Multi-PCR检测
- 建立小麦根部常见土传真菌Rhizoctonia cerealis,Bipolaris sorokiniana,Gaeumannomyces graminis var.tritici,Fusarium.pseudogram...
- 陈清清张煜周海峰孙炳剑施艳邢小萍袁虹霞李洪连
- 关键词：全蚀病菌纹枯病菌根腐病菌多重PCR
- 文献传递
- 河南省禾谷孢囊线虫的分子检测
- 禾谷孢囊线虫病是世界小麦生产上最重要的土传病害之一,目前,该病已在中国小麦产区普遍发生,并有逐年加重的趋势,自1989年在湖北发现该病害以来,现在已确认,中国分布有禾谷孢囊线虫和菲利普孢囊线虫两个种.本实验采用禾谷孢囊线...
- 刘佳张煜陈清清袁虹霞孙炳剑代君丽李洪连
- 关键词：小麦禾谷孢囊线虫
- 文献传递
- 小麦土传真菌病原物分子检测体系的建立及应用
- 土传真菌病害是世界小麦生产上最重要的一类病害，此类病害已在我国小麦产区普遍发生，并有逐年加重的趋势，严重威胁我国小麦的安全生产。主要的小麦土传真菌病害有纹枯病、全蚀病、根腐病及茎基腐病，这些病害常常混合发生，且症状相似，...
- 陈清清
- 关键词：分子检测多重PCR
- 文献传递
- 一种同时检测小麦田5种土传真菌病原物的PCR引物及其检测方法
- 本发明公开了一种同时检测小麦田5种土传真菌病原物的PCR引物，纹枯病菌引物的序列如下：上游引物P1：5′-TCCTCCCGCTTATTGATATGC-3′；下游引物P2：5′-CGGTTGAGCTGGGTCTTTTA-3...
- 李洪连陈清清孙炳剑张煜施艳袁虹霞邢小萍
- 文献传递
- 一种同时检测小麦田5种土传真菌病原物的PCR引物及其检测方法
- 本发明公开了一种同时检测小麦田5种土传真菌病原物的PCR引物，纹枯病菌引物的序列如下：上游引物P1：5′-TCCTCCCGCTTATTGATATGC-3′；下游引物P2：5′-CGGTTGAGCTGGGTCTTTTA-3...
- 李洪连陈清清孙炳剑张煜施艳袁虹霞邢小萍
- 文献传递
- 河南中部地区3个CCN群体致病型的初步鉴定
- 利用国际标准鉴别寄主A、B两组对小麦禾谷孢囊线虫河南新乡延津、河南开封杞县、河南漯河临颍3个群体进行了致病型鉴定,结果发现3个群体不同于国际上已经正式报道的禾谷孢囊线虫致病型。其中本文研究的河南新乡延津、河南开封杞县两个...
- 张鹏阎海涛陈清清袁虹霞邢小萍李洪连
- 关键词：禾谷孢囊线虫致病型
- 文献传递
- SYBR Green I实时荧光定量PCR检测小麦纹枯病菌体系的建立和应用被引量：21
- 2015年
- 【目的】纹枯病是小麦生产上重要的土传病害之一,早期准确定量检测病原是病害预测预报及实现有效防控的基础。传统组织分离鉴定方法费时、程序复杂,而且无法做到准确定量。为实现小麦纹枯病早期快速准确定量检测,研究旨在建立小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)的SYBR Green I实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测方法。【方法】根据小麦纹枯病菌的β-tubilin序列,设计1对特异性引物,建立并优化SYBR Green I real-time PCR反应体系,利用小麦纹枯病菌、立枯丝核菌(R.solani)、双核丝核菌AG-A和AG-F菌株、小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis var.tritici)、小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、小麦茎基腐病菌假禾谷镰孢(Fusarium pseudograminearum)和禾谷镰孢(F.graminearum)等8种小麦根部或土壤病原物的菌丝DNA进行普通PCR和real-time PCR特异性检测,并对灵敏度、可重复性进行评价。利用该体系分别检测接种后5、10、60 d不同接种浓度的盆栽小麦病株。【结果】研究设计的引物特异性强,普通PCR检测结果仅小麦纹枯病菌DNA有扩增条带。Real-time检测结果表明该对引物对小麦纹枯病菌只有唯一的产物吸收峰,对其余供试菌株均未检测到荧光信号。普通PCR检测的灵敏度为6.5×103copies/μL,real-time PCR的灵敏度可达到6.5×102copies/μL。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的real-time PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,熔解曲线的吸收峰单一,相关系数为0.997,扩增效率为0.91。对人工接种的盆栽小麦病株进行real-time PCR检测,结果表明与病情指数和接种量分别呈显著正相关。【结论】研究建立的基于real-time PCR技术的小麦纹枯病菌快速检测方法速度快、灵敏度高、特异性强、重复性好。可以用于小麦纹枯病菌检测、指导病害预测和防治。
- 孙炳剑陈清清袁虹霞施艳李洪连
- 关键词：小麦纹枯病菌SYBRI实时荧光定量PCR
