于洋
- 作品数:33 被引量:54H指数:5
- 供职机构:江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种检测类猪圆环病毒P1抗体的间接ELISA试剂盒
- 本发明涉及一种用于检测类猪圆环病毒P1抗体的间接ELISA试剂盒。属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pET-28a(+)原核表达载体,构...
- 何孔旺文世富温立斌王小敏李彬郭容利俞正玉茅爱华倪艳秀张雪寒吕立新周俊明胡屹屹汪伟叶青祝昊丹于洋沈江萍周萍
- 文献传递
- ClassⅠ新城疫病毒强毒株主要结构蛋白特异性抗体的研制被引量:3
- 2010年
- 以新城疫病毒(NDV)ClassⅠ强毒分离株9a5b尿囊液、原核表达的NP、P、M、HN、F五种蛋白为免疫原,接种6周龄BALB/c小鼠制备抗体,用血凝抑制试验(HI)、间接免疫荧光试验(IFA)、细胞中和试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western-blot方法共同检测所获得的各类抗体。结果显示,成功制备获得了NDV各结构蛋白多抗及12株NDV特异性单抗。免疫特性鉴定结果表明,在获得的12株单抗中,3H7和3H9株单抗为抗ClassⅠHN特异性单抗,仅具有IFA和HI效价,而2A8株单抗却无HI效价;其他单抗均与ClassⅡ毒株存在交叉反应。
- 孙英杰陈鸿军宋翠萍于洋仇旭升于圣青丁铲
- 关键词:新城疫病毒强毒株结构蛋白特异性抗体
- 一种猪流行性腹泻病毒变异株N基因全序列的扩增方法
- 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒变异株N基因全序列的扩增方法,包括如下具体步骤:1.提取猪流行性腹泻病毒变异株RNA;2.依据猪流行性腹泻病毒变异株的N基因全序列设计引物,并用RT-PCR的方法扩增猪流行性腹泻病毒变异株...
- 李彬孙冰何孔旺郭容利杜露平倪艳秀温立斌俞正玉张雪寒茅爱华吕立新胡屹屹周俊明王小敏祝昊丹于洋
- 文献传递
- 日粮能量水平对扬州鹅屠宰性能和生化指标的影响被引量:3
- 2010年
- 选用42日龄的扬州鹅200只,随机分成4组,每组5个重复,每个重复10只,公母各半。日粮能量水平分别为:Ⅰ组10.11 MJ/kg,Ⅱ组11.19MJ/kg,Ⅲ组12.37MJ/kg,Ⅳ组13.45MJ/kg,研究不同能量水平对42~56日龄扬州鹅屠宰性能和生化指标的影响。结果表明:日粮能量水平对56日龄扬州鹅的全净膛率、半净膛率、胸肌率、腿肌率、腿脂率、皮下脂肪厚和肌间脂肪宽度的影响差异不显著(P>0.05),显著影响屠宰率和腹脂率(P<0.05);日粮能量水平对血清胆固醇、低密度脂蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总蛋白和尿酸的含量影响差异不显著(P>0.05),随着能量水平的升高,血清高密度脂蛋白显著增加(P<0.05),而甘油三酯、极低密度脂蛋白和白蛋白显著下降(P<0.05)。综上所述,日粮能量水平对42~56日龄扬州鹅屠宰率和腹脂率有显著的影响,并对血液生化指标有一定影响。
- 魏宗友卢健于洋张红伟朱素华王洪荣
- 关键词:扬州鹅屠宰性能生化指标
- 猪博卡病毒VP2基因的克隆与原核表达被引量:8
- 2013年
- 为研究猪博卡病毒VP2蛋白的功能及其在疫病诊断中的作用,对其基因进行了克隆和原核表达。根据猪博卡病毒基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了1对引物,采用PCR方法扩增猪博卡病毒的VP2基因,并将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a-VP2,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为49 000的融合蛋白,蛋白质表达量较高,且以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western blot结果显示,表达的VP2蛋白能与His抗体发生特异性免疫反应。说明该试验成功克隆了猪博卡病毒的VP2基因并进行了原核表达,为研究该蛋白的功能及建立血清学诊断方法奠定了基础。
- 李彬杜露平何孔旺温立斌茅爱华张雪寒倪艳秀郭容利王小敏周俊明吕立新俞正玉胡屹屹于洋
- 关键词:VP2克隆原核表达
- 新城疫classI强毒株9a5b-D5C1的拯救
- 新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,严重危害世界养禽业,已造成了巨大的经济损失。目前已报道的大...
- 仇旭升于洋徐丹韦娜娜詹媛孟春春陈鸿军于圣青丁铲
- 关键词:新城疫病毒
- 文献传递
- 新城疫病毒ClassⅠ强毒株L基因的表达及单克隆抗体的制备被引量:1
- 2012年
- 采用RT-PCR方法从新城疫病毒(NDV)ClassⅠ强毒株9a5b中扩增出了L基因C末端的基因片段,将其克隆到表达载体pGEX-6P-1中,测序验证后转化入表达宿主菌BL21进行IPTG诱导表达,表达的蛋白接种8周龄BALB/c小鼠,制备L蛋白的单克隆抗体,用间接免疫荧光试验(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western-bolt方法共同检测所获得的抗体。结果显示,重组菌可表达出分子质量约为39ku的重组融合蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。多种方法筛选显示成功制备了4株单克隆抗体。免疫特异性鉴定结果表明,在所获得的单抗中,4株单抗均具有ELISA和IFA效价,且4株单抗与ClassⅠ毒株的反应均强于与ClassⅡ毒株的反应。
- 韦娜娜于洋陈鸿军仇旭升于圣青宋翠萍谭磊任涛丁铲
- 关键词:新城疫病毒原核表达单克隆抗体L蛋白杂交瘤细胞
- 新城疫病毒ClassⅠ强毒株HN单克隆抗体的研制及免疫学反应被引量:5
- 2010年
- 目的:制备抗新城疫病毒(NDV)ClassⅠ强毒分离株9a5b的单克隆抗体。方法:以9a5b尿囊液为免疫原,接种6周龄BALB/c小鼠,以血凝抑制(HI)和间接免疫荧光(IFA)检测所获得的mAb。结果:成功制备获得NDV血凝素(HN)特异性mAb4株。免疫特性鉴定表明:在这4株mAb中,3H7和3H9株仅具有IFA和HI效价,且呈现ClassI毒株特异性。结论:该抗体材料为NDVClassⅠ和Ⅱ毒株的血清学鉴定提供极大的便利工具,并为NDVHN功能及受体学研究奠定了基础。
- 孙英杰陈鸿军宋翠萍于洋仇旭升于圣青丁铲
- 关键词:新城疫病毒强毒株HN单克隆抗体
- SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的引物
- 本发明涉及一种利用SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法,属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测判定...
- 温立斌何孔旺高晓静王小敏李彬郭容利俞正玉茅爱华倪艳秀张雪寒吕立新周俊明胡屹屹汪伟叶青祝昊丹于洋沈江萍周萍
- 羔羊育肥TMR发酵饲料及其制备方法
- 本发明公开了一种羔羊育肥TMR发酵饲料及其制备方法,饲料包括以下重量份数比的原料:玉米27~28.4;麸皮4~9;豆粕11.5~14.9;青贮稻草秸10~20;青贮玉米秸30~40;磷酸氢钙1.1~1.4;石粉0.2~0...
- 刘蓓一丁成龙顾洪如许能祥董臣飞宦海琳于洋