刘秀丽
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌vacA基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2002年
- 空泡毒素是幽门螺杆菌产生的已知的唯一蛋白毒素,该毒素与感染者胃肠上皮损伤和溃疡形成密切相关,同时也是幽门螺杆菌免疫预防和免疫治疗的重要候选组分。从幽门螺杆菌NCTC11637染色体DNA中经PCR方法获得了2.9kb的该基因成熟肽全长序列,将该基因克隆至载体pET22b+,经PCR扩增和酶切鉴定后序列分析表明,该基因与已知序列完全一致。
- 刘纯杰张兆山陶好霞李淑琴李眅刘秀丽段海清黄翠芬
- 关键词：幽门螺杆菌克隆测序VACA基因
- 幽门螺杆菌UreB和HspA DNA疫苗的构建及免疫评价被引量：5
- 2002年
- 本研究选择幽门螺杆菌尿素酶B和热休克蛋白A为候选抗原,通过PCR扩增基因,克隆至真核表达质粒pCD-NA3.1(-)His-Myc上,构建成DNA疫苗。通过小鼠免疫效果的评价,获得两株具有免疫源性DNA疫苗。
- 刘秀丽李淑琴刘纯杰陶好霞李勣张兆山
- 关键词：幽门螺杆菌UREBHSPADNA疫苗尿素酶B热休克蛋白A
- 幽门螺杆菌ureB及ureB-hspA融合基因在减毒鼠伤寒沙门菌中的表达及小鼠的免疫应答被引量：4
- 2003年
- 目的 构建H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗候选株 ,并进行初步的免疫原性分析。方法 将H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因分别克隆入pTrc99A asd质粒的多克隆位点之内。挑取单菌落质粒鉴定后 ,分别将其电击经中间宿主X3730转入最终宿主X4 0 72 ,SDS PAGE和Westernblot检测蛋白表达。将疫苗候选株经口或鼻免疫BALB c小鼠。结果 疫苗候选株能够分别表达出相对分子质量 (Mr)为 6 4× 10 3的UreB蛋白及 77× 10 3的UreB HspA融合蛋白。在免疫BALB c小鼠的肠液和血清中可以分别检测到针对H .pylori的特异性分泌型IgA和IgG抗体。结论 构建了能够表达幽门螺杆菌UreB及UreB HspA融合蛋白的活菌疫苗候选株 ,为探索制备H .pylori口服活菌疫苗奠定了基础。
- 李勣刘纯杰李淑琴陶好霞刘秀丽张兆山
- 关键词：幽门螺杆菌
- 幽门螺杆菌基因工程疫苗的探索研究
- 通过初步评价纯化重组ureB和hspA质粒在小鼠的免疫效果.表明二者均能刺激机体产生抗UreB和HspA的IgG.在此基础上,将ureB-hspA融合基因成功构建到腺病毒载体上,检测结果表明该重腺病毒具有侵染真核细胞能力...
- 刘秀丽
- 关键词：幽门螺杆菌重组腺病毒载体抗原表位疫苗热休克蛋白A
- 文献传递
- 幽门螺杆菌黏附素基因alpA的克隆及序列分析被引量：1
- 2004年
- 目的 获取幽门螺杆菌黏附素基因alpA ,并将它克隆到质粒 pET - 2 2b(+)中进行核苷酸序列分析。 方法 利用PCR技术扩增alpA ,并将其定向插入pET - 2 2b(+)载体中通过DNA序列分析仪进行核苷酸分析。 结果 DNA序列分析表明 ,所克隆的alpA基因序列与GenBank公布的基本一致。 结论 本研究获得了序列正确的alpA基因 ,为其重组表达及其相关研究奠定了良好基础。
- 白杨张亚历王继德刘秀丽张兆山周殿元
- 关键词：幽门螺杆菌黏附素克隆
- 小鼠H pylori长期感染模型研究被引量：1
- 2004年
- 目的:用H pylori SSl(Sydney strainl)感染C57BL/6小鼠及Balb/c小鼠,建立稳定的H pylori感染的小鼠实验动物模型. 方法:通过灌胃的方式用H pylori SS1菌株感染二级C57BL/6小鼠和Balb/c小鼠,灌胃后4、12及24 wk分三次处死动物,用胃黏膜匀浆液进行细菌培养试验、尿素酶试验、胃病理组织学检查以及血清学抗体检测试验. 结果:灌胃4wk后,处死的7只Balb/c小鼠经胃组织细菌培养发现有6只显示阳性结果;处死的7只C57BL/6小鼠中有5只显示阳性结果.12和24wk后的实验组7只Balb/c 小鼠胃组织细菌培养均为阳性,而7只C57BL/6小鼠中有6只显示阳性结果.在不同阶段尿素酶检测的阳性结果与细菌培养法结果一致.实验组动物胃窦部及胃体部均出现了轻度至中度慢性活动性胃炎变化;血清学IgG检查表明,各实验组的实验动物产生了抗H pylori血清抗体;而对照组动物的胃黏膜匀浆液经各项检测均为阴性. 结论:成功地建立了H
- 陶好霞刘纯杰刘秀丽李淑琴李勣张兆山
- 关键词：小鼠幽门螺杆菌细菌培养尿素酶试验消化性溃疡
- 人源μ型阿片受体与激动剂慢性作用介导的cAMP上调作用研究
- 2004年
- μ型阿片受体是阿片类药物镇痛与成瘾的分子基础。从人脑组织总RNA通过RT-PCR法扩增获得μ型阿片受体的cDNA,将其克隆至pcDNA3.1穴+雪中,转染CHO细胞后筛选单克隆细胞株,检测重组细胞株表达的μ型阿片受体与激动剂慢性作用介导的胞内信号转导能力。通过激动剂慢性作用信号转导分析证实,DAMGO能够明显抑制吗啡慢性给药引起的重组细胞株胞内cAMP水平的上调作用,初步揭示了阿片受体与特异性配体相互作用的信号转导机制。
- 刘威段海清李淑琴刘秀丽张兆山
- 关键词：Μ型阿片受体CAMP信号转导机制上调作用
- 幽门螺杆菌长期感染蒙古沙土鼠导致胃炎、胃溃疡的实验研究被引量：4
- 2003年
- 目的 :用幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori)长期感染蒙古沙土鼠建立胃炎、胃溃疡的动物模型。方法 :蒙古沙土鼠经过禁食、禁水预处理之后 ,采用国际标准菌株H .pyloriATCC 4 35 0 4灌胃 ,在末次灌胃动物后 4 ,8,12 ,2 4 ,4 8,5 2周分别对H .pylori感染组和正常对照组蒙古沙土鼠的胃黏膜进行H .pylori形态学 (涂片和细菌培养 )、H .pylori快速尿素酶检测、H .pylori特异性PCR检测和病理组织学观察 ,并对血清中抗H .pyloriIgG抗体进行了检测。结果 :H .pylori感染组动物以上各项指标均为阳性 ,表明已经感染H .pylori;而正常对照组则以上各项均为阴性。病理组织学观察表明感染组 8周即可见到慢性炎症性病变 ,12周时黏膜层和黏膜下层可见到淋巴滤泡 ,2 4周胃窦部可见到胃溃疡。结论 :H .pyloriATCC 4 35 0 4可以长期定植于蒙古沙土鼠腺胃 ,能够产生与H .
- 李勣刘纯杰陶好霞刘秀丽李淑琴张兆山
- 关键词：幽门螺杆菌蒙古沙土鼠动物模型胃炎胃溃疡
- 黏附素保守区疫苗防治鼠幽门螺杆菌感染被引量：2
- 2005年
- 目的:利用人类幽门螺杆菌(H pylori)感染的小鼠模型研究黏附素保守区(AB)疫苗在预防与治疗H pylori感染的作用. 方法:实验分为预防与治疗两部分.预防部分把实验动物无特定致病菌C57BL/6小白鼠分成4组,分别通过灌胃方法给予AB(100μg)加CT(2 μg)、生理盐水、单纯AB(1 00 μg)、单纯CT(2 μg),1次/wk,共4次. 2 wk后再用活H pylori灌胃,再4 wk后处死动物.治疗部分把已感染H pylori的小白鼠分成4组,分组与治疗方法同预防部分,治疗结束后4 wk处死动物.取胃黏膜行半定量细菌培养检查H pylori情况. 结果:预防实验的保护率分别为AB加CT61.5%(16/26), 单纯AB、单纯CT和PBS保护率均为0.AB加CT治疗组H pylori根除率为:38.5%(1 0/26),生理盐水组、单纯AB、单纯CT组均无治疗作用.治疗组未根除H pylori的小鼠,疫苗组H pylori的定植密度明显低于其他4组(P<0.05). 结论:由AB加免疫佐剂组成的口服疫苗,不仅有预防H pylori感染的作用,同时也有根除已感染的H pylori 的作用.AB可用于H pylori疫苗的研制.
- 白杨梁燕玲刘秀丽施理王继德张兆山周殿元张亚历
- 关键词：CT黏附素疫苗保守
- 幽门螺杆菌热休克蛋白A与尿素酶B融合表达产物的初步纯化及其在小鼠体内免疫效应活性分析被引量：1
- 2002年
- 目的 :探讨幽门螺杆菌热休克蛋白A与尿素酶B融合蛋白的免疫生物学活性。方法 :采用亲和层析、离子交换和凝胶过滤对幽门螺杆菌热休克蛋白A与尿素酶B融合蛋白进行初步纯化 ,用粗纯化蛋白对小鼠进行免疫 ,然后分析其免疫活性。结果 :采用亲和层析或离子交换和凝胶过滤后 ,融合蛋白的纯度分别可达到 6 5 .6 %和90 .2 %。该融合蛋白可诱导小鼠产生抗幽门螺杆菌的胃肠黏液IgA和血清IgG抗体 ,并促使免疫小鼠脾脏T淋巴细胞CD4+ CD8+ 比值的增加。结论
- 陶好霞刘纯杰李淑琴李责力刘秀丽周围张兆山
- 关键词：热休克蛋白A尿素酶B小鼠免疫效应
