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幽门螺杆菌重组腺病毒双价疫苗的构建及免疫学评价被引量：4: 2004年; 幽门螺杆菌 (Hp)是导致胃炎、消化道溃疡和胃癌的的主要病原菌 .利用基因重组技术 ,成功将Hp的ureB和hspA基因融合 .将ureB hspA融合基因成功构建到腺病毒载体上 .检测结果表明 ,该重组腺病毒具有侵染真核细胞能力 ,且能在真核细胞中表达目标抗原 .以血清中IgG和新鲜粪便中sIgA ,评价其免疫效果 ,结果显示。; 刘秀丽刘纯杰陶好霞李淑琴李勣张兆山; 关键词：幽门螺杆菌重组腺病毒尿素酶B 热休克蛋白A 体液免疫

小鼠H pylori长期感染模型研究被引量：1: 2004年; 目的:用H pylori SSl(Sydney strainl)感染C57BL/6小鼠及Balb/c小鼠,建立稳定的H pylori感染的小鼠实验动物模型. 方法:通过灌胃的方式用H pylori SS1菌株感染二级C57BL/6小鼠和Balb/c小鼠,灌胃后4、12及24 wk分三次处死动物,用胃黏膜匀浆液进行细菌培养试验、尿素酶试验、胃病理组织学检查以及血清学抗体检测试验. 结果:灌胃4wk后,处死的7只Balb/c小鼠经胃组织细菌培养发现有6只显示阳性结果;处死的7只C57BL/6小鼠中有5只显示阳性结果.12和24wk后的实验组7只Balb/c 小鼠胃组织细菌培养均为阳性,而7只C57BL/6小鼠中有6只显示阳性结果.在不同阶段尿素酶检测的阳性结果与细菌培养法结果一致.实验组动物胃窦部及胃体部均出现了轻度至中度慢性活动性胃炎变化;血清学IgG检查表明,各实验组的实验动物产生了抗H pylori血清抗体;而对照组动物的胃黏膜匀浆液经各项检测均为阴性. 结论:成功地建立了H; 陶好霞刘纯杰刘秀丽李淑琴李勣张兆山; 关键词：小鼠幽门螺杆菌细菌培养尿素酶试验消化性溃疡

幽门螺杆菌ureB及ureB-hspA融合基因在减毒鼠伤寒沙门菌中的表达及小鼠的免疫应答被引量：4: 2003年; 目的　构建H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗候选株 ,并进行初步的免疫原性分析。方法　将H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因分别克隆入pTrc99A asd质粒的多克隆位点之内。挑取单菌落质粒鉴定后 ,分别将其电击经中间宿主X3730转入最终宿主X4 0 72 ,SDS PAGE和Westernblot检测蛋白表达。将疫苗候选株经口或鼻免疫BALB c小鼠。结果　疫苗候选株能够分别表达出相对分子质量 (Mr)为 6 4× 10 3的UreB蛋白及 77× 10 3的UreB HspA融合蛋白。在免疫BALB c小鼠的肠液和血清中可以分别检测到针对H .pylori的特异性分泌型IgA和IgG抗体。结论　构建了能够表达幽门螺杆菌UreB及UreB HspA融合蛋白的活菌疫苗候选株 ,为探索制备H .pylori口服活菌疫苗奠定了基础。; 李勣刘纯杰李淑琴陶好霞刘秀丽张兆山; 关键词：幽门螺杆菌

鼠伤寒沙门氏菌asd基因的克隆及序列分析被引量：3: 2003年; 以鼠伤寒沙门氏菌标准株基因组DNA作为模板,用PCR的方法扩增鼠伤寒沙门氏菌的asd基因并克隆入质粒pUC19,并对其进行测序,序列与文献报道一致。同时将质粒pYA248上的链球菌asd基因进行了置换,观察了分别含有链球菌asd基因与鼠伤寒沙门氏菌asd基因的质粒在减毒鼠伤寒沙门氏菌X4072中的生长情况,结果表明含有鼠伤寒沙门氏菌的asd基因的高拷贝质粒pUC19的菌株生长情况更好。为完善染色体/质粒平衡致死系统,构建减毒鼠伤寒沙门氏活菌疫苗奠定了基础。; 李勣李淑琴刘纯杰陶好霞张兆山; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌克隆染色体质粒

幽门螺杆菌感染蒙古沙土鼠的实验及研究其活菌疫苗候选株的构建: 幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）是导致人类发生慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病原菌,并且与胃腺癌、胃粘膜相关淋巴组织淋巴癌的发生也密切相关.幽门螺杆菌的流行病学调查表明全世界超过5...; 李勣; 关键词：幽门螺杆菌蒙古沙土鼠鼠伤寒沙门氏菌疫苗; 文献传递

幽门螺杆菌UreB和HspA DNA疫苗的构建及免疫评价被引量：5: 2002年; 本研究选择幽门螺杆菌尿素酶B和热休克蛋白A为候选抗原,通过PCR扩增基因,克隆至真核表达质粒pCD-NA3.1(-)His-Myc上,构建成DNA疫苗。通过小鼠免疫效果的评价,获得两株具有免疫源性DNA疫苗。; 刘秀丽李淑琴刘纯杰陶好霞李勣张兆山; 关键词：幽门螺杆菌 UREB HSPA DNA疫苗尿素酶B 热休克蛋白A

幽门螺杆菌感染蒙古沙土鼠的实验研究及其活菌疫苗候选株的构建: 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是导致人类发生慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病原菌,并且与胃腺癌、胃粘膜相关淋巴组织淋巴癌的发生也密切相关.幽门螺杆菌的流行病学调查表明全世界超过5...; 李勣; 关键词：幽门螺杆菌蒙古沙土鼠鼠伤寒沙门氏菌疫苗; 文献传递

CTB/CS3融合蛋白与GM1结合能力和免疫原性的分析被引量：5: 2003年; 免疫霍乱毒素B亚单位 (CTB)或肠毒素大肠杆菌 (ETEC)定居因子CS3可使人体对ETEC的侵染有保护作用 .为探索研制ETEC双组分亚单位疫苗的可行性 ,利用大肠杆菌诱导表达系统表达了CTB与CS3的融合蛋白 (CTB/CS3) .蛋白质印迹结果表明 ,诱导表达的 2 9ku蛋白具有CTB和CS3蛋白双重抗原性 .经Ni NTA亲和层析纯化获得重组蛋白CTB/CS3,复性的重组蛋白可以部分形成五聚体并保留了与神经节苷脂GM1的结合能力 .动物实验表明 ,融合蛋白CTB/CS3具有CTB和CS3蛋白的双重免疫原性 ,同时。; 米凯霞李勣张兆山方荣祥; 关键词：GML 免疫原性疫苗婴幼儿急性腹泻

幽门螺杆菌长期感染蒙古沙土鼠导致胃炎、胃溃疡的实验研究被引量：4: 2003年; 目的 :用幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori)长期感染蒙古沙土鼠建立胃炎、胃溃疡的动物模型。方法 :蒙古沙土鼠经过禁食、禁水预处理之后 ,采用国际标准菌株H .pyloriATCC 4 35 0 4灌胃 ,在末次灌胃动物后 4 ,8,12 ,2 4 ,4 8,5 2周分别对H .pylori感染组和正常对照组蒙古沙土鼠的胃黏膜进行H .pylori形态学 (涂片和细菌培养 )、H .pylori快速尿素酶检测、H .pylori特异性PCR检测和病理组织学观察 ,并对血清中抗H .pyloriIgG抗体进行了检测。结果 :H .pylori感染组动物以上各项指标均为阳性 ,表明已经感染H .pylori;而正常对照组则以上各项均为阴性。病理组织学观察表明感染组 8周即可见到慢性炎症性病变 ,12周时黏膜层和黏膜下层可见到淋巴滤泡 ,2 4周胃窦部可见到胃溃疡。结论 :H .pyloriATCC 4 35 0 4可以长期定植于蒙古沙土鼠腺胃 ,能够产生与H .; 李勣刘纯杰陶好霞刘秀丽李淑琴张兆山; 关键词：幽门螺杆菌蒙古沙土鼠动物模型胃炎胃溃疡

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李勣