时祥柱
- 作品数：8 被引量：52H指数：5
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院生物工程研究所更多>>
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- 相关领域：化学工程农业科学理学生物学更多>>
- 苦瓜籽中抗真菌蛋白MAP13的分离纯化与表征被引量：5
- 2006年
- 将苦瓜籽粗提液分别经阴离子色谱柱、阳离子色谱柱交换后,得到一个具有抗真菌活性的蛋白MAP13.该蛋白经鉴定达到电泳纯,相对分子量为12.7 kDa.经还原剂处理后,电泳结果表明该蛋白由分子量分别为7和6 kDa的两个亚基组成,亚基之间通过二硫键连接.体外抑菌实验表明该蛋白对苹果轮纹病菌、瓜果腐霉病菌和棉花枯萎病菌具有较强的抑制作用.
- 陈贝时祥柱汪少芸叶秀云饶平凡
- 关键词：纯化抗真菌活性
- 新型嗜硫膜亲和纯化鸡传染性法式囊卵黄抗体研究
- 2002年
- 以普通定性滤纸为基质 ,经碱处理 ,二乙烯砜活化和巯基乙醇偶联后 ,制备成嗜硫膜 (thiophilic -mem brane ,TM) ,考察了其对鸡传染性法式囊 (IBD)卵黄抗体 (IgY)的特异性亲和吸附作用 .卵黄经醋酸钠 -醋酸缓冲液 10倍稀释于 4℃自然沉降脱脂后 ,所得上清液 (WSF)经嗜硫膜亲和吸附分离 ,可一步纯化得到SDS-PAGE电泳纯的卵黄抗体 .IgY在嗜硫膜上的吸附速度随着流速的增加而增大 ,吸附量则随着流速的增加而减少 .
- 时祥柱周建武王中来饶平凡
- 关键词：卵黄抗体IBD
- 阴阳离子交换色谱串联分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋白被引量：13
- 2004年
- 将阴阳离子交换色谱柱在灌注色谱工作站上串联,使苦瓜籽粗提液中未被阴离子色谱柱吸附的蛋白质直接在阳离子色谱柱上吸附,用盐线性梯度洗脱从阳离子色谱柱上分离出两个具有抗真菌活性的蛋白。两个抗真菌蛋白经鉴定都达到了电泳纯,相对分子质量均为30000左右,N 端氨基酸序列分别为DVSFRLSGADPRSYGMFI与DVNFDLSTATAK,表明所得到的两种蛋白为苦瓜籽中的2个Ⅰ型核糖体失活蛋白α 苦瓜素(α MMC)和β 苦瓜素(β MMC)。抗菌实验表明,α MMC对香蕉枯萎菌和果腐霉菌均具有较强的抑制作用,β MMC对果腐霉菌有较强的抑制作用,而α MMC和β MMC对白绢菌的抑制活性均不明显。采用串联色谱,α MMC和β MMC的质量回收率分别为13 8%和8 0%。
- 王宾香时祥柱郭春腾叶秀云王中来饶平凡
- 关键词：阴离子交换色谱纯化核糖体失活蛋白
- 采用高效离子交换色谱分离分析动物肠道菌群方法初探被引量：11
- 2006年
- 报道了利用高效离子交换色谱直接分离动物粪便肠道菌群的有关研究结果.人与兔的粪便样品稀释后经离心分离岀细菌,通过DEAE弱阴离子交换色谱(30cm×2cmi.d)进一步除去杂物,将所得细菌的完整细胞样品直接上样高效液相阴离子交换色谱进行分离.色谱柱采用TSKgelSuperQ-TOYOPEARL650C强阴离子交换树脂,平衡缓冲液为0.02mol/L的哌嗪-HCl缓冲液(pH8.0),吸附于色谱柱上的细菌完整细胞用0～1mol/LNaCl线性梯度进行洗脱,洗岀液由260nm紫外吸收与光散射强度检测器检测.人与兔粪便细菌样品分别获得8个与5个组分,经镜检与培养实验确认为细菌,并且光散射仪洗脱峰峰面积同细菌计数结果具有线性相关性.实验表明,高效离子交换色谱能够应用于肠道菌群这样的复杂细菌体系的分离分析.
- 陈章捷时祥柱林娟刘树滔叶秀云陈躬瑞饶平凡
- 关键词：肠道菌群高效离子交换色谱
- 新型嗜硫膜亲和纯化鸡传染性法式囊卵黄抗体研究
- 以普通定性滤纸为基质,经碱处理,二乙烯砜活化和巯基乙醇偶联后,制备成嗜硫膜(thiophilic-membrane,TM),考察了其对鸡传染性法式囊(IBD)卵黄抗体(IgY)的特异性亲和吸附作用.卵黄经醋酸钠-醋酸缓冲...
- 时祥柱周建武王中来饶平凡
- 关键词：卵黄抗体鸡血清
- 文献传递
- 高效离子交换色谱法研究植酸酶对小猪肠道微生物的影响被引量：1
- 2006年
- 植酸酶作为一种饲料酶制剂,可以通过催化水解将磷酸盐从植酸中释放出来,因而可以提高饲料中磷的利用率,降低环境的磷污染,但是,植酸酶作为一种饲料酶制剂,是否对动物肠道微生物产生影响,并通过改变肠道菌群的生理平衡来影响动物的消化与吸收,这一问题尚没有明确的答案。本研究植酸酶在仔猪的玉米-豆粕型日粮中添加植酸酶,并利用色谱的手段对对照组和试验组小猪肠道微生物色谱行为进行表征,并分析了各菌群的糖苷酶及蛋白酶的活力分布,发现添加植酸酶可以促进糖苷酶分泌型细菌的生长,这一数据对植酸酶在体内的作用机理提出了新的思路。
- 桂亮时祥柱林娟汪少芸叶秀云饶平凡
- 关键词：肠道微生物高效离子交换色谱酶活力
- 纤维素酶的二步分离纯化新工艺被引量：8
- 2002年
- 以普通定性滤纸为底物 ,经碱处理后 ,研究其对纤维素酶的亲和吸附作用。结果表明 ,普通定性滤纸对纤维素酶具有比较强的特异性吸附作用 ,能够从粗酶液中分离出纤维素酶 ,再经POROS 2 0HQ阴离子交换柱纯化后即可得到电泳纯的纤维素酶。该法大大简化了传统的纤维素酶纯化工艺 ,所得的纤维素酶活力极高 ,比活达 35 0U/mg以上 ,滤纸一步吸附后纤维素酶的纯化倍数为 9 5 5 ,活性回收率在 10 %左右。纯化后的纤维素酶为内切 β 葡聚糖酶 ,相对分子质量为 6 0 0 0 0 ,最佳 pH为 4 0 ,最佳温度为 70℃。
- 时祥柱郭春腾周建武王中来饶平凡
- 关键词：纤维素酶滤纸纯化
- 苦瓜籽中一种抗胰蛋白肽的分离及抗真菌作用观察被引量：14
- 2008年
- 利用凝胶过滤层析Sephadex G-75、强阳离子交换色谱SP-650M,从苦瓜籽中分离纯化出一种活性多肽.该多肽在Tricine-SDS-PAGE上显示为单一的谱带,分子量约为6.8 kDa.在经还原剂二硫苏糖醇(DTT)处理后的电泳结果表明该多肽不含有分子间的二硫键.此多肽是一种胰蛋白酶抑制剂,同时具有抗植物致病菌活性,是一种具有双功能作用的多肽.
- 刘璇时祥柱叶秀云
- 关键词：纯化胰蛋白酶抑制剂抗真菌
