曾宪卓
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：上海市肺科医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- T7噬菌体表达巨细胞病毒PP65蛋白抗原的初步研究
- 2006年
- 目的利用噬菌体展示技术构建巨细胞病毒基质蛋白PP65的抗原,初步评价其抗原性。方法PP65的基因片段经酶切后,与T7噬菌体的基因组相应酶切位点结合,借助包装蛋白组装成为完整的噬菌体。PP65目的蛋白以融合蛋白的形式表达在T7噬菌体的头蛋白部位,每个噬菌体颗粒表面可表达5～15个拷贝。噬菌体可以在宿主细胞中快速繁殖,并且能够迅速裂解宿主细胞,使目的蛋白的富集达到很高的效率。人巨细胞病毒基质蛋白PP65可以激发机体强烈的免疫反应,运用T7噬菌体载体展示系统表达PP65的部分肽段,扩增噬菌体,以SDS-PAGE电泳和western-blot鉴定所表达的抗原特性。结果获得了重组T7-PP65噬菌体,通过鉴定,噬菌体表达在其头蛋白上的PP65抗原可以被天然PP65的单克隆抗体所识别。结论噬菌体展示技术可以有效地进行病毒蛋白抗原的表达,为抗原筛选和疫苗的研制提供科学依据。将PP65表达在T7噬菌体表面,可以研究其免疫原性及评估其作为疫苗的可能性。
- 谈意隽周彩存唐亮刘岽曾宪卓孙宏彬张钥季育华
- 关键词：噬菌体展示巨细胞病毒PP65抗原表位
- EGFR基因重组T7噬菌体疫苗抗Lewis肺癌的实验研究被引量：4
- 2005年
- 本研究中制备了表达表皮生长因子受体(EGFR)部分肽段的基因重组T7噬菌体疫苗,并开展了诱导小鼠产生内源性抗EGFR抗体的实验性抗肿瘤作用研究。由T7噬菌体展示系统将7个经筛选的异种属(人源、鸡源)EGFR膜外区片段展示在其壳体次要头蛋白(P10B)上,用所制备的基因重组噬茵体疫苗免疫小鼠,免疫4W后皮下接种Lewis肺癌细胞,10d后分离瘤体并称重,观察各实验组的抗肿瘤效果。Western Blot检测重组的融合壳蛋白均有EGFR抗原性:高表达EGFR的A431 细胞与免疫3W的小鼠抗血清结合并被荧光二抗标记,流式细胞仪检测法确认有抗EGFR抗体产生;各实验组肿瘤均重统计结果显示,P-CL1-670组、P-cp1-130组、P-cp2-136组、P-cp3-145组、 P-cp4-142组与空白噬菌体组差异性显著。说明表达EGFR的基因重组噬菌体疫苗诱导产生的内源性抗体．在一定程度上抑制了EGFR阳性肿瘤的生长．为诱导型内源性抗EGFR抗体的肿瘤靶向治疗研究开辟了新的途径。
- 曾宪卓刘岽唐亮周彩存谈立松蔡新华李晓文周军年张培德张尚权
- 关键词：表皮生长因子受体肿瘤治疗
- EGFR基因重组噬菌体疫苗的构建及抗肿瘤效应的初步研究
- 目的：制备5个表达鸡源表皮生长因子受体(cEGFR)部分肽段的基因重组T7噬菌体疫苗，检测其EGFR抗原性，并初步观察其诱导产生的内源性抗EGFR抗体在C57BL/6J纯系小鼠Lewis肺癌模型上的抗肿瘤效果。
...
- 曾宪卓
- 关键词：表皮生长因子受体抗肿瘤效应
- 文献传递
- 表皮生长因子受体为靶向重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗的构建被引量：1
- 2005年
- 目的:构建表皮生长因子受体(EGFR)为靶向的重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗。方法:通过RT-PCR克隆EGFR基因膜外DNA片段,经测序鉴定正确,亚克隆3个不同的DNA片段插入T7噬菌体载体,构建重组T7噬菌体。用PCR、SDS-PAGE和Western印迹法鉴定构建的重组T7噬菌体。结果:目的DNA片段以融合蛋白形式表达,展示于噬菌体壳蛋白,Western印迹显示实验组重组T7噬菌体呈阳性信号。结论:构建的重组T7噬菌体融合表达了外源目的多肽,并保持了原有的功能活性。
- 蔡新华唐亮周军年曾宪卓刘岽谈立松
- 关键词：受体表皮生长因子癌症疫苗
