- SARS-CoV基因重组质粒的构建与表达被引量：1
- 2004年
- 目的 针对SARS冠状病毒 (SARS CoV)M、N、S和E蛋白 ,构建 4种重组真核表达质粒pVAX1 M、pVAX1 N、pVAX1 S和pVAX1 E ,为研制SARSDNA疫苗奠定基础。方法 根据GenBank中SARS病毒基因序列分别设计M、N、S和E引物 ,用RT PCR方法从感染SARS病毒的Vero E6细胞中扩增得到M、N、S和E片段 ,构建重组质粒pVAX1 M、pVAX1 N、pVAX1 S和pVAX1 E。并以重组质粒转染COS 7细胞 ,用免疫细胞化学和Westernblot方法鉴定重组质粒体外的表达。结果 经酶切鉴定及DNA序列测定证实重组质粒构建正确 ,细胞转染实验表明 ,构建的 4种重组质粒均能在COS 7细胞内表达。结论 成功构建 4种SARS CoV 4种蛋白抗原真核表达质粒 ,并能在真核细胞内获得表达。
- 王英王希良曾政田光周华赵光宇石辛甫罗德炎
- 关键词：基因重组质粒SARS冠状病毒SARS-COV菌种
- 血必净联合激素对大鼠百草枯中毒早期肺损伤的治疗作用
- 百草枯(PQ)是目前普遍使用的除草剂，人误服事件较多，由于毒性强且无特效解毒剂，病死率高。大量口服者，常于早期因急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征(AIDS)、多脏器衰竭(MODS)而死亡。减轻肺损害就成为治疗重点和目前研究...
- 王英邱泽武彭瑞云高亚兵王水明李扬
- 关键词：百草枯中毒肺损伤药理作用
- 口服减肥中药致急性铅绞痛一例
- 铅中毒导致腹绞痛已有报道，但口服个体中医自制的减肥中药致重症铅中毒性腹绞痛未见报道，本文针对一例中药致铅中毒系统论述了铅中毒的临床症状以及生理指标检测结果，并对临床诊治医生提出了建议。
- 王英彭晓波邱泽武孙成文
- 关键词：铅中毒生理指标
- 血必净联合激素对大鼠百草枯中毒急、慢性肺损伤的保护作用
- 背景和目的百草枯(Paraquat,PQ)是目前广泛使用的有机杂环类接触性脱叶剂及除草剂,因肺脏含氧丰富、肺泡细胞具有聚胺类物质转运系统(PQ结构与内源性聚胺类似),所以肺脏是主要受损靶器官,大量口服百草枯后会出现急性百...
- 王英
- 关键词：百草枯肺损伤血必净注射液白介素-6
- 文献传递
- 布氏杆菌pCDNA3.1-L7L12核酸疫苗的构建及其免疫学评价被引量：27
- 2004年
- 目的 获得布氏杆菌保护性抗原L7 L12重组蛋白及pCDNA3.1 L7 L12重组质粒 ,并比较其诱导特异性免疫应答的能力。方法 PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7 L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中 ;pET32a L7 L12重组质粒转化BL2 1(DE3) ,所表达蛋白经SDS PAGE、免疫印迹分析、纯化后免疫小鼠 ;pCDNA3.1 L7 L12重组质粒配以GM CSF同时肌肉注射免疫小鼠 ,3次免疫后测定免疫功能进行免疫效果的评价。结果 ELISA、Westernblot检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生 ,蛋白苗所诱导的抗体效价远远高于DNA疫苗 ;通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明DNA疫苗以诱发TH1 型免疫为主。结论 所构建的布氏杆菌DNA疫苗和蛋白苗均具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力 ,DNA疫苗诱导产生的细胞免疫反应强于蛋白苗 ,可作为潜在的布氏菌新型疫苗 。
- 曾政王英赵光宇周华于三科韩岳罗德炎马丽娟王希良
- 关键词：布氏杆菌DNA疫苗
- 传染性非典型肺炎疫苗的研制:重组真核质粒PVAX1/SARS-CoVM的构建及免疫原性研究被引量：1
- 2004年
- 目的:构建真核表达质粒PVAX1/M,免疫Balb/c小鼠,测定其诱导的特异性免疫应答,探讨传染性非典型肺炎(severeacuteresperatorysyn-drome,SARS)防治和康复的可能手段。方法:根据GenBank中登录的SARS-CoVM蛋白基因序列设计引物,采用反转录聚合酶链反应方法从感染SARS病毒的VeroE6细胞中扩增得到约666bp的片段,构建重组真核表达质粒PVAX1/M。体外转染COS-7细胞,细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达后,肌肉注射免疫Balb/c小鼠(雌性,6周龄),加强免疫3次后,测定其诱导免疫应答的能力。结果:构建的重组质粒经酶切及测序鉴定,与GenBank中登录的序列完全一致;细胞免疫化学方法均显示重组质粒可在COS-7细胞中表达有免疫原性的SARS-CoVM蛋白;免疫小鼠血清中检测到较高滴度的抗体,并能诱导特异性的CTL反应。结论:成功构建真核表达质粒PVAX1/SARS-CoVM,并能诱导小鼠产生特异性的免疫应答,为SARS的预防康复提供了可能的治疗手段。
- 王英曾政田光赵光宇石辛甫王希良
- 关键词：SARS-COVM蛋白基因表达质粒
- SARS-N蛋白真核表达质粒的构建及其免疫原性被引量：1
- 2004年
- 目的 选取SARS CoVN蛋白编码基因为研究对象 ,构建真核表达质粒PVAX1/N ,并在体外转染COS 7细胞的基础上免疫Balb/c小鼠 ,测定血清总IgG水平及诱发的细胞免疫反应。方法 用RT PCR方法从感染SARS病毒的VeroE6细胞中扩增得到约 12 6 9bp的片段 ,构建重组真核表达质粒PVAX1/N ,转染COS 7细胞后 ,用细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达 ;免疫Balb/c小鼠后 ,用ELISA方法测血清总IgG水平 ,MTS/PES比色法测定脾T淋巴细胞增殖 ,ELISPOT法测定CD8+ T淋巴细胞的活性。结果 构建的重组质粒经酶切及测序鉴定 ,与GenBank中登录的序列完全一致 ;细胞免疫化学鉴定结果显示 :重组质粒可在COS 7细胞中表达有免疫原性的SARS CoVN蛋白 ;免疫小鼠血清中检测到较高滴度的抗体 ;T淋巴细胞增殖及CTL活性均明显优于对照组 (P <0 .0 1)。结论 成功构建真核表达质粒PVAX1/SARS CoVN 。
- 王英王希良曾政田光赵光宇石辛甫马丽娟
- 关键词：SARS-COV真核表达质粒核蛋白
- 重组人可溶性白介素4受体基因克隆与表达
- 哮喘是一种过敏性疾病,严重危害人类健康。研究发现白细胞介素-4(interleukin-4)是引起哮喘的主要原因。IL-4通过与细胞表面的特异性受体结合而发挥作用。由此可见解决哮喘治疗的重要途径有研制IL-4的抗体。但目...
- 田光王希良孔祥英姚碧涛王英武素琴赵光宇
- 关键词：哮喘
- 文献传递
- 鼠疫耶尔森氏菌核酸疫苗的构建及其免疫学评价被引量：3
- 2005年
- 目的获得鼠疫F1和V抗原的重组质粒pVAX1/F1和pVAX1/V,并比较其诱导的特异性免疫应答的能力。方法PCR扩增鼠疫菌F1和V编码基因,分别与pGEMT连接测序,构建pVAX1/F1和pVAX1/V重组质粒,转染COS7细胞。用细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达,重组质粒加GMCSF免疫Balb/c小鼠,观察免疫效果。结果F1和V均在COS7细胞中表达;免疫鼠体内产生特异性抗体,pVAX1/V所诱导的抗体水平比pVAX1/F1高;通过抗体亚型分析、细胞因子和CD分子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发Th1型免疫为主。结论成功构建重组真核表达质粒pVAX1/F1和pVAX1/V,并且均具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础。
- 韩岳王希良何凤田摆茹董梅赵光宇王英曾政
- 关键词：鼠疫杆菌F1抗原DNA疫苗免疫应答
- 布氏菌病新型疫苗的初步研究
- 我们选择布氏菌免疫保护性抗原BCSP31、BC-SP39和L7/L12分子具有在6种布氏菌属种、型间具有高的同源性,并能够保证保护性抗原信息的交流作为新型疫苗靶点的优势。取得了以下结果:(1)通过基因重组技术扩增牛、羊、...
- 王希良张清华田光姚碧涛王英武素琴赵广宇高杰英
- 文献传递
