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魏丽丽

作品数：16 被引量：37H指数：3
供职机构：重庆医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市科委基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 15篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 14篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 8篇细胞
  • 7篇白介素
  • 6篇真核
  • 6篇核表达
  • 5篇真核表达
  • 5篇真核表达载体
  • 5篇转染
  • 5篇基因
  • 4篇人白介素24
  • 3篇蛋白
  • 3篇稳定转染
  • 3篇腺病
  • 3篇腺病毒
  • 3篇活性
  • 3篇活性检测
  • 3篇基因表达
  • 3篇白介素24
  • 3篇CHO细胞
  • 2篇凋亡
  • 2篇信号

机构

  • 16篇重庆医科大学
  • 1篇山东省肿瘤医...
  • 1篇湖北民族大学

作者

  • 16篇魏丽丽
  • 15篇宋方洲
  • 14篇易发平
  • 9篇袁成福
  • 8篇马永平
  • 8篇石华
  • 8篇陈济
  • 7篇杨俊霞
  • 4篇丁嵩涛
  • 4篇刘革力
  • 2篇崔涛
  • 2篇潘巍巍
  • 2篇卜友泉
  • 2篇李成华
  • 1篇成海恩
  • 1篇王中堂
  • 1篇张琴
  • 1篇罗耀玲

传媒

  • 2篇解放军医学杂...
  • 2篇生命的化学
  • 2篇第三军医大学...
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇生物技术
  • 1篇中国药理学通...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇西安交通大学...
  • 1篇西南大学学报...

年份

  • 5篇2008
  • 9篇2007
  • 1篇2005
  • 1篇2004
共 16 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
人白介素24cDNA克隆、突变纠正和原核表达被引量：3
2007年
目的获取人白介素24(IL-24)cDNA,构建原核表达载体以表达含有谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白GST-IL-24。方法以人外周血单核细胞(PBMC)总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-24 cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-2,测序结果显示在IL-24 cDNA第223位G→A,370位T→C,从而导致其编码蛋白的氨基酸发生改变:A75T,H124Y,通过二次PCR将其纠正,重组载体pGEX-IL-24转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE,Western blot检测显示有融合蛋白GST-IL-24表达。结果通过RT-PCR及二次PCR得到人IL-24 cDNA,构建其原核表达载体,经IPTG诱导在相对分子量约为50 000处有融合蛋白表达。结论IL-24的重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)可以表达GST-IL-24融合蛋白。
魏丽丽李成华袁成福陈济丁嵩涛刘革力易发平宋方洲
关键词：白介素24二次PCR融合蛋白克隆原核表达
人hIL-24Δ103重组腺病毒感染诱导A549细胞凋亡被引量：2
2008年
白细胞介素24(interleukin24,IL-24)是近年来新发现的1个IL-10家族细胞因子,具有明显的抗肿瘤活性.为了研究开发高活性、低分子量的IL-24,并探讨其用于肿瘤靶向治疗的可能性,本研究在前期基础上,进一步构建并制备了缺失N端103个氨基酸残基的IL-24(hIL-24Δ103)重组腺病毒,并观察了其对A549细胞生长增殖和凋亡的影响.首先,采用PCR技术扩增IL-24第104位至第206位氨基酸区域的编码序列,制备hIL-24Δ103重组腺病毒.用Ad-hIL-24Δ103重组腺病毒感染肺癌A549细胞.MTT分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染显著抑制了A549细胞的生长.Hoechst 33258染色和流式细胞仪分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染导致细胞凋亡.Western印迹分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染导致了PKR和eIF-2α蛋白的表达上调与磷酸化激活,提示PKR和eIF-2α参与了hIL-24Δ103导致的细胞生长抑制和细胞凋亡过程的调节.
丁嵩涛卜友泉魏丽丽张琴罗耀玲易发平宋方洲
关键词：人白介素24腺病毒细胞增殖细胞凋亡
Cyclin E基因siRNA真核载体的构建及干扰效果的初步鉴定被引量：3
2008年
根据CyclinE(细胞周期蛋白E)基因序列,设计siRNA干扰序列,将带9个碱基茎环结构的干扰序列插入带U6启动子真核表达载体,构建针对CyclinE基因的shRNA真核表达载体.酶切和测序鉴定确认载体构建成功后,脂质体法转染宫颈癌HeLa细胞,观察绿色荧光蛋白表达检测转染效率,RT-PCR法检测载体对CyclinE基因的表达抑制效果.实验结果显示CyclinE基因的RNAi真核表达载体构建成功,转入HeLa细胞后可以特异抑制细胞中CyclinE基因的表达.其中靶向(+797^+819)位点的质粒干扰效果较好,基因表达抑制率为59%.这些结果为利用该载体抑制CyclinE基因进行宫颈癌基因治疗研究奠定了基础.
陈济潘巍巍魏丽丽袁成福易发平卜友泉宋方洲
关键词：RNA干扰细胞周期蛋白EHELA细胞细胞周期
人白介素24基因克隆表达、纯化及活性检测被引量：1
2007年
目的克隆人IL-24基因,构建原核表达载体,表达纯化GST-IL-24融合蛋白,检测其活性。方法用密执毒素诱导HeLa细胞表达IL-24 mRNA,通过RT-PCR获取IL-24cDNA,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,IPTG诱导表达,经GSTrap TMF Fcolumn亲合纯化,SDS-PAGE和Westernblot检测融合蛋白的表达,MTT法检测GST-IL-24对宫颈癌CaSKi细胞的抑制作用。结果克隆得到人IL-24的cDNA,序列与GenBank公布序列完全一致,SDS-PAGE电泳可见50kD大小的融合蛋白表达。GST-IL-24以剂量依赖的方式抑制宫颈癌CasKi细胞的生长。结论成功构建人IL-24基因原核表达载体,表达纯化得到GST-IL-24,该融合蛋白对宫颈癌CasKi细胞具有抑制作用。
魏丽丽李成华杨俊霞石华丁嵩涛马永平易发平宋方洲
关键词：原核表达纯化MTT
细胞周期素E的干扰RNA对HeLa细胞增殖的抑制作用被引量：7
2007年
目的利用RNAi技术下调宫颈癌HeLa细胞中cyclin E mRNA水平，研究对HeLa细胞增殖及周期的影响。方法构建针对cyclin E基因的RNAi真核表达载体，脂质体转染HeLa细胞下调细胞中cyclin E mRNA含量。RT-PCR检测抑制效果；MTr检测细胞生长情况；流式细胞仪分析HeLa细胞周期变化。结果成功构建针对cyclin E基因的RNAi真核表达载体，可以特异下调cyclin E mRNA含量，并抑制细胞恶性增殖。细胞周期分析显示干扰使细胞停留在G0-G。期，S期细胞明显减少。结论RNAi能特异地下调HeLa细胞中cyclin E mRNA含量，抑制宫颈癌细胞恶性增殖，提示cyclin E可能成为宫颈癌基因治疗中的一个新的靶点。
陈济潘巍巍成海恩魏丽丽袁成福石华易发平马永平宋方洲
关键词：RNA干扰细胞周期素EHELA细胞细胞周期
人黑色素浓集激素1型受体真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立
2007年
目的构建人黑色素浓集激素1型受体(MCHR1)真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Westernblot及免疫荧光法检测MCHR1的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR1真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达了目的基因。结论真核表达载体的构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR1功能奠定了良好的实验基础。
袁成福杨俊霞魏丽丽石华陈济易发平马永平宋方洲
关键词：真核表达载体CHO细胞转染
人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立被引量：3
2007年
目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、W estern b lot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础。
袁成福杨俊霞魏丽丽石华陈济宋方洲
关键词：真核表达载体基因表达
白介素24与肿瘤
2005年
IL-24的抑癌机制复杂,可通过调节p38MAPK、PKR、β-联蛋白(β-catenin)、PI3K、ERK1/2和JNK1/2信号通路;干扰线粒体功能和增加ROS合成;抑制DNA的修复、肿瘤血管形成和肿瘤细胞侵袭转移的能力等途径抑制肿瘤细胞的生长,促进凋亡。用复制缺陷的腺病毒携带的IL-24(AdIL-24)现已进入Ⅰ、Ⅱ期临床实验,与三氧化二砷、放疗联合应用可增加疗效。
魏丽丽易发平宋方洲
关键词：白介素24信号转导肿瘤治疗
白介素21及其对肿瘤的抑制作用被引量：6
2004年
白介素 2 1(interleukin 2 1,IL 2 1)是新近发现的具有多效免疫调节活性的细胞因子。遗传学和生化分析证实 ,IL 2 1是IL 2细胞因子家族的新成员。IL 2 1受体复合物包含γc 受体亚单位 ,活化后可引起JAK/STAT信号转导级联放大效应。IL 2 1由活化的CD4 + T细胞合成 ,调节B细胞、T细胞、NK细胞和树突状细胞的增殖和分化。IL 2 1通过增强IgG抗体应答反应 ,抑制IgE合成而调节正常的体液免疫。IL 2 1也是重要的细胞免疫调节子 ,通过调节CD8+ T细胞和NK细胞的活性清除鼠的肿瘤。
魏丽丽易发平宋方洲
关键词：白介素21生物学功能肿瘤治疗
HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞的凋亡被引量：5
2007年
目的:观察HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因体外共转染,联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的效应。方法:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因的质粒载体分别以单独或联合的方式转染人宫颈癌Ca Ski细胞,随后利用RT-PCR技术检测细胞中HPV-16 E6癌基因的mRNA水平变化;Western blot分析细胞中抑癌蛋白p53水平的变化;流式细胞技术分析细胞凋亡情况。结果:经HPV-16 E6 siRNA和hIL-24转染后细胞后HPV E6癌基因的mRNA水平均下降,其中联合转染组显著下降(P<0.05);抑癌蛋白p53水平均增高,其中联合转染组显著增高,细胞凋亡率均升高,其中联合转染组显著升高(P<0.05)。结论:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因分别转染宫颈癌Ca Ski细胞后,均能抑制Ca Ski细胞中HPV-16 E6癌基因的表达,使抑癌蛋白p53恢复活性,诱导宫颈癌Ca Ski细胞凋亡;两者联合则具有协同效应,能显著提高肿瘤细胞凋亡率。
石华杨俊霞袁成福易发平魏丽丽刘革力马永平宋方洲
关键词：凋亡E6SIRNACA
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