万方
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：江西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 代谢工程改造微生物高产氨基酸的策略
- 氨基酸作为一类营养物质对维持机体正常的生理生化反应具有重要的功能，常用作食品、药品和化妆品等的添加剂.氨基酸的生产主要依靠微生物发酵法，产氨基酸菌的选育却是制约大规模工业生产氨基酸的重要因素.随着微生物分子育种策略和技术...
- 万方陈民良陈雪岚
- 关键词：谷氨酸棒杆菌氨基酸
- L-精氨酸产生菌的分子育种被引量：2
- 2014年
- L-精氨酸是一种非常重要的半必需氨基酸,其作为生物体生成NO的前体,参与尿素循环,对人和动物均具有重要的生理功能。现阶段生产精氨酸的主流方法是微生物发酵法,因此,如何快速、高效地选育精氨酸高产菌种成为业内关注的焦点。主要对精氨酸产生菌分子育种方法的最新研究进展进行了综述,并就目前存在的问题和发展方向进行了探讨。
- 张斌陈进聪万方陈民良杨慧林陈雪岚
- 关键词：L-精氨酸分子育种代谢工程
- proC及putP基因的敲除对钝齿棒杆菌产L-精氨酸生理代谢的影响被引量：3
- 2015年
- 为了选育精氨酸高产菌株,基于谷氨酸棒杆菌的基因组尺度代谢网络模型的指导,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过基因敲除技术构建了pro C和put P敲除菌株。摇瓶发酵结果表明,pro C敲除菌株精氨酸产量达到9.94g/L,较出发菌株提高了15.90%,葡萄糖转化率提高了26.02%。由于其生长受到明显抑制,因此在发酵液中外源添加24mmol/L的脯氨酸,结果发现其精氨酸产量达到12.22g/L,且菌株恢复生长。put P敲除菌株精氨酸产量达到12.23g/L,较出发菌株提高了42.70%,葡萄糖转化率提高了49.31%。以上结果显示,put P的敲除比pro C的敲除更有利于精氨酸的合成,put P的敲除对菌株的生理代谢基本无影响且无需外添加脯氨酸。
- 万方张斌陈民良陈进聪陈雪岚
- 关键词：钝齿棒杆菌生理代谢
- 比较pta及ack敲除对钝齿棒杆菌产L-精氨酸生理代谢的影响
- 2015年
- 旁支代谢途径的截断有利于目的氨基酸合成途径的集流。基于基因组尺度代谢网络模型的预测,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过无痕敲除技术分别敲除了编码磷酸乙酰基转移酶的pta基因及编码乙酸激酶的ack基因,阻断了乙酸的合成。摇瓶发酵结果表明,pta缺失菌株精氨酸产量较出发菌株提高了25.60%,达15.46g/L。葡萄糖转化率提高了29.41%;ack缺失菌株精氨酸产量达13.82g/L,较出发菌株提高了12.81%,葡萄糖转化率提高了26.02%。同时,pta及ack敲除菌株的细胞生长较出发菌株均分别提高了9.19%及7.71%。因此,pta、ack的敲除不仅有利于精氨酸的合成,而且对菌体生长具有促进作用;但pta的敲除更有利于精氨酸的积累。
- 万方张斌陈民良陈进聪陈雪岚
- 关键词：钝齿棒杆菌精氨酸生理代谢
- 代谢工程改造微生物高产氨基酸的策略被引量：2
- 2015年
- 氨基酸作为一类营养物质在维持机体正常的生理生化反应方面具有重要的功能,常用作食品、药品和化妆品等的添加剂。氨基酸的生产主要依靠微生物发酵,产氨基酸菌的选育却是制约大规模工业生产氨基酸的重要因素。随着微生物分子育种技术的发展和运用,利用代谢工程改造细胞本身固有的代谢网络,指导氨基酸高产菌的选育已成为当前研究的热点。以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为例,就该菌株代谢网络的特征以及高产氨基酸的代谢工程策略和应用进行综述。
- 万方陈民良张斌陈进聪陈雪岚
- 关键词：代谢工程谷氨酸棒杆菌分子育种氨基酸
- 吐温-80对钝齿棒杆菌产L-赖氨酸的影响被引量：2
- 2016年
- 对吐温-80提高L-赖氨酸产量的分子机制进行探究。以钝齿棒杆菌MT-M4Δpro B为出发菌株,在菌株生长至对数初期36 h时,添加5 mg/m L吐温-80进行摇瓶发酵,通过反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(reverse translate?real-time?fluorescence?quantitative?polymerase?chain?reaction,RT-q PCR)监控相关基因的转录水平、胞内的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate reduced form,NADPH)水平及α-酮戊二酸脱氢酶复合物(α-oxoglutarate dehydrogenase complex,ODHC)的活力。摇瓶发酵结果表明,添加吐温-80使L-赖氨酸产量提高了215%;RT-q PCR结果表明,编码ODHC的基因odh A、suc B和lpd A、参与ODHC调控的基因pkn G、dts R和ppp以及合成NADPH的磷酸戊糖途径基因zwf的转录水平均发生了变化,其中odh A、suc B、lpd A、pkn G及dts R1基因分别发生了上调,ppp基因下调,相应ODHC活力提高了32.9%;zwf基因上调了17.6倍,相应胞内NADPH水平提高了137%。因此,在对数生长初期36 h添加吐温-80具有双重功效,既提高了ODHC的表达又使NADPH积累,从而诱导L-赖氨酸的高产。
- 赖木兰万方朱蔷云陈雪岚
- 关键词：钝齿棒杆菌吐温-80L-赖氨酸NADPH
- 吐温40作为谷氨酸发酵促进剂的机制研究进展被引量：1
- 2017年
- 吐温(Tween)是一种安全的非离子型表面活性剂,被广泛应用于乳化剂、油类物质的增溶剂和微生物发酵促进剂等。其中Tween 40被发现可以明显提高谷氨酸棒杆菌等棒杆菌属产谷氨酸的量,因此引起了相关科研工作者对其作用机制的关注。文中主要对Tween 40诱发谷氨酸棒杆菌高产谷氨酸的机制进行综述,并分析研究过程中亟待解决的问题及发展趋势。
- 赖木兰万方朱蔷云陈雪岚
- 关键词：谷氨酸谷氨酸棒杆菌
