刘天华
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 亲和纯化技术联合质谱分析筛选乳腺癌中p90核糖体S6蛋白激酶4相互作用蛋白被引量：3
- 2016年
- 背景与目的:p90核糖体S6蛋白激酶4基因(ribosomal S6 kinase 4 gene,RSK4)作为抑癌基因,能够抑制细胞增殖、迁移并诱导细胞的凋亡,但与其配合发挥相应功能的相互作用蛋白尚不明确。该研究利用Flag标签纯化技术和质谱分析筛选鉴定乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的RSK4相互作用蛋白。方法:构建含有RSK4全长和Flag亲和标签的真核表达载体pc DNA3.1/EGFP-RSK4-Flag,将其转染至MDA-MB-231乳腺癌细胞株,72 h后收集细胞蛋白。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测RSK4表达情况。运用标签分离纯化RSK4蛋白,液相质谱/质谱分析技术(liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)鉴定RSK4相互作用蛋白,通过生物信息学的方法(GO分析和IPA分析)归纳分析互作蛋白以及与RSK4相互作用机制。结果:通过标签纯化联合质谱分析成功鉴定出丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶38(serine/threonine-protein kinase 38,STK38)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶38类(serine/threonine-protein kinase 38-like,STK38L)、MOB激酶致活因子2(MOB kinase activator2,MOB2)、蛋白精氨酸N甲基转移酶5(protein arginine N-methyltransferase 5,PRMT5)等24个RSK4相互作用蛋白。对所鉴定出的互作蛋白进行生物信息学分析,提示RSK4互作蛋白组参与包含细胞凋亡和细胞迁移运动等在内的多种生物信号通路。结论:利用亲和纯化技术联合质谱鉴定成功筛选出RSK4相互作用蛋白并通过生物信息学分析获得了RSK4参与乳腺癌细胞的凋亡、迁移相关生物调控网络。
- 刘日强刘天华张钦乐江凯郭坤张舒刘银坤杨华伟
- 关键词：真核表达基因转染
- 肝细胞肝癌中的N-糖基化相关的糖基转移酶的研究进展被引量：1
- 2013年
- 肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是常见的恶性肿瘤之一,全球每年超过50万人确诊为HCC.我国HCC病死率占全球HCC病死率的50％,转移和复发是导致其高病死率的主要原因[2].HCC的诱发涉及多种因素,主要有肝炎病毒的感染、黄曲霉毒素的摄入、饮水中蓝藻毒素污染以及吸烟、酗酒等.随着研究的不断深入,人们发现,HCC的发生、转移等过程常伴随有HCC细胞表面糖蛋白的异常糖基化.异常糖基化是由一种或多种糖基转移酶（glycosyltransferase,GT）表达水平或活性改变引起的.对GT的研究可以为HCC的临床诊断以及抗HCC药物作用靶点的设计提供理论依据.
- 刘天华刘银坤
- 关键词：糖基转移酶N-糖基化肝细胞肝癌CARCINOMA药物作用靶点HCC
- 乙肝相关性肝细胞癌早期诊断试剂盒
- 本发明公开了一种快速、简便、高诊断敏感度和精准度的乙肝相关性HCC早期诊断的酶联免疫法试剂盒，该试剂盒包括抗Gal‑3BP捕获抗体、抗Gal‑3BP检测抗体、抗AFP捕获抗体和抗AFP检测抗体，可以实现对受试者的血清中G...
- 郭坤刘天华张舒刘银坤
- 文献传递
- 肿瘤转移相关糖基转移酶表达调控研究进展被引量：1
- 2016年
- 蛋白质的糖基化修饰包括N-糖基化、O-糖基化、C-糖基化及糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定连接。其中N-糖基化和O-糖基化最为常见,研究较多。糖链的合成没有模板,基因编码的糖加工酶包括催化糖苷键形成的糖基转移酶（GTs）和糖苷酶,在两者的综合作用下,最终形成糖链。肿瘤转移过程中,GTs的表达水平及活性发生改变将导致蛋白质糖链结构的变化,继而影响细胞的生物学行为。
- 李薇刘天华张舒刘银坤
- 关键词：肿瘤转移糖基转移酶糖基化表观遗传
- 乙肝相关性肝细胞癌早期诊断试剂盒
- 本发明公开了一种快速、简便、高诊断敏感度和精准度的乙肝相关性HCC早期诊断的酶联免疫法试剂盒，该试剂盒包括抗Gal‑3BP捕获抗体、抗Gal‑3BP检测抗体、抗AFP捕获抗体和抗AFP检测抗体，可以实现对受试者的血清中G...
- 郭坤刘天华张舒刘银坤
- 文献传递
