熊宇芳
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：同济医科大学更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人CD80基因的cDNA克隆及其在肿瘤细胞中的表达被引量：2
- 1998年
- 采用巢式PCR(nested PCR)的方法从Raji细胞中扩增出人CD80 cDNA,并将这一cDNA克隆入载体pUC19中。经PCR扩增和限制性酶切分析,进行初步鉴定后,再将人CD80 cDNA克隆到pcD-NA表达载体上,构建成为pCD-CD80重组质粒。应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入小鼠黑色素瘤B16细胞后,用SABC法进行瞬时表达的检测。结果表明,转染后48h就具有明显人CD80基因的表达产物。
- 熊宇芳李清芬章洁屈伸邓耀祖
- 关键词：肿瘤细胞分子克隆基因治疗
- 人CD80基因的重组真核表达载体的构建及其在体内外的表达
- 1998年
- 构建了人ＣＤ８０ｃＤＮＡ重组真核表达载体ｐＣＤ－ＣＤ８０，并将这一重组表达载体用脂质体介导的基因转移技术转染至体外培养的小鼠黑素瘤Ｂ１６细胞系，并经直接注射将裸露ＤＮＡ导入小鼠肌肉组织。最后，利用单克隆抗体的亲合细胞化学技术中的ＳＡＢＣ法进行检测，结果表明：人ＣＤ８０基因在体内外均得以表达。可望进一步开展ＣＤ８０基因的抗瘤效应研究。
- 熊宇芳屈伸邓耀祖章洁刘然义
- 关键词：基因表达小鼠黑素瘤
- 转染人CD80基因的黑色素瘤细胞生长特性及免疫原性探讨被引量：3
- 1999年
- 目的：初步探讨弱免疫原性肿瘤细胞导入ＣＤ８０ 基因后免疫源性是否增强，以及肿瘤免疫原性与细胞表面分子的关系。方法：通过脂质体介导将ＣＤ８０ 基因导入小鼠黑色素瘤Ｂ１６ 细胞后，利用ＳＡＢＣ 法检测ＣＤ８０ 的表达；ＭＴＴ 法测定肿瘤细胞体外增殖能力；将肿瘤细胞接种至同源小鼠皮下后观察成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节生长速度；在同源淋巴细胞肿瘤细胞混合培养（ ＭＬＴＣｓ） 后，通过测定淋巴细胞增殖指数（ ＭＴＴ 法） 和ＣＴＬ 杀伤活性（ＬＤＨ 释放改良法） 检测肿瘤细胞的免疫原性。结果：ＣＤ８０ 基因转染的Ｂ１６ 细胞中存在ＣＤ８０ 的稳定表达；与野生型Ｂ１６ 细胞和模拟转染的Ｂ１６ 细胞比较，ＣＤ８０ 转染的Ｂ１６ 细胞体外生长速度无明显变化（ Ｐ ＞ ０－０５） ，体内生长速度明显减慢（ Ｐ＜ ０－０５） ，体外刺激淋巴细胞增殖和诱导ＣＴＬｓ 的能力明显增强（ Ｐ＜ ０－０５） 。结论：弱免疫原性肿瘤细胞导入ＣＤ８０ 基因可增强免疫原性，其作用强弱与肿瘤细胞表达ＭＨＣ 及ＩＣＡＭ１ 等分子的状况有关。
- 刘然义熊宇芳屈伸尤颖健邓耀祖
- 关键词：黑色素瘤免疫原性B7-1分子
- B7-CD28/CTLA4共刺激旁路的组成、功能及其在肿瘤基因治疗中的应用被引量：2
- 1998年
- B7-CD28/CTLA4共刺激旁路组成复杂,功能重要,对此共刺激旁路的探索将有助于更好地了解机体的免疫调控及免疫监视;B7分子的肿瘤基因疗法,尤其是B7分子联合其它免疫刺激分子的基因疗法是目前肿瘤基因治疗的热点和方向,并已在临床应用中获得成功,本文就此几方面作一介绍。
- 熊宇芳
- 关键词：B7分子基因治疗肿瘤
