王利君 作品数:20 被引量:54 H指数:4 供职机构: 首都医科大学附属北京同仁医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京同仁医院院科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
应用锁定核酸水解探针实时荧光定量PCR检测烟曲霉 王利君 朱敏 曹晶晶 顾海彤 鲁辛辛产OXA-23鲍曼不动杆菌的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测研究 被引量:3 2013年 目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱快速检测产OXA-23鲍曼不动杆菌。方法 125株泛耐药鲍曼不动杆菌及110株碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌为研究对象,用PCR和测序方法检测OXA基因。美罗培南与鲍曼不动杆菌37℃孵育2h后,上清液进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测,统计学分析各质谱峰的ROC曲线。结果 125株泛耐药鲍曼不动杆菌均携带OXA-23基因。碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌的质谱峰质荷比(m/z)为384m/z,406m/z,428m/z,而泛耐药鲍曼不动杆菌的质谱峰为358m/z,380m/z,402m/z,406m/z,424m/z,428m/z,446m/z,468m/z。质谱峰358m/z与380m/z的ROC曲线下面积(AUC)均为0.99。通过质谱峰的变化鉴定产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌,灵敏度与特异度均为100%。结论基质辅助激光解析电离飞行时间质谱可以快速、准确检测碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,指导临床合理使用抗菌药物。 王利君 范艳艳 王玫关键词:质谱 鲍曼不动杆菌 SYBR green I实时荧光PCR结合熔解曲线检测HBV B和C基因型的研究 被引量:2 2009年 国内外研究表明HBV基因型与病毒的感染途径、基因突变、疾病进程、抗病毒药物疗效有一定的关系[1-3],了解HBV基因型分布,追溯感染源对判断预后、监测抗病毒用药疗效、选择个体化治疗方案等具有重要应用价值。 王利君 袁梁 鲁辛辛关键词:HBV基因型 实时荧光PCR SYBR C基因型 个体化治疗方案 分离自一家医院真菌性鼻窦炎标本曲霉菌的准确鉴定和抗真菌药物敏感性分布 目的准确地鉴定曲霉菌,了解由真菌性鼻窦炎标本中分离的曲霉菌的种群分布,以及其对常用抗真菌药物的敏感性分布。方法收集了北京同仁医院2007年7月至2011年1月分离自真菌性鼻窦炎标本的曲霉菌共174株。(1)曲霉菌的鉴定:... 朱敏 王玫 王利君 黄艳飞 鲁辛辛文献传递 ITS和β-微管蛋白基因序列鉴定曲霉菌的临床应用 被引量:12 2011年 目的 研究ITS序列分析和β-微管蛋白基因序列分析在曲霉菌鉴定中的临床应用价值.方法 收集2007年7月至2010年1月,首都医科大学附属北京同仁医院真菌性鼻窦炎病原菌株中曲霉菌124株,分别对其进行形态学和分子鉴定.形态学包括传统培养方法、玻片培养和乳酸酚棉蓝染色及KOH消化后显微镜镜检.将菌株的PCR扩增产物进行ITS序列分析和β-微管蛋白基因序列分析,其测序结果与GenBank、European Molecular Biology Laboratory和DNA Data Bank of Japan 3个数据库比对,得到分子鉴定结果.结果 形态学鉴定为黄曲霉的56株曲霉中,经ITS序列分析鉴定为黄曲霉55株,寄生曲霉1株,β-微管蛋白基因序列分析结果与ITS序列分析相同;形态学鉴定为烟曲霉的37株曲霉中,ITS序列分析鉴定为37株烟曲霉复合种,β-微管蛋白基因序列分析鉴定为烟曲霉35株和仑图卢斯曲霉2株;形态学鉴定为杂色曲霉的21株曲霉中,ITS序列分析鉴定为杂色曲霉16株和未鉴定到种的曲霉5株,β-微管蛋白基因序列分析鉴定为杂色曲霉16株和聚多曲霉5株;形态学鉴定为构巢曲霉的10株曲霉中,ITS序列分析和β-微管蛋白基因序列分析均鉴定为构巢曲霉.结论 β-微管蛋白基因序列分析曲霉的分辨率较ITS序列分析高,可以将曲霉准确鉴定到种,ITS序列可以分析到曲霉复合种. 朱敏 耿佳靖 王玫 黄艳飞 王利君 鲁辛辛关键词:曲霉菌属 微管蛋白 应用β-微管蛋白基因序列鉴定曲霉 目的:研究种水平鉴定曲霉的基因分析方法。
方法:收集北京同仁医院真菌性鼻窦炎病原菌株曲霉124株,分别进行形态学和分子方法鉴定,前者包括培养方法、压片染色和小培养鉴定,后者选择ITS(the internal ... 朱敏 耿佳靖 王玫 黄艳飞 王利君 鲁辛辛关键词:曲霉 核糖体RNA基因 转录间隔区 文献传递 儿童血清肺炎支原体抗体IgM两种检测方法比较 被引量:12 2009年 目的:比较血清肺炎支原体抗体IgM检测的ELISA和间接免疫荧光法,为合理选择实验室检测方法提供依据。方法:北京同仁医院疑似肺炎支原体感染的儿童患者90例,采用ELISA和间接免疫荧光法进行血清肺炎支原体抗体IgM检测,数据进行统计学分析。结果:两种方法检测肺炎支原体抗体IgM差异具有显著性,而且一致性差(χ2=6.667,P=0.015,Kappa值=0.242,P=0.01)。ELISA方法的灵敏度=98.5%,特异度=70.8%,阳性预测值=90.3%,阴性预测值=94.4%,假阳性率=29.2%,假阴性率=1.5%,诊断符合率=91.1%;间接免疫荧光法的灵敏度=84.8%,特异度=100%,阳性预测值=100%,阴性预测值=70.6%,假阳性率=0,假阴性率=15.2%,诊断符合率=88.9%。结论:ELISA和间接免疫荧光法各有优势,实验室应根据临床的诊断要求选择合适的肺炎支原体抗体IgM检测方法。 王利君 袁梁关键词:肺炎支原体 抗体 ELISA 间接免疫荧光 应用锁定核酸水解探针实时荧光定量PCR检测烟曲霉 2011年 目的建立检测烟曲霉的锁定核酸(LNA)水解探针实时荧光定量PCR(qPCR)方法。方法实验菌株来自北京同仁医院临床分离曲霉菌株,均通过形态学和DNA测序方法鉴定到种。实验组:烟曲霉48株;对照组:黄曲霉55株、杂色曲霉16株、构巢曲霉10株、聚多曲霉5株、寄生曲霉1株;临床标本组:已经纯培养出烟曲霉的冻存临床标本,鼻窦炎鼻窦组织标本20份、肺泡灌洗液1份。提取标本的DNA,LNA水解探针qPCR检测烟曲霉特异性p-微管蛋白基因,评价此方法的分析特异性、扩增效率、线性动态范围和检测限。结果烟曲霉特异性p-微管蛋白基因LNA水解探针qPCR检测烟曲霉方法的分析特异性为100%,扩增效率为98.2%,线性动态范围6个数量级,检测限2.5Pg。结论烟曲霉特异性β-微管蛋白基因LNA水解探针qPCR法能快速、准确地检测烟曲霉,而且此方法易操作、经济实惠.应用前景广阔。 王利君 朱敏 曹晶晶 顾海彤 鲁辛辛关键词:曲霉 核酸探针 聚合酶链反应 分离自一家医院真菌性鼻窦炎标本曲霉菌的准确鉴定和抗真菌药物敏感性分布 朱敏 王玫 王利君 黄艳飞 鲁辛辛呼吸重症监护病房和外科重症监护病房目标病原菌主动筛查和环境监测研究 目的早期发现病原,了解重症监护病房病原菌分布,为医院感染防控提供实验室依据。方法 2010年12月至2011年10月对首都医科大学附属北京同仁医院呼吸重症监护病房(RICU)和外科重症监护病房(SICU)进行靶向主动筛查... 隋文君 王海立 王玫 王利君 鲁辛辛