王天文
- 作品数:15 被引量:1H指数:1
- 供职机构:华东理工大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学经济管理更多>>
- 一种ssDNA-蛋白质酶法交联方法
- 本发明公开一种ssDNA-蛋白质酶法交联方法,包括以下步骤:(1)制备proA*与目标蛋白的融合蛋白,proA*来源于噬菌体ΦX174;(2)融合蛋白与ssDNA交联,ssDNA含有识别和结合序列。利用proA*可以识别...
- 王天文马兴元马飞王平
- 文献传递
- 大肠杆菌热敏毒素B亚单位的真核表达方法
- 本发明涉及一种大肠杆菌热敏毒素B亚单位(E.coli heat-labile enterotoxin B subunit,LT-B)的真核表达方法,其主要步骤是:首先将LT-B的核酸序列(如SEQ ID NO:1所示)通...
- 魏东芝马兴元郑文云王天文罗晨马昱澍
- 文献传递
- 利用类弹性蛋白可逆相变和内含肽自切割功能高效制备TmSm抗肿瘤蛋白
- 2013年
- 目标蛋白TmSm是研发出的一种能够较强抑制肿瘤细胞生长和促进其凋亡的基因工程抗肿瘤蛋白,其由介导目的蛋白进入细胞的转导肽HIV-TAT突变体(Tm)和Survivin突变体(Sm)融合而成。原先的TmSm制备工艺以包涵体表达、变性和复性为主,其过程不仅复杂、收率低成本高,而且所得蛋白活性较低。通过将TmSm基因与编码类弹性蛋白(elastin-like polypeptides,ELPs)和内含肽(intein)的标签序列(EI)进行融合,利用ELPs的可逆相变特性和intein的自切割功能,经简单的温度及pH调控,获得了纯度为99.00%的TmSm蛋白。将纯化后的蛋白作用于肺癌细胞A549,24 h后MTT结果显示,63.21μg/ml的目的蛋白对A549的抑制率为57.83%;流式细胞仪检测结果表明,当TmSm浓度为40μg/ml时,24 h后细胞凋亡率为41.72%。因此,这种新型的以类弹性蛋白和内含肽介导的表达纯化技术不仅成本低廉,而且对抗肿瘤蛋白药物的质量提高具有重要应用价值。
- 石磊唐莉莉马兴元王天文马飞王平
- 关键词:内含肽肺癌细胞A549
- 流感疫苗最新研究进展
- 本文主要就目前最新流感疫苗,主要就流感通用疫苗、病毒纳米粒子疫苗进行阐释,同时也对具有重要应用前景的DNA疫苗和mRNA疫苗研究也作一综述,为人们研究相关的新型疫苗奠定基础。
- 张旭凡王平王天文马兴元
- 关键词:流行性感冒疫苗药理作用疗效评价
- 文献传递
- 来自LT亚基的细胞穿膜肽LTA2作为细胞内药物运输载体的应用
- 本发明公开来自LT亚基的细胞穿膜肽LTA<Sub>2</Sub>作为细胞内药物运输载体的应用,所述LTA<Sub>2</Sub>的序列如SEQ ID NO:1所示。以及提供一种融合蛋白药物的制备方法,所述融合蛋白由LTA...
- 马兴元刘地郑文云张娜王天文王平
- 文献传递
- 一种用于原核分泌、融合表达大肠杆菌热敏毒素B亚单位的载体
- 本发明涉及一种用于原核分泌、融合表达大肠杆菌热敏毒素B亚单位(Ecoli heat-labileenterotoxin B subunit,LT-B)的载体,其是一个以pET32a为基础骨架的闭环质粒,在pET32a的R...
- 魏东芝马兴元王天文郑文云
- 文献传递
- 由乙肝病毒核心蛋白(HBc-VLP)递载的流感通用疫苗Flu@uV设计构建、表征及初步活性研究被引量:1
- 2016年
- 目的:构建以HBc为载体的甲型流感病毒HA和M2e流感通用疫苗(Flu@u V),利用大肠杆菌BL21(DE3)表达系统,进行初步的蛋白表达及纯化。在此基础上,构建DNA流感通用疫苗。方法:利用全基因合成的序列为模板,成功构建HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc、3M2e-HBc和3HA-3M2e-HBc基因的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE、Western blot和电镜检测其表达。将纯化的蛋白与弗氏佐剂共同免疫小鼠,取小鼠外周血进行流式细胞分析。通过荧光分析和Western blot初步验证DNA流感通用疫苗在人源胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达情况。结果:成功表达纯化了HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc和3M2e-HBc四种蛋白,经电镜观察到30nm左右的蛋白纳米颗粒样结构。小鼠外周血流式细胞分析显示HBc和3M2e-HBc可以增加小鼠的免疫力,而HA-M2e-HBc和M2e-HBc对小鼠免疫力的提高没有影响。通过荧光检测和Western blot检测说明DNA流感通用疫苗在真核细胞中成功表达。结论:成功构建HBc与甲型流感病毒HA和M2e的病毒样颗粒,为流感通用疫苗的研制奠定了重要基础。
- 张旭凡胡发彪马兴元王天文王平王晓丽
- 关键词:免疫活性
- 可在细胞内起作用的抗体——纳米抗体(Nanobody)
- 传统抗体类药物有诸多优势,在治疗和诊断等方面发挥了相当重要的作用。但是随着实际应用的需求,使其面临多方面的新挑战,除了其开发周期长,生产成本高外,其自身分子良较大,不稳定易降解,注射给药成为唯一途径,同时由于很多情况下需...
- 马兴元张娜王平王天文
- 文献传递
- 来自LT亚基的细胞穿膜肽LTA2作为细胞内药物运输载体的应用
- 本发明公开来自LT亚基的细胞穿膜肽LTA<Sub>2</Sub>作为细胞内药物运输载体的应用,所述LTA<Sub>2</Sub>的序列如SEQ ID NO:1所示。以及提供一种融合蛋白药物的制备方法,所述融合蛋白由LTA...
- 马兴元刘地郑文云张娜王天文王平
- 文献传递
- 可在细胞内起作用的抗体--纳米抗体(Nanobody)
- 传统抗体类药物有诸多优势,在治疗和诊断等方面发挥了相当重要的作用.但是随着实际应用的需求,使其面临多方面的新挑战,除了其开发周期长,生产成本高外,其自身分子良较大,不稳定易降解,注射给药成为唯一途径,同时由于很多情况下需...
- 马兴元张娜王平王天文
- 关键词:药理作用
- 文献传递