郑文云
- 作品数：56 被引量：12H指数：2
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 一种survivin及其突变体转基因酵母系统及其应用
- 本发明公开一种耐凋亡或促凋亡转基因酵母系统，所转基因为survivin基因或survivin第34位突变体，所用载体为组成型质粒pGAPZA或者诱导型质粒pPICZA。本发明提供的转基因酵母具有与原来不同的生长特性与用途...
- 马兴元刘琨李林凤姚碧郑文云
- 文献传递
- QSOX及其突变体蛋白及制备方法和应用
- 本发明通过RT－PCR方法获得QSOX蛋白的全长编码区cDNA序列，并进行定点突变，然后将野生型和突变体基因分别构建入原核表达载体的pET系列、pGEX系列和pTYB系列载体和酵母表达的系列载体中，转化大肠杆菌和酵母进行...
- 杨弋郑文云尹琴徐磊
- 文献传递
- 生产抗癌药物TAT(m)－Survivin(T34A)的工程菌的发酵放大工艺
- 本发明提供了生产抗癌药物TAT(m)－Survivin(T34A)的工程菌的发酵放大工艺，该工艺包括以下步骤：A)将种子液接种于发酵液中发酵，温度35－38℃，pH6.5－7.5，通气量2－5ml/min，生长期溶解氧浓...
- 魏东芝马兴元张海毅姚雪凌王恒伟李明华郑文云赵莉刘清海
- 文献传递
- 靶向TNF-α的人源化纳米抗体及其制备和用途
- 本发明提供一种靶向TNF‑α的人源化纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:5任一所示。通过设计构建了新型的人源化纳米抗体的噬菌体库，利用固相筛选法获得了抗TNF‑α的人源化纳米抗体基因序列。...
- 马兴元聂绩凡郑文云张佩文
- 文献传递
- 一种多抗原流感通用疫苗及其制备方法
- 本发明公开一种多抗原流感通用疫苗及其制备方法，选取甲型流感病毒保守抗原表位M2e和HA2，乙型肝炎病毒外壳蛋白HBc作为抗原表位载体，将抗原表位M2e和HA2以不同的串联组合方式展示在乙型肝炎病毒外壳蛋白HBc的外表面。...
- 马兴元胡发彪张旭凡张川王平郑文云王宜冰
- 文献传递
- 一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原的设计及其稳定表达细胞株HEK-293
- 本发明先利用CVS株狂犬病病毒RABV的糖蛋白RVGP和基质蛋白RVMP自组装成的RVLPs为抗原，设计一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原；然后将RVGP、RVMP和EGFP共同构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中，命...
- 马兴元赵章婷郑文云邓昌平
- 文献传递
- 一种疫苗黏膜免疫佐剂分子的制备方法
- 本发明公开一种疫苗黏膜免疫佐剂分子的制备方法，主要运用将不同亚基或全蛋白质分别构建于不同的表达框以调节多亚基蛋白LT、突变体及其亚基的表达量，以克服多亚基复杂蛋白对其整体进行基因表达效能降低的问题，从而促进疫苗黏膜免疫佐...
- 马兴元姚碧郑文云刘琨
- 文献传递
- 亚细胞结构的氧化还原势梯度
- ＜正＞近十几年来,氧化还原信号转导成为了国际研究热点之一。活性氧分子在信号转导中的重要作用逐步得到了揭示,而其作用大多是通过改变受体、酶、转录因子等蛋白质
- 赵玉政杨毅郑文云杨弋
- 关键词：亚细胞结构巯基修饰
- 文献传递
- 一种肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂
- 本发明公开一种肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂及其应用，所述蛋白增敏剂包括Survivin突变体蛋白，通过基因工程制备，与survivin具有90%的同源性，包括20位、34位、84位、117位位点单点突变、多点突变、组合突变，...
- 马兴元许玉馨郑文云朱玲
- 重组HIV-TATm-Survivin(T34A)蛋白制备及其促癌细胞凋亡活性研究被引量：3
- 2006年
- 从人乳腺癌细胞系B-Cap-37中克隆出Survivin的cDNA,并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后,经一系列基因操作方法将天然HIV-TAT转导肽的突变体基因HIV-TATm引入Survivin(T34A)基因的5′端,正确构建了表达载体pRSET-B-HIV-TATm-Survivin(T34A),经转化E.coliBL21(DE3)后诱导表达,目的蛋白质以包涵体形式表达,占菌体总蛋白的45%。经3.7L发酵罐分批发酵可收获650mg/L的包涵体,经阳离子交换、凝胶层析分离和柱上复性与透析,得到纯度达96%以上的可溶性目的蛋白HIV-TATm-Survivin(T34A)。目的蛋白对人乳腺癌细胞B-Cap-37、人胰腺癌细胞SW1990和人肝癌细胞SSMC-7721作用4h后有在细胞形态上呈现出显著的凋亡特征,而对人宫颈癌细胞系Hela不敏感,对正常的人内皮细胞系EVC-304未见明显影响。作用24h时MTT法检测显示,120μg/mL目的蛋白对SW1990、B-Cap-37、SSMC-7721和Hela细胞的抑制率分别达到89%、63%、59.5%和39%,且具有剂量依赖性。对最为敏感的SW1990和B-Cap-37以每孔60μg/mL终浓度的目的蛋白作用48h的流式细胞技术检测发现,凋亡率分别为25.6%和19.3%,与对照相比,实验组细胞出现明显的凋亡峰,细胞周期的分布发生明显的变化,65%以上的癌细胞被阻滞于G1期。体外实验结果显示重组目的蛋白具有较强的抑制癌细胞增殖和促进凋亡作用,预示着良好的抗癌前景。
- 郑文云马兴元魏东芝王锦之刘清海马昱澍杨胜利
- 关键词：表达纯化
