王翔 作品数:6 被引量:14 H指数:2 供职机构: 北京金迪克生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
一种检测RNA病毒hMPV的方法、试剂盒及应用 本发明涉及一种检测RNA病毒hMPV的方法及试剂盒,具体讲涉及一种利用逆转录等温扩增技术检测RNA病毒hMPV的方法及试剂盒。该检测方法为:根据人偏肺病毒的N基因的相对保守区,分别设计了六条引物,包括两条外引物F3、B3... 郑丽舒 王翔 侯云德文献传递 人博卡病毒TaqMan探针实时定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:1 2010年 目的:建立人博卡病毒(HBoV)核酸特异、快速、敏感的TaqMan探针实时定量PCR检测方法,并对临床样本进行检测。方法:比对编码HBoV非结构蛋白NP-1的基因序列,选取其保守片段设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法,并与传统PCR方法进行比较,然后分别对两者的灵敏性、特异性、稳定性及临床样本检验的适用性等进行评价。结果:所建立的实时定量PCR检测方法可用于HBoV的特异性检测;相对于传统PCR所达到的250拷贝/反应的检测灵敏度,实时定量PCR的检测灵敏度可高达10拷贝/反应,检测范围为109~101拷贝/反应,且具有良好的特异性和重复性;初步用于76份临床呼吸道标本检测,检出阳性5例,高于普通PCR方法(3/76)。结论:建立了HBoV TaqMan探针实时定量PCR检测方法,并可用于临床鼻咽拭子样本的检测,为开展HBoV流行病学监测及早期临床诊断提供了技术手段。 薛鹏浩 张淼涛 张骞 张钫 袁武梅 麻粉莲 王翔 郑丽舒关键词:人博卡病毒 TAQMAN探针 实时定量PCR 甲型H1N1流感病毒HA基因RT-LAMP检测方法的建立与初步应用 被引量:9 2011年 目的:建立反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)检测甲型H1N1流感病毒HA基因的方法,并用于检测临床样本。方法:通过在线软件Primer Explorer V4设计H1N1 HA基因的RT-LAMP引物,建立RT-LAMP检测方法,并评价其灵敏度和特异度。结果:与传统RT-PCR方法相比,RT-LAMP检测方法具备更高的灵敏度,达到10个拷贝,并且具有良好的特异性;在76份呼吸道感染儿童的咽拭子标本中检测到2份阳性,与RT-PCR方法检测结果相同。结论:建立的H1N1 RT-LAMP检测方法灵敏特异,简单快速,具备H1N1现场检测应用前景。 王翔 张骞 张钫 袁武梅 麻粉莲 薛鹏浩 赵智慧 郑文芝 郑丽舒关键词:甲型H1N1流感病毒 RT-PCR RT-LAMP 人博卡病毒LAMP检测方法的建立及初步应用 被引量:4 2010年 目的 建立环介导等温扩增技术(LAMP)检测人博卡病毒(Human bocavirus,HBoV)基因的方法,并用于检测临床样本.方法 通过在线软件设计工具Ptimer Explorer V4设计HBoV NP-1基因的LAMP引物,建立LAMP检测方法,并评价其灵敏度和特异度.结果 与传统PCR方法相比,LAMP法检测灵敏度更高,可达到10拷贝,特异性较强;在76份呼吸道感染儿童的咽拭子标本中检测到5份阳性.结论 建立HBoV LAMP检测方法灵敏特异,简单快速,有望进行临床检测HBoV. 王翔 许信刚 张骞 张钫 袁武梅 麻粉莲 薛鹏浩 郑丽舒关键词:基因 核酸扩增技术 呼吸道合胞病毒TaqMan探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:1 2012年 目的:建立呼吸道合胞病毒(RSV)核酸特异、快速、敏感的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对临床样本进行检测。方法:比对编码RSV非编码蛋白的基因序列,选取其保守片段设计引物和探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,并与传统RT-PCR方法进行比较,分别对两者的灵敏性、特异性、重复性及临床样本检验的适用性进行评价。结果:所建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于RSV的特异性检测。相对于传统RT-PCR方法100拷贝,反应的检测灵敏度,实时荧光定量RT-PCR的检测灵敏度达到10拷贝/反应,检测范围为1010-101拷贝/反应,且具有良好的特异性和重复性。从169份临床呼吸道标本中检出RSV阳性40例,高于普通PCR方法(31/169)。结论:建立了RSV的TaqMan探针实时定量PCR检测方法,并可用于临床鼻咽拭子样本的检测,在临床上具有较好的应用前景。 郑文芝 张骞 魏建民 薛鹏浩 王翔 赵智慧 郑丽舒关键词:呼吸道合胞病毒 TAQMAN探针 实时定量RT-PCR 一种检测RNA病毒hMPV的方法、试剂盒及应用 本发明涉及一种检测RNA病毒hMPV的方法及试剂盒,具体讲涉及一种利用逆转录等温扩增技术检测RNA病毒hMPV的方法及试剂盒。该检测方法为:根据人偏肺病毒的N基因的相对保守区,分别设计了六条引物,包括两条外引物F3、B3... 郑丽舒 王翔 侯云德文献传递