伍宁
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅重点项目湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 梅毒螺旋体Tp0821基因的克隆、表达、纯化及免疫活性研究被引量：5
- 2010年
- 目的 构建梅毒螺旋体（Tp）膜脂蛋白Tp0821的重组质粒,表达、纯化其相应蛋白,研究其免疫活性.方法 构建重组质粒pQE32/Tp082l,诱导表达其相应蛋白,以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体并测定其效价.建立间接ELISA法,检测80份梅毒参比血清、临床经FTA-ABS确诊的阳性血清各150份.结果 成功构建重组质粒pQE32/Tp0821,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析重组蛋白分子量与预期结果相符.将亲和层析后所获高纯度重组蛋白免疫新西兰兔,制备的多克隆抗体效价达1：6400.间接ELISA法检测梅毒参比血清、临床梅毒患者血清,与间接免疫荧光螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）法比较,其灵敏度、特异度分别为92.6%和98.6%,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 Tp0821重组蛋白具有较好的免疫活性,可用于梅毒血清学检测.
- 伍宁肖勇健顾伟鸣刘双全赵飞骏张跃军吴移谋
- 关键词：重组蛋白质类免疫活性梅毒
- 梅毒螺旋体Tp0319重组蛋白的表达、纯化及其在临床诊断中的初步应用被引量：2
- 2009年
- 目的克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值。方法构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体。结果成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%。结论制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断。
- 肖勇健伍宁刘双全赵飞俊吴移谋
- 关键词：梅毒螺旋体重组蛋白血清学试验间接ELISA
- 生殖支原体脂质相关膜蛋白经Toll样受体2激活NF-κB被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨生殖支原体（Mg）脂质相关膜蛋白（LAMPs）能否经Toll样受体2（TLR2）激活核转录因子κB（NF-κB）.方法 提取MgLAMPs刺激THP-1细胞,ELISA检测NF-κBp65活化水平,RT-PCR检测THP-1细胞TLR2 mRNA的表达,随后ELISA检测TLR2中和抗体对LAMPs激活NF-κBp65的影响,最后用LAMPs刺激瞬时共转染pFLAG-TLR2、pNF-κB-luc、pRL-TK的293T细胞,双荧光素酶报告基因分析TLR2在LAMPs激活NF-κB中的作用.结果 LAMPs能诱导THP-1细胞激活NF-κBp65,并且与LAMPs浓度呈明显的剂量依赖性,当LAMPs为4.0μg/ml时NF-κBp65活化程度最高;LAMPs能上调THP-1细胞TLR2 mRNA的表达;TLR2中和抗体能使LAMPs激活NF-κBp65的活化程度降低60%;共转染pFLAG-TLR2浓度的增加,NF-κB的活化程度明显增加,并且与TLR2的转染量呈剂量依赖性.结论 Mg LAMPs能经TLR2激活NF-κB,TLR2介导的激活在LAMPs发挥致病性过程起着重要作用.
- 何军游晓星曾焱华伍宁吴移谋
- 关键词：生殖支原体脂质相关膜蛋白TOLL样受体2核转录因子ΚB
- 梅毒螺旋体部分膜蛋白的研究现状被引量：2
- 2009年
- 梅毒螺旋体(Tp)目前尚不能体外培养,抗原获取困难,从而影响到Tp致病机制、实验室诊断方法及疫苗的研究。随着分子生物学技术的发展和Tp全基因序列的解析、多种重组Tp膜蛋白的成功表达及其结构功能的日益明确,为Tp发病机理的研究、诊断方法的更新和疫苗的研制奠定了良好的基础。
- 伍宁刘双全吴移谋
- 关键词：梅毒螺旋体膜蛋白疫苗
