房超
- 作品数:5 被引量:37H指数:4
- 供职机构:安徽农业大学茶与食品科技学院茶叶生物化学与生物技术教育部农业部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 茶树脱水素基因dhn2的原核表达和体外功能鉴定
- 脱水素最早发现于20世纪80年代,它是植物中的一类胚胎发育后期丰富蛋白/(late embryogenesis abundant proteins, LEA蛋白/),属于LEAD-Ⅱ家族,分子量从9到200KD不等。近年...
- 房超
- 关键词:茶树脱水素定量PCR原核表达
- 文献传递
- 茶树α-tubulin基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量:4
- 2009年
- 根据茶树α-微管蛋白(α-tubulin)的mRNA全长序列(GenBank登录号DQ340766)设计引物,以RT-PCR方法扩增茶树α-tubulin基因,将扩增产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,并转化至大肠杆菌BL21trxB(DE3)中,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后以包涵体形式表达。以纯化后的α-tubulin融合蛋白制备兔多克隆抗体,用Westernblot方法检测抗体特异性。结果显示α-tubulin蛋白以包涵体形式大量表达,以融合蛋白制备的抗体对茶树体内的α-tubulin具有良好的特异性。
- 谭振童鑫房超江昌俊陈聪
- 关键词:茶树原核表达多克隆抗体
- 茶树脱水素基因dhn2原核表达条件优化被引量:2
- 2011年
- 为了提高可溶性脱水素dhn2重组蛋白在大肠杆菌的表达量,研究了不同诱导条件对其表达的影响,包括诱导时间,诱导温度,IPTG浓度和初始诱导浓度。结果表明:重组表达载体pEASY-E1-dhn2在大肠杆菌中最佳诱导时间为4h,最佳诱导温度为30℃,最佳IPTG诱导浓度为0.8mmol/L,最佳诱导初始浓度为OD600=0.2。
- 房超李叶云常欣丁菲江昌俊
- 关键词:茶树脱水素
- 茶树冷诱导基因的AFLP筛选及其表达分析被引量:11
- 2011年
- 以中小叶茶树良种舒茶早和云南大叶种73-11为材料,于4℃低温处理4 d后,采用AFLP技术筛选出冷诱导下茶树差异表达基因并进行分析.结果显示,实验共获得41个差异片段(TDFs),其中舒茶早产生19条差异条带,73-11产生38条差异条带,两品种共有条带16条.所获得的差异片段按功能可划分为4类,即信号传导蛋白、转录因子、基础代谢相关蛋白、抗逆蛋白质,此外还有一些假设蛋白质以及未知蛋白.利用qRT-PCR对Kh1、Kh3和Kh11差异片段进行验证,结果显示这3个片段均被低温诱导,表达量上升.研究表明,茶树在低温胁迫下的逆境反应非常复杂,涉及多种代谢过程中的众多基因,而且大叶种比中小叶种对低温反应更为敏感.
- 陈林波李叶云房超朱政江昌俊
- 关键词:茶树CDNA-AFLPQRT-PCR
- 茶树抗逆相关基因ERF的克隆与表达特性分析被引量:20
- 2011年
- 对利用cDNA-AFLP技术所获得的茶树低温诱导差异表达片段TDF,通过RACE方法获得含完整编码区序列的茶树ERF基因cDNA克隆,其开放阅读框编码212个氨基酸,包含一个保守的结构域AP2/ERF,与多种植物ERF蛋白具有高度同源性。qRT-PCR分析表明,茶树ERF基因受低温、乙烯、脱水、NaCl等上调表达,最大表达量分别是诱导前的121.1、22.6、2.6和2.2倍。在不同组织器官中,茶树ERF基因在转录水平上存在显著差异,成熟叶片中表达最高,其次是芽,而根和茎中表达量较低且相当,花和种子中表达极低。推测该基因在茶树响应非生物胁迫中发挥重要作用以及在组织中的表达受到严格控制。
- 陈林波房超王郁李叶云江昌俊梁名志
- 关键词:茶树基因克隆QRT-PCR