段小宇
- 作品数：11 被引量：53H指数：3
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。
- 崔丽瑾王兴龙梅英武任林柱闫广谋张辉郎需龙段小宇路浩
- 关键词：口蹄疫病毒绿色荧光蛋白
- 口蹄疫病毒WFL株基因组全长cDNA的克隆及序列分析被引量：3
- 2007年
- 根据口蹄疫病毒基因组的结构特点以及GenBank上公布的全序列,用DNAMAN分别设计了涵盖整个基因组序列的3对引物,从接种口蹄疫病毒WFL株的细胞培养液中提取了病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法和RACE法分别扩增了3条基因片段,并将扩增片段分别与T载体连接,在体外分别进行了5'半分子和3'半分子的构建。最后将5'半分子和3'半分子连接成基因组全长cDNA分子。经PCR鉴定、酶切鉴定及全长cDNA测序,证实成功构建了口蹄疫病毒WFL株基因组全长cDNA分子。序列分析结果表明,供试口蹄疫病毒基因组全长为8155nt,5'UTR长1059nt;具有一个大的读码框,其核苷酸长度为6969nt,包括201aa的前导蛋白基因和2122aa的聚合蛋白基因;3'UTR长127nt,包括34nt的poly(A)。
- 任林柱王兴龙李莉李晓艳段小宇梅英武刘锴王学理
- 关键词：口蹄疫病毒基因组全长CDNA
- 新城疫病毒TL1株M基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2007年
- 采用RT-PCR方法扩增了新城疫病毒（NDV）TL1株M基因，将扩增产物提纯后克隆入pGEM-Teasy载体，通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。测序拼接得出M基因的序列长度为1232bp，该基因的ORF总长为1095bp，编码364个氨基酸。与GenBank下载的15株参考毒株M基因比较，核苷酸同源性为85．2％～98．1％，编码的氨基酸同源性为85．8％～98．9％。NDVTL1产生M蛋白分子中有7对碱性氨基酸，5个保守的Cys残基，与鹅源新城疫SF02株、ZJ1株具有类似的特征。这些结果为揭示NDVTL1株的分子生物学背景，阐明NDV种间传播机制奠定了基础。
- 王学理王兴龙李晓艳刘锴任林柱崔丽瑾闫广谋段小宇
- 关键词：新城疫病毒M基因
- 树突状细胞肿瘤疫苗的研究进展被引量：3
- 2007年
- 树突状细胞(DC)是目前发现的抗原提呈功能最强的专职抗原提呈细胞。大量实验已证明DC疫苗在抗肿瘤免疫中发挥着重要的作用。随着分子生物学、免疫学、基因工程技术的发展,各种DC疫苗和DC细胞的治疗应运而生,发展迅速。简要综述了DC的生物学特性、DC与肿瘤发生发展的关系、DC抗原的负载方法及其在临床实验中的应用,以为进一步的基础研究和临床实验提供参考。
- 高建勇王兴龙闫广谋段小宇马云志
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫治疗
- 布鲁氏菌分子标记疫苗株的构建及鉴别诊断方法的建立
- 布鲁氏菌P39胞质结合蛋白是一种很好的的T细胞抗原,能诱发强烈的迟发性超敏反应,并产生大量的INF-γ,因此它是公认的DNA疫苗候选分子。纯化的重组P39对于动物布病的血清学诊断是一个优良的抗原。将P39蛋白改造后的菌株...
- 段小宇
- 关键词：同源重组
- 文献传递
- 新城疫病毒TL1株NP基因的遗传变异研究被引量：2
- 2007年
- 目的分析新城疫病毒TL1株NP基因部分序列,并与代表性毒株进行比较。方法根据GenBank登陆的新城疫病毒NP基因序列,设计了1对引物,用RT-PCR技术对新城疫病毒内蒙古分离株TL1的NP基因进行整体扩增。将扩增产物提纯后克隆入pGEM-T easy载体,通过酶切、PCR和测序进行验证。结果测序拼接得出NP基因的序列长度为1 528 bp,该基因的ORF总长为1 470 bp,编码489个氨基酸。与GenBank下载的14株参考毒株比较NP基因编码区全核苷酸序列和氨基酸序列,发现TL1株与鹅源新城疫NA-1株核苷酸的同源性为99.5%,氨基酸的同源性为99.0%;与鹅源新城疫ZJ1株核苷酸的同源性为97.6%,氨基酸的同源性为99.2%,而与传统疫苗株LaSota核苷酸的同源性为85.7%,氨基酸的同源性91.6%。结论TL1株与鹅源新城疫NA-1株、ZJ1株的同源性极高,它们三者亲缘关系较近,同属于基因Ⅶ型新城疫病毒,该毒株相对于经典的NDV在NP基因上已发生了较大的变异。
- 王学理王兴龙李晓艳任林柱张辉段小宇
- 关键词：新城疫病毒NP基因
- 口蹄疫病毒WFL株基因组全长cDNA的克隆及序列分析
- 根据口蹄疫病毒(FMDV)基因组的结构特点以及Genebank上公布的FMDV全序列,用DNAMAN分别设计了涵盖整个基因组序列的3对引物,从接种口蹄疫病毒WFL株的细胞培养液中提取了病毒基因组RNA,采用RT-PCR方...
- 王兴龙任林柱段小宇李晓艳
- 关键词：口蹄疫病毒基因组全长CDNA
- 文献传递
- 干扰素的研究进展被引量：15
- 2007年
- 干扰素是一类多功能细胞因子,是由哺乳动物体细胞合成与分泌的潜在的生物活性蛋白质,具有抵抗病毒感染、抑制肿瘤细胞生长与调节机体免疫功能的作用.概述了干扰素的性质、分类、生物学活性、基因结构、基因工程研究及安全性等问题.
- 武迎红王学理段小宇李向阳李艳红孙晓萍王威吕彦华
- 关键词：干扰素生物学活性安全性
- 淫羊藿苷对大鼠腺垂体细胞合成分泌GTH的影响被引量：19
- 2007年
- 通过腺垂体细胞的原代培养技术和半定量RT-PCR技术观察淫羊藿苷对大鼠腺垂体合成分泌GTH的影响。建立了腺垂体细胞总RNA的提取、FSH和LH特异基因的PCR扩增的体系和条件,并以β-actin为内参照与FSH和LH特异基因进行多重比较。结果淫羊藿苷能提高大鼠腺垂体细胞中GTHmRNA的水平,但并非与剂量呈线形关系,中剂量组(60μl/l)时大鼠腺垂体细胞中GTHmRNA的水平最高,与低剂量组(30μl/l)和高剂量组(100μl/l)差异显著。表明淫羊藿苷不但能通过直接作用与性腺来发挥“壮阳”的作用,而且其对垂体细胞也有刺激作用。
- 张森于海峰李晓艳张贺李波王新段小宇韦旭斌谭建华
- 关键词：淫羊藿苷
- 传染性法氏囊病病毒疫苗株B87基因组A节段的克隆和序列分析被引量：2
- 2007年
- 目的 获得传染性法氏囊病病毒疫苗株B87 A节段全长cDNA,并对其进行序列分析.方法 使用蛋白酶K、酚/氯仿抽提法提取病毒基因组,用LiCl分级沉淀方法纯化病毒基因组dsRNA,通过RT-PCR一步扩增获得A节段的全长cDNA.将其克隆至pGEM-T载体上,测序,并用DNAStar软件进行序列分析.结果 测序结果表明,克隆的B87株A节段全长为3 260 bp,与Gt株的同源性最高为99.5%,与其他毒株的核苷酸同源性介于95.2%～99.4%之间,与Ⅱ型毒株OH仅为84.0%.结论 通过对20株IBDV编码氨基酸序列的分析、比较,推测A片段上7个独特的氨基酸位点可能与毒力相关.
- 刘锴王兴龙王学理任林柱闫广谋段小宇
- 关键词：传染性法氏囊病病毒全长CDNA克隆
