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王战争
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
供职机构:
河南大学医学院细胞与分子免疫学实验室
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
田文志
河南大学医学院细胞与分子免疫学...
吴素霞
河南大学医学院细胞与分子免疫学...
柴立辉
河南大学医学院细胞与分子免疫学...
刘广超
河南大学医学院细胞与分子免疫学...
马远方
河南大学医学院细胞与分子免疫学...
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河南大学
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王战争
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马远方
1篇
刘广超
1篇
柴立辉
1篇
吴素霞
1篇
田文志
传媒
1篇
中国免疫学杂...
年份
1篇
2014
1篇
2012
共
2
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破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备
被引量:1
2014年
目的:为了获得真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和OCILRP2特异性抗体,用于OCILRP2生物学功能的进一步研究。方法:构建了融合人IgG Fc段的小鼠OCILRP2真核表达载体pIg-CD5-OCILRP2,将pIg-CD5-OCILRP2转染CHO细胞,G418筛选稳定表达细胞株;Protein A亲和层析从CHO细胞培养上清中纯化重组蛋白OCILRP2-Fc并免疫家兔制备OCILRP2多克隆抗体。ELISA检测抗血清和多克隆抗体的效价,Western blot验证多克隆抗体的特异性,并应用该抗体检测OCILRP2在树突状细胞(Dendritic cells,DC)中的表达。结果:ELISA结果表明OCILRP2-Fc稳定表达细胞株经过多次传代培养后仍然具有较高的蛋白表达水平;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示纯化后的蛋白只有单一条带出现,且该条带可以被抗人IgG检测到;重组蛋白OCILRP2-Fc免疫家兔获得的抗血清和纯化后得到的OCILRP2多克隆抗体效价分别为1∶1 280 000和1∶320 000,Western blot证明该抗体可以和免疫原OCILRP2-Fc及NIH/3T3细胞中表达的OCILRP2特异性结合。应用该抗体检测OCILRP2在DC的表达发现OCILRP2在成熟DC的表达明显高于不成熟DC。结论:获得了真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和高效价的OCILRP2特异性抗体,为进一步研究OCILRP2在免疫应答中的功能奠定了基础。
吴素霞
柴立辉
王战争
刘广超
田文志
马远方
关键词:
真核表达
多克隆抗体
树突状细胞
CHO细胞表达的重组OCILRP2蛋白的研制
背景 C型凝集素样受体如NKG2D和CD94/NKG2由于它们共刺激T细胞增殖和细胞因子分泌的能力而被认为是一种新的T细胞刺激分子。C型凝集素家族具有独特的糖基识别结构域(cysteine rich domain,...
王战争
关键词:
特异性结合
生物学活性
CHO细胞
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