蒋华
- 作品数:6 被引量:32H指数:3
- 供职机构:山东大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 弓形虫主要表面抗原p30单价及复合基因疫苗的构建被引量:12
- 2005年
- 目的 构建弓形虫单价基因疫苗 pcDNA3 1 p3 0及复合基因疫苗 pcDNA3 1 p3 0 ROP2 ,并比较两种疫苗对小鼠的免疫保护性。 方法 用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株基因组DNA中分别扩增编码弓形虫主要表面抗原 p3 0和弓形虫棒状体蛋白 2 (ROP2 )的基因片段 ,经T A克隆 ,将p3 0单价基因及 p3 0 ROP2复合基因片段分别插入真核细胞表达载体pcDNA3 1,构建重组真核表达质粒 pcDNA3 1 p3 0及pcDNA3 1 p3 0 ROP2。分别免疫BALB/c小鼠 ,设磷酸缓冲盐溶液 (PBS)组、pcDNA3 1空质粒组为对照 ;酶联免疫吸附测定 (ELISA)检测血清特异性IgG抗体 ;弓形虫速殖子腹腔攻击感染观察小鼠生存时间。 结果 获得 pcDNA3 1 p3 0、pcDNA3 1 p3 0 ROP2重组表达质粒 ,用 pcDNA3 1 p3 0 ROP2免疫的小鼠 ,其IgG抗体吸光度 (A490 =2 0 5 1± 0 3 3 7)高于用 pcDNA3 1 p3 0的吸光度 (A490 =1 892± 0 3 69) (P <0 0 5 )。攻击感染弓形虫后小鼠生存时间 ,用 pcDNA3 1 p3 0 ROP2免疫的小鼠 ,较用 pcDNA3 1 p3 0的明显延长 (P <0 0 1)。 结论 弓形虫不同生活阶段的抗原复合基因疫苗较单价基因疫苗具有更好的免疫保护性。
- 杨婷婷何深一蒋华古钦民丛华周怀瑜张加勤李瑛赵群力
- 关键词:PCDNA3弓形虫基因疫苗真核细胞表达载体
- 弓形虫复合抗原基因P30-ROP2体外扩增、克隆及真核表达重组质粒的构建被引量:5
- 2005年
- 目的 构建弓形虫RH株 pcDNA3.1 P30 ROP2 真核表达重组质粒,为进一步表达及 DNA疫苗的研制作准备。 方法 用PCR技术从弓形虫RH分离株的基因组DNA中扩增编码 P30基因片段和棒状体蛋白(ROP2)的基因片段,重组入 pUC18克隆载体,然后将 pUC18 P30 ROP2中的 P30 ROP2 外源基因片段经酶切、连接等反应,亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体,再经含氨苄青霉素的LB培养基筛选、酶切及PCR鉴定。 结果 从弓形虫RH株基因组中扩增出特异的 P30、ROP2 片段,克隆成功 pUC18 P30 ROP2 重组质粒;经亚克隆、筛选鉴定获得了 pcDNA3. 1 P30 ROP2重组表达质粒。 结论 成功构建了弓形虫 pUC18 P30 ROP2重组克隆质粒,亚克隆成功 pcDNA3.1 P30 ROP2真核表达重组质粒,为下一步DNA疫苗的研究奠定了基础。
- 蒋华何深一周怀瑜丛华古钦民李瑛赵群力
- 关键词:弓形虫P30克隆
- CFH、LOC387715/ARMS2及HTRA1基因多态性与年龄相关性黄斑变性关系的研究
- 目的:探讨补体因子H、年龄相关性黄斑病变易感因子2及高温必需因子A-1等位基因、基因型的分布频率在中国北方人群湿性AMD患者组及健康对照组间的差异。研究CFH、LOC387715/ARMS2 rs10490924、HTR...
- 蒋华
- 关键词:单核苷酸多态性基因多态性黄斑变性
- 特殊类型斜视
- 本文对几种特殊类型斜视的诊断和手术治疗效果进行了论述。文章指出:Hummelsheim术式可有效的治疗先天性直肌缺如,术中注意保留直肌前睫状血管,能有效防止术后眼前节缺血综合征的发生;下斜肌延长术应用于特殊类型不对称性上...
- 蒋华
- 关键词:手术疗法
- 文献传递
- 弓形虫主要表面抗原P30及棒状体蛋白Rop2复合基因的构建及表达的研究
- 本课题根据已发表的弓形虫P30和Rop2的基因序列,自行设计合成两对引物,在引物的5'末端适当的位置分别加上合适的限制性内切酶酶切位点,采用分子生物学定向克隆的方法,在保证其开放读码框均正确的前提下,使Rop2基因可以定...
- 蒋华
- 关键词:弓形虫P30基因克隆
- 文献传递
- 弓形虫疫苗研究新进展被引量:15
- 2004年
- 弓形虫疫苗的研制对于弓形虫病的防治工作有着极其重要的意义。该文介绍了最早的弓形虫疫苗、全虫疫苗、基因工程疫苗及核酸疫苗的研究进展。
- 蒋华何深一
- 关键词:弓形虫病疫苗研究全虫核酸疫苗基因工程疫苗