钟立霖
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白乙酰化酶亚型p300调控心脏特异转录因子的动态表达被引量：8
- 2010年
- 目的:观察小鼠胚胎心脏发育过程中GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的动态表达和这些基因的启动子区域组蛋白H3乙酰化修饰状态的变化,以及组蛋白乙酰化酶亚型p300对这些基因启动子的直接调控作用,为进一步研究先天性心脏疾病的发生机制奠定基础。方法:选取胎龄(Embryoday,E)10.5d和16.5d小鼠正常胚胎心脏,用实时荧光定量PCR(RealTimePCR)的方法观察上述基因mRNA的动态表达;采用染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation,ChIP),用ChIP级抗乙酰化H3和抗p300抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用RealTimePCR扩增抗体所富集的上述基因启动子的DNA量,观察胚胎心脏发育过程中乙酰化组蛋白及组蛋白乙酰化酶亚型p300是否参与调控上述四种心脏特异转录因子的表达。结果:①胎龄E10.5d和E16.5d小鼠胚胎心脏的GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的mRNA表达水平都有明显差异(P<0.05),其中GATA4和MEF2C mRNA相对β-actin的表达水平,E10.5明显低于E16.5,而Nkx2.5和Tbx5mRNA相对表达水平,E10.5明显高于E16.5;并且ChIP结果显示这些基因启动子的乙酰化水平也随着时间而改变,但差异无统计学意义。②E10.5和E16.5胚胎小鼠心脏中,p300抗体均能免疫沉淀GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因启动子,其沉淀的基因量在这两个小鼠心脏发育的关键时间点有所不同,但差异无统计学意义。结论:小鼠胚胎心脏发育过程中,心脏发育相关基因GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5呈现动态表达,提示这些基因在心脏发育不同阶段具有重要作用。ChIP结果提示p300介导的组蛋白乙酰化修饰可能为调节这些基因动态表达的机制之一。
- 杨雪芳田杰陈国珍孙慧超钟立霖吴晓云朱静
- 关键词：P300组蛋白乙酰化心脏发育染色质免疫沉淀
- 乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞的毒性及H3K9表突变的作用
- 目的孕期酒精暴露可导致先天性心脏病,但其具体机制并清楚。我们前期研究结果提示组蛋白乙酰化修饰失衡可引起心脏发育相关基因表达异常(即表突变),文献报道乙醇可选择性引起肝细胞组蛋白H3第9位赖氨酸(H3K9)乙酰化修饰失衡。...
- 钟立霖朱静吴晓云陈国珍孙慧超杨雪芳田杰
- 文献传递
- 姜黄素干预乙醇对心肌祖细胞H3K9的高乙酰化失衡及心脏发育相关基因表达异常被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨乙醇对心肌祖细胞毒性作用的表观遗传机制。方法:以心肌祖细胞株为研究对象,用200mmol/L乙醇和溶解于该浓度乙醇的不同浓度姜黄素(5μmol/L,15μmol/L,25μmol/L)处理。Western blot检测组蛋白H3K9乙酰化水平,筛选出姜黄素的有效干预浓度,实时定量PCR检测心脏发育相关基因GATA4,Mef2c,Tbx5mRNA表达量的变化。结果:200mmol/L乙醇使组蛋白H3K9乙酰化水平升高2.76倍(P<0.05),同时使心脏发育相关基因GATA4,Mef2c,Tbx5表达均增加,其中GATA4,Mef2c较对照组有统计学差异(P<0.05)。5μmol/L、15μmol/L姜黄素分别使组蛋白H3K9乙酰化水平升高2.22、1.58倍(P<0.05);25μmol/L姜黄素使组蛋白H3K9乙酰化水平降至对照组水平,同时使心脏发育相关基因GATA4,Mef2c,Tbx5表达较乙醇组均下降,且与对照组无差异(P>0.05)。结论:姜黄素可干预乙醇对心肌祖细胞的高乙酰化失衡以及进而发生的相关基因的表达异常,可为了解乙醇致畸的机制以及临床预防先天性心脏病提供新的思路。
- 王琳轶田杰钟立霖吕铁伟吴晓云朱静
- 关键词：乙醇
- 先天性心脏病发生机制的体内实验研究方法
- 2009年
- 对于先天性心脏病的研究需依赖于体内实验，而体内实验的成功必须借助于准确、有效的实验方法。近年来，随着新理论的发现，不断有新的实验方法应用于体内实验。该文就近年常用的及新出现的应用于研究先天性心脏病发生机制的体内实验方法作一综述。
- 钟立霖田杰
- 关键词：先天性心脏病基因敲除RNA干扰
- 乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞的毒性及H3K9表突变作用
- 目的:
孕期酒精暴露可导致先天性心脏病(Congenital heart disease,CHD,简称先心病),但其具体机制目前仍不清楚。我们前期研究提示组蛋白乙酰化修饰失衡可引起心脏发育相关基因表达异常(即表突变...
- 钟立霖
- 关键词：乙醇先天性心脏病
- 文献传递
- 乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞的毒性及H3K9表突变作用被引量：4
- 2010年
- 目的探讨乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞的毒性作用及H3K9表突变作用。方法以心肌祖细胞株为研究对象,分别用不同剂量乙醇(200、100、50mmol/L)、乙醛(16、12、8、4mmol/L)和乙酸(16、12、8、4mmol/L)处理。应用MTT实验筛选出乙醇及其代谢产物的干预浓度,Westernblot检测组蛋白H3K9乙酰化作用,实时定量PCR检测心脏发育相关基因GATA4、Mef2c、Tbx5mRNA表达量的变化。结果 MTT结果显示低浓度组50mmol/L乙醇、4mmol/L乙醛、4mmol/L乙酸的细胞活力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),不影响心肌祖细胞增殖;高浓度组200mmol/L乙醇、12mmol/L乙醛、16mmol/L乙酸对心肌祖细胞抑制率分别为31.5%、36.0%、32.1%,抑制细胞增殖(P<0.05)。低浓度组乙醇、乙酸分别使组蛋白H3K9乙酰化水平升高2.4、2.2倍(P<0.05)。心脏发育相关基因表达无明显变化(P>0.05);高浓度组乙醇、乙酸分别使组蛋白H3K9乙酰化水平升高5.3、5.6倍,同时心脏发育相关基因GATA4、Mef2c表达均增加,与对照组及相应低浓度组比较均有统计学差异(P<0.05);乙醛则无论低浓度还是高浓度对组蛋白H3K9乙酰化水平及基因表达均无明显影响(P>0.05)。结论高浓度的乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞均有毒性作用,而乙醇及乙酸具有组蛋白H3K9表突变作用,可能为酒精致先心病发病机制之一。
- 钟立霖朱静吴晓芸陈国珍孙慧超杨雪芳田杰
- 关键词：乙醇代谢产物乙酰化
