安云庆
- 作品数:91 被引量:262H指数:8
- 供职机构:首都医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市教委科技发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- rAAV2-BF增强两品系小鼠抗致死剂量细菌感染
- 2010年
- 目的通过观测rAAV2-BPI1-199-Fcγ1重组病毒(rAAV-BF)感染对不同品系小鼠的抗细菌感染保护作用。方法采用dot blot、Western blot、免疫组化、改良ELISA方法和内毒素检测试剂盒,检测重组BPI1-199-Fcγ1(rBF)蛋白在CHO细胞和小鼠骨骼肌细胞中的表达及血清中内毒素含量的变化;建立最小致死量(MLD)E.coli致死模型,检测rBF基因转染小鼠对MLDE.coli感染的抵抗作用。结果(1)rBF蛋白在CHO细胞和两品系小鼠骨骼肌细胞中成功表达,血清中rBF蛋白具有中和内毒素和杀伤E.coli的作用;(2)在MLDE.coli腹腔感染后,两品系小鼠rAAV-BF感染组存活率均显著高于空载体对照组小鼠;基因转染组小鼠血清内毒素含量明显低于空载体对照组;rAAV-BF感染与头孢呋辛钠联合应用具有协同抗菌作用,两品系小鼠存活率明显高于单纯rAAV-BF感染组。结论rAAV-BF感染组小鼠对致死性E.coli感染具有抵抗作用。
- 关翔宇刘振龙吕喆孔庆利王炜安云庆
- 关键词:革兰阴性菌
- 基于PCR技术的蛋白质改造策略被引量:2
- 2006年
- 基于PCR的突变方法以其简单、快速的优势,逐渐成为DNA体外修饰产生新型蛋白质的最常用方法。现综述其中较为常用的方法,重点介绍易错PCR与DNA改组及其在蛋白质改造中的联合应用。
- 李晶琴李慎涛安云庆
- 关键词:聚合酶链反应DNA改组蛋白质工程突变
- 抗人rBPI<Sub>23</Sub>的单克隆抗体及其应用
- 本发明提供了抗人rBPI<Sub>23</Sub>单克隆抗体,其是以rBPI<Sub>23</Sub>作为免疫原制备获得的既能与rBPI<Sub>23</Sub>特异结合、也能与人天然BPI(即nBPI<Sub>55</...
- 龙军安云庆胡智颖
- 文献传递
- 自然杀伤细胞活化信号的转导和效应被引量:5
- 2005年
- 新近研究发现,NK细胞活化受体与靶细胞表面相应配体交联结合后,可通过以SLP-76和WASP为核心的信号传递复合体及PI3K途径发挥作用。SLP-76活化后,通过募集结合PLC-γ、Itk和Vav,形成SLP-76信号转导复合体;WASP活化后,通过募集结合Grb2、Vav、WIP、Arp2/3和Cdc42-GTP等,形成WASP信号转导复合体。上述2种信号转导复合体经Nck相连后,与浆膜上的LAT作用,进而活化其中的PLC-γ和Arp2/3复合体,最终导致转录因子NFAT活化、细胞因子(GM-CSF、IFN-γ等)分泌和肌动蛋白聚合。PI3K介导Rac/PAK/MEK/ERK途径,导致NK细胞脱颗粒,释放穿孔素和颗粒酶,诱导靶细胞凋亡。
- 陈庆华安云庆
- 关键词:自然杀伤细胞活化信号肌动蛋白聚合PLC-ΓERK途径活化受体
- rBPI_(23)基因克隆与鉴定
- 2000年
- 目的 :rBPI2 3基因 (BPI60 0bp)克隆与鉴定。方法 :采用RT PCR技术 ,从HL 6 0细胞mRNA中扩增编码BPIN端 199个氨基酸 (rBPI2 3)的基因片段 (BPI60 0bp) ,经酶切后通过连接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :RT PCR获得预期的扩增产物—BPI60 0bp基因片段。成功构建PUC18 BPI180 、PUC18 BPI4 2 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符。DNA测序结果与文献报道一致。结论 :PUC18 BPI180 、PUC18 BPI4 2 0 重组克隆载体构建成功 ;BPI60
- 柯岩安云庆杨贵贞
- 关键词:RT-PCR
- BPI N端优势抗原表位的模拟合成及其人源抗体的筛选
- 2007年
- 杀菌/渗透增强蛋白(bactericidal/permeability increasing protein,BPI)是存在于人及哺乳动物多形核白细胞中的一种阳离子抗菌蛋白。研究证实BPI功能性氨基端片段(rBPl2。/rBPl23)具有与天然BPI55,相同的生物学活性,它们不仅能广谱杀伤G^-菌还能有效中和内毒素。
- 张国民陈宇萍乔媛媛王琰赵晓航安云庆
- 关键词:BPI人源抗体抗原表位PROTEINN端多形核白细胞
- BPI23-Fcg1重组抗菌蛋白的研究
- 安云庆杨贵贞陈金栋柯岩
- 《BPI23-Fcg1重组抗菌蛋白的研究》是国家自然科学基金项目(批号:39570666)。该重组抗菌蛋白是采用基因工程技术研制的一种由杀菌/渗透增强蛋白功能性N端片段(BPI23)与IgG1Fc片段(Fcg1)嵌合而成...
- 关键词:
- AAV2-BPI_(700)-Fcγ1_(700)重组病毒导入小鼠对致死量大肠埃希菌感染的保护作用机制被引量:4
- 2006年
- 目的探讨BPI_(700)-Fcγ1_(700)嵌合基因导入,对最小致死量E.coli感染小鼠的保护作用机制。方法采用常规菌落计数法、内毒素和细胞因子检测试剂盒、H-E染色法检测菌落数、内毒素和细胞因子含量及主要器官病理学改变。结果(1)基因导入小鼠血清中的目的基因产物对E.coli具有杀伤作用,可中和内毒素和介导吞噬细胞产生交叉调理吞噬作用;(2)基因导入组小鼠血清、脏器中细菌数明显低于对照组小鼠;(3)基因导入组小鼠血清中内毒素和促炎细胞因子含量显著低于对照组小鼠;(4)对照组濒死小鼠主要脏器血管扩张、淤血明显,与内毒素休克死亡引发的病理学改变相符。结论基因导入组小鼠可通过表达目的基因产物即BPI1-199-Fcγ1嵌合抗菌蛋白,对致死量E.coli感染及其引发的内毒素休克死亡产生抵抗作用。
- 郭向华李晨陈庆华吕喆李静彭智李莉靖学芳孔庆利安云庆
- 关键词:菌落形成单位促炎细胞因子
- 重组(人)白细胞介素2对伤寒Vi荚膜多糖菌苗的免疫佐剂效应的实验研究被引量:5
- 1996年
- 采用改良溶血空斑试验和间接血球凝集试验研究了重组人白细胞介素2(rhIL-2)对伤寒Vi荚膜多糖菌苗(简称Vi菌苗)免疫小鼠的特异性抗Vi菌苗抗体应答的影响及其与免疫保护作用的关系。结果表明:rhIL-2能增强Vi菌苗免疫小鼠的特异性抗体应答,具有明显的佐剂效应;且特异性抗体的水平与用伤寒菌株(Ty250098)攻击的小鼠的免疫保护力呈正相关关系。提示rhIL-2可用做Vi菌苗的免疫佐剂以提高接种人群抗伤寒感染的免疫保护力。
- 李郁英李玉兰安云庆程松高计国欣辜清吾
- 关键词:伤寒疫苗RHIL-2PFC
- 几种不同提取线粒体的方法对线粒体含量及活性的影响被引量:5
- 2010年
- 目的比较几种不同的提取线粒体的方法对线粒体蛋白浓度及活性的影响。方法采用蔗糖密度梯度离心法、普利莱试剂盒提取方法和Pierce线粒体提取试剂盒方法分别提取线粒体,测定提取得到的线粒体蛋白浓度、污染情况和活性。结果同样数量的细胞采用普利莱法提取得到的线粒体蛋白浓度高于其他2种方法所提取的线粒体蛋白浓度(P<0.05);采用Westernblotting的方法测定提取的线粒体发现采用普利莱法提取得到的线粒体中胞质蛋白污染较其他2种方法提取得到的线粒体少,线粒体纯度高;测定线粒体中细胞色素C和ATP含量后发现同样采用普利莱法提取得到的线粒体活性最高。结论普利莱法提取线粒体的方法优于蔗糖密度梯度离心法和Pierce线粒体提取试剂盒方法。
- 吴媛董凌月安威安云庆
- 关键词:线粒体