朱慧芳 作品数:16 被引量:112 H指数:6 供职机构: 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国高等教育学会医学教育专业委员会医学教育研究立项课题 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 农业科学 更多>>
抑制PRR11基因表达对H1299细胞周期的影响 被引量:7 2013年 Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉默对细胞周期产生的影响,通过添加dNTPs分析核糖核苷酸还原酶表达下降在PRR11敲降导致的S期阻滞中的作用。Brdu标记结果表明,PRR11敲减阻滞细胞周期在S期,并且核糖核苷酸还原酶表达下降导致细胞周期阻滞。使用分裂期标记蛋白pHH3分析结果表明,PRR11下调表达同时也导致细胞在G2期产生阻滞,从而抑制细胞进入有丝分裂。研究结果表明,在细胞周期过程中抑制PRR11的表达会阻滞DNA合成和有丝分裂进行,推测PRR11异常表达可能导致细胞周期紊乱,从而促进肿瘤的发生发展。 张春冬 王义涛 张莹 李轶 朱慧芳 蔡伟 朱远远 卜友泉关键词:肺癌 细胞周期 脱氧核糖核苷酸 人Ska2/FAM33A核心启动子区域的初步鉴定与分析 被引量:3 2013年 Ska2(spindle and KT associated 2),也称FAM33A(family with sequence similarity 33,member A),是新近发现的一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因,但其表达调控机制仍不清楚。该研究是在此前对Ska2基因启动子鉴定分析的基础上,进一步对Ska2基因的核心启动子区域进行初步鉴定和分析。采用PCR技术,构建5个Ska2基因启动子的系列删除体,并对Ska2核心启动子区中的2个潜在NF-Y结合位点进行单独或联合定点突变,构建3个定点突变重组体,采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性。启动子活性分析结果表明,所构建删除体均具有较强启动子活性;2个潜在NF-Y结合位点单独或联合定点突变均可导致Ska2启动子活性的降低;共转染NF-Y表达质粒后,Ska2的启动子活性明显提高。该研究结果不仅将Ska2的核心启动子区域定位于一个80 bp的范围内,并且也提示NF-Y是一个调节Ska2转录的重要转录因子。 艾青 翁华莉 张莹 刘竹 王义涛 李轶 朱慧芳 张春冬 卜友泉关键词:启动子 转录调控 NF-Y 微课在医学生物化学教学中的应用探讨 被引量:19 2016年 微课作为一种典型的泛在式网络学习资源形式,以其短而精的授课方式,受到越来越多的人喜爱和关注。而多年以来医学生物化学受其交叉学科知识点繁多、逻辑联系差、理论和临床实践操作脱节等学科特点所影响,学生的学习积极性和成绩一直难以有效提高,而微课改变了传统医学生物化学的自主学习形式,为医学生物化学的教学改革带来了新的契机。 雷云龙 张莹 张春冬 朱慧芳 李轶 卜友泉关键词:医学生物化学 教学改革 内质网应激对ATF6调控XBP1启动子转录的影响 被引量:11 2012年 目的确定XBP1启动子的转录核心区域,探讨激活转录因子6(ATF6)在内质网应激(ERS)与非ERS状态下对XBP1启动子转录活性的调控作用。方法采用基因重组技术构建ATF6基因及两个缺失体ATF6s1p、ATF6s2p的真核表达载体pcDNA3.1(-)-ATF6、pcDNA3.1(-)-s1p、pcDNA3.1(-)-s2p,以及XBP1启动子报告基因载体pGL3-XBP1。针对XBP1启动子的各个组成元件设计和构建XBP1一系列截短体的报告基因载体。采用双荧光素酶报告基因法检测并确定XBP1启动子的核心启动子区,Western blotting检测ATF6及缺失体s2p、s1p在ERS与非ERS状态下对XBP1核心启动子区转录的调控作用。结果 XBP1启动子的-407bp-+133bp区域是转录活性调控的核心区域,-2000bp--407bp区域不具有转录活性,该区域可能含有抑制转录活性的组成元件。非ERS状态时,ATF6及两个缺失体s2p、s1p可明显上调XBP1启动子的转录活性及XBP1蛋白表达;而在ERS状态时,ATF6及两个缺失体s2p、s1p下调了XBP1启动子的转录活性和XBP1蛋白表达。结论 ATF6对XBP1的转录调控作用在ERS状态和非ERS状态下存在差异。非ERS状态时,ATF6上调XBP1的转录和表达,而ERS状态时,ATF6下调XBP1的转录和表达。 赵文君 朱慧芳 周菁华 李祥柱 刘艳娜 郭风劲关键词:基因表达调控 转录启动子 以器官系统为中心的基础医学课程改革初探 被引量:33 2013年 随着现代医学教育的发展,传统的"以学科为中心"的课程模式存在诸多弊端,而"以器官系统为中心"的课程模式受到诸多好评。重庆医科大学初步探索适应校情的基础医学课程教学体系改革,为全面开展以器官系统为中心的基础医学课程模式,为培养具有创新精神和综合能力的实用型人才打下基础。 朱慧芳 刘先俊 张莹 卜友泉关键词:教学改革 课程整合 器官系统 NID1促进人卵巢癌细胞OVCAR-3侵袭转移及分子机制的研究 被引量:1 2015年 Nidogen-1(NID1)是新发现的一个候选卵巢癌诊断标志物,该研究旨在初探其在卵巢癌细胞中的生物学功能。首先构建稳定过表达外源NID1的人卵巢癌细胞系OVCAR-3,然后采用划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测细胞的迁移侵袭能力,并通过荧光定量PCR和Western blot检测细胞中上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白和ERK/MAPK通路蛋白的表达情况。结果显示,与空载细胞相比,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞其划痕愈合能力、细胞迁移和侵袭能力均明显增强。较之空载细胞的上皮细胞样外形,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞呈间质细胞样外形,其上皮细胞标志分子E-cadherin表达下调,间质细胞标志分子(包括Vimentin和N-cadherin)和EMT相关转录因子Twist-2表达上调。此外,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞中ERK1/2的磷酸化水平升高,经ERK/MAPK通路的抑制剂U0126下调ERK1/2的磷酸化水平后其Ecadherin、Vimentin、N-cadherin和Twist-2表达水平出现逆转。这些结果提示,NID1可能通过激活ERK/MAPK通路促进卵巢癌细胞的EMT过程,进而增强其侵袭转移的能力。 朱远远 张春冬 王义涛 王森 朱慧芳 李轶 雷云龙 卜友泉 张莹关键词:卵巢癌 EMT RNAi干扰Ska2对H1299细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响 被引量:2 2014年 Ska2(spindle and kinetochore associated complex subunit 2),又称FAM33A(family with sequence similarity 33,member A),是新近发现的一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展紧密相关的基因,且与该团队前期发现的新基因PRR11(proline rich 11)共享一个双向启动子。但是,Ska2在肺癌中的具体作用和分子机制仍不清楚。该研究选用肺癌细胞系H1299,采用RNAi技术构建Ska2基因沉默的稳定细胞株,并进行了细胞表型和潜在分子机制分析。RT-PCR和Western blot结果表明,Ska2在mRNA和蛋白质水平上的表达均被有效抑制。细胞增殖、细胞迁移和侵袭实验结果表明,与对照细胞相比,Ska2基因沉默稳定细胞株的细胞增殖能力、细胞迁移和侵袭能力均显著降低。此外,Ska2基因被沉默后,CCNA1基因的表达显著下调。该研究的结果提示,Ska2与其对侧基因PRR11的功能高度相关,可能与PRR11共同参与肺癌细胞增殖、迁移和侵袭行为的调节。 王义涛 蔡伟 朱远远 李溪月 张春冬 王森 雷云龙 张莹 朱慧芳 李轶 卜友泉关键词:细胞增殖 肺癌 迁移 基础医学硕士研究生培养模式的探讨 被引量:4 2014年 基础医学是医学教育与研究的基石,基础医学研究受到国内外的极大关注。重庆医科大学对基础医学硕士研究生的培养模式进行了探讨,在不同的研究生阶段进行不同的培养教育,培养研究生不仅掌握各种实验技术方法,而且具备独立思考、解决问题和设计研究课题的能力。 朱慧芳 宋方洲关键词:硕士研究生 MOOC背景下生物化学教学的对策与改革 被引量:12 2015年 将MOOC的教学理念引入生物化学教学中,与课堂教学相结合,对提升教师教学的质量和效率,调动学生的学习积极主动性,以及建立有效的学习效果评价体系等方面进行探讨及改革,以期适应电子信息化时代对提高人才培养质量的需求。 张春冬 张莹 李轶 朱慧芳 雷云龙 卜友泉关键词:生物化学 传统教学 教学改革 “以器官系统为中心”医学生物化学教学改革初探 被引量:3 2013年 为适应医学教育发展,"以器官系统为中心"的课程模式逐渐受到国内医学院校的青睐。借鉴国内外的教学改革经验,根据本校教育教学实际情况,重庆医科大学开展了"以器官系统为中心"的教学改革。这为讲授生物化学这门重要的医学基础课提供了一个良好的机会,我教研室对生物化学教学在教学内容等方面进行调整和重新分配,以期取得更好的教学效果。 朱慧芳 卜友泉关键词:器官系统 教学改革 生物化学