梁甜
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:广西大学生命科学与技术学院广西亚热带生物资源保护利用重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程更多>>
- 一步法发酵葡萄糖生成1,3-丙二醇的基因工程菌的构建及分子改性
- 1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PDO)是一种重要的化工原料,1,3-PDO 不仅是良好的溶剂、抗冻剂、保护剂,而且还是合成许多缩聚物的单体,如新型聚酯材料-聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)在很多领...
- 齐向辉韦旭钦杨登峰吴杰群孟晓蕾唐悦梁甜杜丽琴韦宇拓黄日波
- 关键词:一步发酵法1,3-丙二醇葡萄糖基因工程菌
- 文献传递
- 弗氏柠檬酸菌甘油脱水酶激活因子基因的克隆、表达与功能鉴定被引量:1
- 2009年
- 1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,其生物法生产的研究逐渐受到的关注。研究以弗氏柠檬酸菌的总DNA为模板,通过PCR分别扩增出约1.8kb(dhaF)和0.4kb(dhaG)的两个基因片段分别编码甘油脱水酶激活因子大、小亚基,连接于pMD-18T载体,测序分析显示与GenBank中相关基因的相似性最高为86%。将两基因以多顺反子的方式与pSE380连接构建表达载体,并在大肠杆菌中进行高效表达,表达量占总蛋白的30%。将高效表达的激活因子用金属亲合层析和分子筛进行了纯化,得到电泳纯级的甘油脱水酶激活因子,SDS-PAGE分析显示:大、小亚基分子量约为63kDa和12kDa;非变性胶分析显示:全酶的分子量约为150kDa,经扫描分析推测甘油脱水酶激活因子很有可能是以α2β2方式结合的。以弗氏柠檬酸菌甘油脱水酶为研究对象,进行激活实验,结果证实该激活因子具备甘油脱水酶激活因子的功能,为进一步阐明甘油脱水酶的激活机制及1,3-丙二醇的高效生产奠定了基础。
- 齐向辉梁甜曹博罗兆飞韦宇拓杨登峰黄日波
- 关键词:甘油脱水酶
- 丘状乳杆菌中二醇脱水酶激活因子pduGH的克隆与功能鉴定
- 2007年
- 以丘状乳杆菌(Lactobacillus collinoides)基因组DNA为模版,通过PCR方法得到二醇脱水酶激活因子基因pduGH,连接到表达载体pET30a上,得到重组质粒pET-pduGH。将此重组质粒转化到Escherichia.coli Rosseta(DE3)中进行表达,重组菌株SDS-PAGE结果显示有明显的64.5 ku和12.4 ku两条特异性蛋白。表达的目的蛋白大多为不溶性的包涵体,经变性、复性后得到部分可溶性蛋白。在辅酶B12,ATP,Mg2+或Mn2+存在下,以Clostridium pasteurianum甘油脱水酶为对象进行激活实验,结果证实,重组质粒pET-pduGH的表达产物具有甘油脱水酶激活活性。
- 梁甜齐向辉韦旭钦韦宇拓黄日波
- 关键词:1,3-丙二醇克隆
- Lactobacillus collinoides二醇脱水酶及其激活因子的功能鉴定
- 甘油脱水酶/(EC 4.2.1.30/)是生物转化法生产1,3-丙二醇/(工业上有重要用途的化工材料/)的限速酶,而二醇脱水酶/(EC4.2.1.28/)是甘油脱水酶的同工酶,所以近年来也成为研究的热点。
以...
- 梁甜
- 关键词:甘油脱水酶
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