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c-Met siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响被引量：1: 2013年; 目的:合成针对c-Met的小干扰RNA(siRNA),研究其对U87-EGFRvⅢ(表皮生长因子受体Ⅲ型突变体)胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法:用脂质体转染合成的c-Met siRNA入U87-EGFRvⅢ细胞,未转染组为对照组,荧光实时定量PCR和Western blotting分别检测c-Met基因和蛋白的表达,MTT和Annexin V-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡情况。结果:c-Met siRNA明显抑制c-Met表达(P<0.05);明显增加细胞凋亡率(P<0.05)。同时,c-Met siRNA单独或协同EGFRvⅢsiRNA可抑制胶质瘤细胞增殖(P<0.05)。结论:c-Met siRNA可抑制U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞增殖、诱导其凋亡,为研究c-Met基因在胶质瘤中的作用及其靶向联合治疗提供了理论基础。; 石玉生谭燕伍锡栋张兴梅; 关键词：SIRNA 表皮生长因子受体

一种与人表皮生长因子受体III型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用: 本发明公开了一种与人表皮生长因子受体III型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用。本发明的核酸适配子其核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ I...; 张兴梅谭燕伍锡栋梁惠玉高天明

针对prominin-1的C-末端肽的适配子筛选和初步鉴定被引量：1: 2013年; 目的:采用SELEX技术筛选针对人prominin-1的C-末端18肽(C18)的适配子并进行初步鉴定。方法:采用微孔板法进行SELEX筛选。用合成的KLH-C18作为筛选靶标,进行7轮筛选后进行克隆测序。选取适配子C6进行结合ELISA检测,同时进行与转染prominin-1质粒的U87细胞的免疫组化;利用链亲和素磁珠来进行适配子C6的免疫共沉淀。结果:经过7轮SELEX筛选得到具有特定二级结构的适配子。适配子C6可结合C18肽和表达人prominin-1的U87细胞。Pulldown实验证明了C6可识别天然状态的prominin-1蛋白。结论:利用"靶标切换"的SELEX技术,初步获得能与人prominin-1的C-末端18肽及其天然蛋白结合的适配子,为肿瘤的诊疗奠定实验基础。; 张兴梅石玉生李晓文李银方莹莹; 关键词：适配子肿瘤干细胞

核酸适配子及其治疗应用被引量：3: 2006年; 核酸适配子(aptamer)是从大容量的组合化学库中筛选出的短的寡核苷酸。与抗体类似,它与靶分子结合具有高特异性和高亲和力。大多数核酸适配子与靶分子结合后对靶分子有抑制作用。适配子可广泛用于抗凝血、抗病毒、抗增殖、抗炎等方面。特异针对人VEGF165的核酸适配子已在美国被批准上市。; 张兴梅石玉生

核酸适配子在制备治疗阿尔茨海默氏病药物中的应用: 本发明公开了核酸适配子在制备治疗阿尔茨海默氏病药物中的应用。通过SELEX技术筛选出与人AChE结合的适配子Ob2，所述的核酸适配子Ob2的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。体外检测Ob2具有抑制AChE活性的作用...; 张兴梅梁志满石广为龙利丽郭婷罗晓婷

稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株的建立与鉴定被引量：2: 2010年; 目的:构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87MG细胞株。方法:采用电转染方法将pcD-NA4/TO-EGFRvⅢ质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株。应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvⅢ基因的细胞株。结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvⅢ基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvⅢ蛋白水平高表达。结论:成功建立了稳定表达EGFRvⅢ的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础。; 陈明孙红宇文荣朝余政梁吴巧琪夏许可张兴梅高天明; 关键词：基因表达

适配子介导的siRNA转运被引量：2: 2012年; 小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)因能快速抑制哺乳动物特定基因的表达而用于各种疾病的治疗,然而选择合适的载体将siRNA安全有效地转运进入靶细胞仍是制约siRNA应用于临床治疗的重要因素.越来越多的转运载体被开发出来,其中包括针对细胞表面蛋白的适配子(aptamer).Aptamer是一种能与靶分子高特异性和高亲和结合的寡核苷酸,已经越来越多地用于疾病的诊断和治疗.Aptamer作为载体介导siRNA转运可提高治疗的靶向性并减少副作用,这将为siRNA应用于临床靶向治疗提供一种特异有效的途径.目前,已经发现几种aptamers可以介导siRNA的转运,如anti-PSMA aptamer,anti-HIV gp120 aptamer,anti-CD4 aptamer等.本文将综述aptamer介导siRNA转运的最新研究进展.; 谭燕张兴梅; 关键词：SELEX 适配子 SIRNA 转运

Cell-SELEX技术在肿瘤研究中的应用: 2013年; 基于细胞的指数富集配基系统进化(cell-based systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,cell-SELEX)是一项筛选能特异识别靶细胞的适配子的技术。适配子是以高度特异性及亲合力结合靶标的单链RNA或DNA分子,在生命医学的许多领域具有广阔的应用前景。因此有必要综述cell-SELEX技术及其适配子在肿瘤生物标记发现、细胞分子识别、诊断和治疗中的应用。; 梁惠玉高宇博张兴梅; 关键词：适配子肿瘤研究

BNIP3干扰质粒的构建及鉴定被引量：1: 2010年; 目的构建大鼠Bcl-2/E1B-19K-interacting protein 3(BNIP3)干扰质粒,研究其对BNIP3蛋白表达水平的影响。方法利用Invitrogen公司在线软件设计大鼠BNIP3(NM_053420)干扰片段,合成互补的单链寡核苷酸,蒋退火后形成的双链克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR表达载体,连接产物转化感受态细胞,增菌,质粒小量提取并测序。将构建的干扰质粒与大鼠BNIP3表达质粒共转染到HEK293细胞中,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测对目的基因的干扰情况。结果构建的2个干扰质粒经测序证实序列正确,与BNIP3表达质粒共转染后显著抑制外源性BNIP3的mRNA和蛋白表达。结论成功构建了大鼠BNIP3干扰质粒,为进一步研究BNIP3的功能打下了基础。; 陈明张兴梅李勃兴孙红宇李晓文高天明; 关键词：BNIP3 RNA干扰 HEK293

生物化学实验教学现状及改革的基本思路被引量：22: 2007年; 针对生物化学实验教学中存在的问题，从转变教育观念、改革教学体系、优化实验教学内容、更新实验教学模式及改革管理体制等方面，探讨了生物化学实验教学改革的基本思路。; 肖维威马文丽张兴梅; 关键词：生物化学实验教学教学改革

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张兴梅