李风梅
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广州市教育局市属高校科研项目广州市属高校科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人前蛋白转化酶枯草溶菌素9的原核表达及特异性抗体的制备与鉴定
- 研究背景
家族性高胆固醇血症作为常染色体显性遗传疾病的一种，容易导致动脉粥样硬化，增加心血管疾病的患病风险，严重威胁着人类的身心健康。研究表明，高脂血症主要表现为血浆低密度脂蛋白胆固醇/(LDL-C/)水平的升高，...
- 李风梅
- 关键词：PCSK9多克隆抗体
- 文献传递
- 人pcsk9基因原核表达载体的构建及诱导表达被引量：1
- 2013年
- 目的构建人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)的原核表达载体,优化pcsk9诱导表达条件。方法聚合酶链式反应扩增人工合成的pcsk9 cDNA序列。扩增产物经双酶切、连接,构建pET-28b-pcsk9表达载体;将重组质粒转化入大肠杆菌表达菌BL21(DE3)的感受态细胞中,分别在不同条件下对其进行诱导,获得pET-28b-pcsk9的最佳诱导表达条件。结果成功构建了pET-28b-pcsk9重组表达载体,其最佳表达条件为菌液光密度值取0.6,诱导温度取30℃,诱导剂终浓度取1.0 mmol/L,诱导时间取8 h。结论该重组表达载体构建成功,在大肠杆菌表达菌BL21(DE3)中可有效地表达,对诱导所用的温度和时间相对比较敏感。
- 李风梅俞辉宋金龙刘忠民
- 人前蛋白转化酶枯草溶菌素9的cDNA克隆和表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2013年
- 目的构建人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)的原核表达载体并诱导其表达,制备其蛋白的多克隆抗体。方法聚合酶链式反应扩增人工合成的pcsk9 cDNA序列;扩增产物经TA克隆、双酶切、连接,构建pET-28b-pcsk9表达载体;将重组质粒转化入大肠杆菌表达菌BL21(DE3)的感受态细胞中,诱导表达;用纯化检测过的目的蛋白免疫新西兰兔,最后采集全血收集血清,获得多克隆抗体,并对该抗体进行免疫印迹及效价测定。结果 PET-28b-pcsk9原核表达载体构建成功,用诱导表达的目的蛋白免疫动物,收集血清获得多克隆抗体。对多克隆抗体进行纯化,免疫印迹检测结果证明自制多克隆抗体特异性良好,效价测定为1:13 200。结论成功构建了pcsk9原核表达载体pET-28b-pcsk9,且获得了其蛋白的多克隆抗体。
- 李风梅俞辉宋金龙刘忠民
- 关键词：PCSK9多克隆抗体
- 人前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因的研究进展被引量：5
- 2014年
- 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(Pcsk9)是枯草蛋白酶亚家族的一种新的前蛋白转化酶,是影响血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的因素之一,同时也是心脑血管疾病的重要影响因子。Pcsk9通过介导LDL受体(LDLR)的降解,参与脂质代谢,从而改变LDL-C的血浆浓度。pcsk9基因多态性会引起不同的血浆胆固醇水平改变。抗Pcsk9特异性抗体可改变其血浆浓度,从而控制血浆LDL-C的水平,降低心脑血管疾病的患病风险。本文旨在就Pcsk9结构、功能、多态性以及抗体研究的进展作一综述。
- 李风梅刘忠民
- 关键词：低密度脂蛋白胆固醇多态性抗体
