刘光清
- 作品数：11 被引量：253H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染被引量：20
- 2002年
- 刘光清仇华吉蔡雪晖童光志
- 关键词：繁殖病毒
- 猪繁殖与呼吸综合征的研究进展被引量：132
- 2001年
- 刘光清蔡雪晖仇华吉郭宝清童光志
- 关键词：猪繁殖呼吸综合征PRRS病毒流行病学防制
- PRRS弱毒疫苗毒株与野毒株的分子遗传学差异被引量：4
- 2001年
- 猪繁殖-呼吸综合征(PRRS)是近年来新发现的一种严重危害养猪业的病毒性传染病,其主要特征是:引起繁殖母猪的生殖障碍与仔猪的呼吸道症状.故命名为猪繁殖-呼吸综合征.该病病原为PRRS病毒(PRRSV),于1991年为荷兰学者Wensvoort等最先分离到.根据其基因组的结构及转录调控机制的特点,将其归于动脉炎病毒科.随后的研究表明,其为一种有囊膜的单股正链RNA病毒,根据病毒的基因组组成特征及抗原性差异,可将其分为两种基因型:即以VR-2332株为代表的北美洲型和以LV株为代表的欧洲型.其基因组的共同特点是,都含有8个开放阅读框架(ORF),其所编码的蛋白也都相同[1].即ORF1(包括ORF1a和ORF1b)编码病毒的复制酶,ORF2～6编码病毒的囊膜蛋白,ORF7则编码高度保守的核衣壳蛋白.
- 刘光清仇华吉等
- 关键词：猪繁殖呼吸综合征弱毒疫苗株野生株基因突变
- 检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA方法的建立被引量：35
- 2000年
- 本试验通过差速离心法和非线性蔗糖密度梯度离心法纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)。经三氯_三氟乙烷处理后 ,作为ELISA试验的标准抗原 ,并建立了检测PRRSV抗体ELISA方法。该方法与IFA、IPMA和国外同类商品化试剂盒进行了对比试验 ,表明该方法具有敏感性高、特异性好的特点 ,是一种快速准确检测PRRSV抗体的方法。间接ELISA方法在敏感性上要优于IFA和IPMA。
- 蔡雪晖郭宝清柴文君刘文兴翁长江刘光清
- 关键词：间接ELISAPRRSV抗体检测
- 猪繁殖与呼吸综合征及其在我国的现状与对策被引量：33
- 2000年
- 蔡雪晖柴文君翁长江刘光清郭宝清
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征猪场疫苗接种肺泡巨噬细胞仔猪
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株基因组全长cDNA克隆的构建被引量：7
- 2003年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)嗜好在PAM和其他单核细胞上生长 ,如果把PRRSV作为一种病毒活载体 ,它就可以携带外源抗原高效进入猪体的免疫系统 ,更好地刺激机体产生免疫应答。本实验根据PRRSV基因组和克隆载体的限制性内切酶酶切位点 ,将PRRSV基因组设计为 8段进行了反转录和扩增 (RT_PCR) ,将得到的片段克隆到质粒pBluescriptIISK(_)或pMD 18T_vetcor中。在扩增 5’端时 ,运用 5’RACE获得了基因组 5’最末端序列 ,在亚克隆入pOK12前在 5’端上游引入了T7启动子序列。选取一个克隆在 3’端紧挨ORF7下游引入了PacⅠ位点 ,以期作为感染性分子克隆的分子标志。将扩增片段在pBuescriptIISK(_)中进行了部分连接后 ,亚克隆于低拷贝质粒pOK12中 ,在pOK12中进行了长片段的连接 ,并获得了基因组全长cDNA克隆。进行全基因测序后 ,在 3处发现有 6个核苷酸的缺失 ,运用插入突变修补丢失的碱基 ,最终获得了含有PRRSVCH_la株基因组全长cDNA的重组质粒pOKCH_laF和含有分子标志PcaⅠ的基因组全长cDNA克隆pOKCH_laPacIF。在本试验中构建的基因组全长cDNA克隆为进一步获得具有感染性的PRRSV分子克隆并研究该病毒基因组结构和功能奠定了基础。
- 薛强周艳君刘光清仇华吉童光志
- 关键词：感染性分子克隆
- 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的研制被引量：44
- 2000年
- 本研究选用国内分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒CH_1a株作为疫苗用毒株。利用转瓶细胞培养技术 ,在Marc_145细胞上大量增殖了较高滴度的猪繁殖与呼吸综合征病毒。该病毒经甲醛灭活后 ,用等量的油佐剂乳化制成安全性好、保护率高的猪繁殖与呼吸综合征油佐剂灭活疫苗。经实验室试验和区域性跟踪试验证明 ,该疫苗具有免疫保护期长 ,保护率高、安全稳定等优点。
- 郭宝清蔡雪晖刘文兴柴文君尹训南翁长江褚桂芳刘光清
- 关键词：灭活疫苗PRRS病毒病免疫保护
- 猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株非结构基因的分子克隆及其基因特征的研究被引量：1
- 2000年
- 本研究对猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）的非结构基因，包括ＯＲＦ１基因、５’端非编码区基因（Ｎｏｎ－ＣｏｄｉｎｇＲｉｇｏｎ，ＮＣＲ）和３’端非编码区基因（ＮＣＲ）分别进行了分子克隆和测序，并对其基因特征作了研究分析。结果表明，ＰＲＲＳＶ－ＣＨ－１ａ株ＯＲＦ１ａ起始密码子上游是由保守序列５’ＵＵＡＡＣＣ３’连接的５’ＮＣＲ，在该区附近的约４３个碱基有较高的保守性，其余核苷酸的变异较大。ＯＲＦ１ａ编码的多聚蛋白又可切割生成六个非结构蛋白（Ｎｓｐ１ａ、Ｎｓｐ１β、Ｎｓｐ２－５），其中Ｎｓｐ２可能具有型特异性，在不同基因型的ＰＲＲＳＶ分离株之间表现出较大的变异，和ＶＲ２３３２株的ＮｓＰ２的编码基因相比有８６％的同源性，同ＬＶ株只有４５％的同源性；ＯＲＦ１ｂ所编码的聚合蛋白经切割后形成四个非结构蛋白（ＲｄＲｐ、ＣＰ２－４），同 ＯＲＦ１ａ所编码的蛋白相比较为保守，但是，在ＣＰ４的Ｃ端仍有较大的变异，其编码区和ＶＲ２３３２株相比有８８．７％的同源性，而和ＬＶ株只有５３．４％的同源性。ＣＨ－１ａ株的ＯＲＦ１ａ－ＯＲＦ１ｂ的衔接区为核糖体移码区，在所有的ＰＲＲＳＶ分离株中高度保守。
- 刘光清仇华吉蔡雪晖钱平薛强童光志郭宝清
- 关键词：PRRSVCH-1A株ORF1基因非结构基因
- 猪繁殖与呼吸综合征及其在我国的现状与对策被引量：1
- 2000年
- 一、猪繁殖与呼吸综合征的历史回顾 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respi-ratory syndrome, PRRS)是八十年代末期国际上出现的一种新的猪病,首先发现于欧美,随后传播至世界主要养猪国家。该病主要以引起怀孕后期母猪的早产、死胎或木乃伊;仔猪感染后成活率急剧下降;育成猪感染以呼吸道症状为主。1989年美国首先报导该病的发生。
- 蔡雪辉柴文君翁长江刘光清郭宝清
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征肺泡巨噬细胞肺巨噬细胞细胞免疫体液免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在酵母系统中的表达
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种以妊娠母猪晚期流产、早产、产死胎和木乃伊胎,以及仔猪出现呼吸道症状和死亡率高等为特征的一种传染病,该病于80年代末首先在美国发现,其后大部分欧洲国家和部分亚洲国家也相继都发生了此病。现...
- 钱平童光志仇华吉王云峰周彦君刘光清吴丹薛强陈焕春
- 文献传递
