尹晓敏
- 作品数：23 被引量：45H指数：4
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 蛋白激酶A催化微管相关蛋白tau磷酸化的研究被引量：3
- 2006年
- 目的:研究蛋白激酶A(PKA)对微管相关蛋白tau的磷酸化作用。方法:采用免疫印迹技术,利用位点特异性、磷酸化依赖的tau蛋白抗体,检测PKA对tau蛋白磷酸化作用的位点特异性及磷酸化作用动力学。用双倒数作图,计算PKA催化tau磷酸化以及各个位点磷酸化的Km值,并结合培养细胞的实验,研究PKA对tau蛋白磷酸化作用的位点特异性。结果:PKA催化tau蛋白在Ser214,Ser262,Ser409三个位点磷酸化,而且各位点磷酸化作用的Km值不同,PKA对Ser214的Km值最低,即对Ser214位点的亲和性最高,催化其磷酸化的能力最强。在细胞实验中,也显示了PKA引起Ser214位点的磷酸化最明显。结论:PKA催化tau蛋白在Ser214,Ser262,Ser409三个位点磷酸化,其中Ser214是PKA催化tau磷酸化反应的最好位点。
- 施建华钱慰丁绍红尹晓敏沈勤刘飞
- 关键词：TAU蛋白激酶A磷酸化
- 剪接因子SRp55原核表达质粒的构建和表达被引量：1
- 2007年
- 目的:本研究通过扩增剪接因子SR蛋白家族的SRp55基因,构建GST融合蛋白原核表达质粒pGEX-2T/SRp55,并在大肠杆菌中诱导表达并进行纯化。方法:用PCR法扩增SRp55基因,将扩增产物和载体pGEX-2T进行双酶切后回收,连接载体和目的片段,获得重组质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。在大肠杆菌BL21(DE3)中通过IPTG进行诱导表达,然后用谷胱甘肽-琼脂糖球珠,亲和纯化得到纯的GST-SRp55融合蛋白。结果:SRp55基因以正确的阅读框架插入pGEX-2T。IPTG诱导大肠杆菌BL21(DE3)表达,随诱导时间的增加蛋白表达量增高,4h以后接近最高表达量。通过亲和纯化得到分子量在60kD左右的蛋白,经蛋白印迹分析证实为GST-SRp55融合蛋白。结论:成功地构建了GST融合蛋白原核表达质粒pGEX-2T/SRp55,并获得GST-SRp55融合蛋白,为进一步研究tau蛋白可变剪接机制提供了必要的基础。
- 尹晓敏施建华刘飞
- 关键词：TAU原核表达剪接因子
- 二苯乙烯苷对神经细胞淀粉样肽前体蛋白表达的影响及其与CREB调节相关的作用机制
- 2017年
- 目的探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对培养神经细胞淀粉样肽前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)表达的影响及其作用机制。方法应用Western blotting法检测APP和c AMP效应元件结合蛋白(c AMP responsive element-binding protein,CREB)的表达。用Matinspector软件分析APP启动子区CRE顺式反应元件;构建不同长度APP启动子区荧光素酶表达质粒;用双荧光素酶报告基因系统检测细胞中荧光素酶活性。结果由Forskolin激活SH-SY5Y细胞中CREB的同时可下调APP表达,成功构建了含有CRE元件的APP启动子区荧光素酶表达质粒。TSG能够抑制SH-SY5Y细胞内APP表达,并对APP启动子转染细胞内含有CRE1和2的APP荧光素酶报告基因质粒表达有显著抑制作用。结论 TSG能够下调神经细胞中APP的表达,其机制可能与影响CREB与CRE元件的结合有关。
- 尹晓敏尹晓敏戴伍飞钱嘉逸陈晨陈晨张兰
- 关键词：二苯乙烯苷阿尔茨海默病
- CalpainⅠ截断并激活GSK-3
- 常欢欢靳娜娜尹晓敏钱慰顾建兰刘飞
- 监测全心舒张末期容积与胸腔内血容积在急性心力衰竭患者治疗中的意义
- 目的 评价全心舒张末期容积(GEDVi)以及胸腔内血容积(ITBVi)在急性心力衰竭患者治疗过程中的价值和意义.方法 对23 例急性心力衰竭患者脑利钠肽(BNP)、GEDVi 以及ITBVi 回顾性分析,观察其治疗前后的...
- 陆舒尹晓敏
- 肌钙蛋白T迷你基因的构建及其心衰模型表达谱系研究
- 2015年
- 目的：研究肌钙蛋白T（cardiac troponin T, cTnT）基因外显子5（exon 5, E5）的可变剪接及其在真核细胞和小鼠心力衰竭（心衰）模型的表达情况。方法：通过分段PCR构建包含cTnT外显子2-6及相应的内含子的基因片段，连接至真核表达载体中，转染真核细胞HEK293FT，观察其在细胞的表达和在体心肌中的表达是否有异同；建立小鼠心衰模型，用免疫组织化学法和PCR研究cTnT E5的表达情况。结果：cTnT迷你基因在HEK293FT细胞内表达出3个剪接异构体，分别是1个cTnT E5＋和2个cTnT E5-；小鼠心脏内主要表达3个剪接异构体，组成情况和迷你基因表达产物相似；小鼠心衰模型组的cTnT E5＋比例增高。结论：成功构建cTnT迷你基因，可用于进一步研究cTnT E5的可变剪接表达调控；小鼠心衰模型显示cTnT E5的表达和心肌功能有一定联系。
- 尹晓敏徐雯陆舒
- 关键词：可变剪接心力衰竭小鼠
- Regulation of tau exon 10 splicing by Dyrk1A during development
- Background:Alternative splicing of tau exon 10 results in tau isoforms containing either three or four microtu...
- 尹晓敏施建华刘飞
- 文献传递
- 医学生物化学留学生实验课教学的新思路探索被引量：3
- 2015年
- 该文针对留学生医学生物化学的培养目标,从留学生实验教学的内容、方法及考核形式等多各方面探讨了留学生实验教学改革的新思路,以满足现代留学生医学教育的新需求。生物化学实验教学注重理论与实践相结合,在实验教学过程中更应使用启发和演示教学手段为主,在理解实验内容和原理的基础上结合医学生物化学本身的特点,提高留学生实践和科研能力,培养合格的医学人才。
- 尹晓敏钱慰殷冬梅
- 关键词：生物化学教育改革
- 一种全身麻醉缓释制剂及其制备方法
- 本发明属于医药领域，公开了一种全身麻醉缓释制剂及其制备方法，该制备方法包括：将新鲜茶叶用液氮急冻后，机械研磨，制取酶制剂并投入到含有表没食子儿茶素没食子酸酯、氯化铜和NADPH的PBS缓冲液中，再加入含有丙泊酚的大豆油，...
- 尹晓敏陆舒钱慰
- 文献传递
- SIRT1调节突触蛋白Synapsin 1表达和神经元树突生长被引量：1
- 2020年
- 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)早期就出现突触功能紊乱。沉默调节蛋白1(silent information regulator 1,SIRT1)是与AD相关的重要去乙酰化酶。本研究探讨了SIRT1对突触蛋白1(synapsin 1)表达和对神经元树突生长的影响。Western印迹检测结果显示,SIRT1显著抑制小鼠神经瘤母细胞系N2a细胞和海马神经元细胞内突触蛋白1的蛋白质表达(P<0.01)。而自噬溶酶体降解途径抑制剂(3-Methyladenine,3-MA)处理可使突触蛋白1的蛋白质表达水平显著上升(P<0.01),说明其抑制作用可能与突触蛋白1的自噬溶酶体途径降解有关。利用免疫荧光检测SIRT1活化剂白藜芦醇(resveratrol,RSV)对神经元树突生长的影响,发现RSV可促进海马神经元树突生长,并抑制其分支生成。SIRT1^+/-杂合子小鼠脑内突触蛋白1的蛋白质表达较之正常组显著增高(P<0.05),树突棘密度显著增加(P<0.05)。综上所述,SIRT1可抑制突触蛋白1表达并且调节神经元树突的生长。
- 顾群黄琴徐子淇吴凡尹晓敏张旭钱慰
- 关键词：阿尔茨海默病神经元树突
