王雪华
- 作品数:3 被引量:15H指数:2
- 供职机构:教育部更多>>
- 发文基金:四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 镉胁迫下麻疯树转录组测序分析被引量:12
- 2016年
- 麻疯树是一种能适应多种恶劣环境条件的能源植物,目前关于其抵抗重金属胁迫的分子调控机理尚不清楚。从组学水平整体分析其基因表达模式对于筛选关键基因、解析镉胁迫响应调控网络和促进分子育种具有重要意义。利用Illumina测序技术对水培条件下培养的处理组(Cd100)和对照组(CK)麻疯树幼苗叶的转录组进行高通量测序,两个数据库的测序数据经de novo组装得到50448条高质量的Unigene。两个样品中发现了2551条差异表达基因,其中539条上调基因,2012条下调基因。根据不同数据库的注释信息,发现麻疯树镉胁迫引起叶片中多种代谢途径的变化,包括碳代谢,光合作用,植物激素信号转导以及植物病原响应途径。DAVID分析显示镉胁迫引起了麻疯树叶中与离子转运相关基因的变化,导致叶片中Na离子和铁离子稳态的变化。转录因子分析发现WRKY和ZIP在镉胁迫中发挥重要作用。用qRT-PCR技术对随机挑选的5个基因进行荧光定量验证,结果与测序数据一致,证实了差异表达基因数据的有效性。深入探讨了麻疯树镉胁迫的分子机理,为进一步应用于基因工程和植物修复提供基础。
- 苏稚喆王雪华杨华孙焕魏炜
- 关键词:麻疯树转录组镉胁迫植物修复
- 麻疯树JcCBF3基因的克隆及其抗寒功能初探被引量:1
- 2016年
- 从麻疯树中克隆到一个CBF3基因,命名为JcCBF3,ORF全长678bp,编码225个氨基酸;氨基酸序列同源性比对结果显示JcCBF3与其他物种CBF序列具有较高的同源性,与木薯和橡胶树的相似度最高,达到79%和74%.RT-qPCR结果表明低温胁迫12h后JcCBF3基因的表达量达到峰值,为对照的62倍.将JcCBF3构建到植物过表达载体pBI121上并成功转化烟草.低温处理下转基因烟草幼苗的游离脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性的增幅均大于野生型烟草,并且JcCBF3基因的过表达增强了含有CRT/DRE元件的下游抗性基因的表达.
- 严君孙焕王雪华魏炜
- 关键词:麻疯树RT-QPCR转基因烟草抗寒性
- JcERF1基因RNA干扰载体的构建、转化及沉默效果研究被引量:2
- 2015年
- 构建了麻疯树(Jatropha curcas)一个新的ERF类转录因子基因RNA干扰(RNAi)载体,并将之转入过表达JcERF1基因烟草体内,得到了RNA干扰型烟草.利用实时荧光定量PCR(QPCR)检测了JcERF1基因的表达量,发现该基因在干扰型烟草中表达量明显降低.通过野生型、过表达型和干扰型烟草的种子萌发实验和高盐胁迫实验发现:与过表达型烟草相比,干扰型烟草的抗盐能力明显降低,且干扰型烟草的游离脯氨酸和可溶性糖含量在高盐处理后上升的幅度明显低于过表达型烟草.以上研究结果说明JcERF1基因在干扰型烟草体内已被有效沉默,同时说明该基因具有提高转基因烟草抗盐性的功能.
- 韩海洋孙焕王雪华严君魏炜
- 关键词:RNA干扰转基因荧光定量PCR