韩海洋
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆及重组蛋白纯化被引量:1
- 2014年
- 利用RACE技术克隆出麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,构建原核表达载体pET-28a-JcDHAR,并对重组菌表达的条件进行了优化,进而进行Ni亲和层析纯化蛋白.结果表明:表达产物与预期大小相符,His-JcDHAR蛋白质的分子质量为30kD;在37℃的条件下0.1mM的IPTG诱导表达5h时,获得了可溶性重组蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcDHAR原核表达成功.
- 唐佳喻川韩海洋严君魏炜
- 关键词:脱氢抗坏血酸还原酶原核表达蛋白纯化麻疯树
- JcERF1基因RNA干扰载体的构建、转化及沉默效果研究被引量:2
- 2015年
- 构建了麻疯树(Jatropha curcas)一个新的ERF类转录因子基因RNA干扰(RNAi)载体,并将之转入过表达JcERF1基因烟草体内,得到了RNA干扰型烟草.利用实时荧光定量PCR(QPCR)检测了JcERF1基因的表达量,发现该基因在干扰型烟草中表达量明显降低.通过野生型、过表达型和干扰型烟草的种子萌发实验和高盐胁迫实验发现:与过表达型烟草相比,干扰型烟草的抗盐能力明显降低,且干扰型烟草的游离脯氨酸和可溶性糖含量在高盐处理后上升的幅度明显低于过表达型烟草.以上研究结果说明JcERF1基因在干扰型烟草体内已被有效沉默,同时说明该基因具有提高转基因烟草抗盐性的功能.
- 韩海洋孙焕王雪华严君魏炜
- 关键词:RNA干扰转基因荧光定量PCR