唐佳
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆及重组蛋白纯化被引量：1
- 2014年
- 利用RACE技术克隆出麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,构建原核表达载体pET-28a-JcDHAR,并对重组菌表达的条件进行了优化,进而进行Ni亲和层析纯化蛋白.结果表明:表达产物与预期大小相符,His-JcDHAR蛋白质的分子质量为30kD;在37℃的条件下0.1mM的IPTG诱导表达5h时,获得了可溶性重组蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcDHAR原核表达成功.
- 唐佳喻川韩海洋严君魏炜
- 关键词：脱氢抗坏血酸还原酶原核表达蛋白纯化麻疯树
- 黑曲霉(Aspergillus niger)脂肪酶的纯化及性质分析
- 2012年
- 从黑曲霉发酵液中经硫酸铵分级沉淀,Phenyl-Sepharose疏水柱层析,DEAE-Sepharose 4B阴离子交换柱得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数达10倍,回收率50%。对脂肪酶的性质分析表明:该酶分子质量约为35 kDa,最适温度和最适pH分别为37℃和9.5,50℃以下和pH 6.0～11.0之间保持稳定,属于碱性脂肪酶。Mg^(2+)、Ca^(2+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Co^(2+)、Mn^(2+)对该酶有激活作用,而Al^(3+)、Fe^(2+)、Fe^(3+)对酶有严重抑制作用。变性剂盐酸胍和脲对其未见显著影响,而SDS强烈抑制其酶活。用不同氨基酸修饰剂对酶进行修饰,其中NBS和PMSF强烈抑制该酶活性,NBSF和DTT在低浓度下对酶活影响不大,2,3-丁二酮在高浓度下影响其活性。外加稳定剂如NaCl、PEG、甘油、山梨醇、海藻酸钠,均可不同程度的延长脂肪酶的半衰期。在一定质量比条件下,该酶有良好的抗蛋白酶性质。
- 陈巍唐佳余川魏炜
- 关键词：碱性脂肪酶纯化性质分析抗蛋白酶
